中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语/符号说明 | 第15-17页 |
前言 | 第17-21页 |
研究现状、成果 | 第17-20页 |
研究目的、方法 | 第20-21页 |
一、miR-155对胃癌生物学功能影响的实验研究 | 第21-47页 |
1.1 对象和方法 | 第21-38页 |
1.1.1 临床组织标本 | 第21页 |
1.1.2 实验细胞系 | 第21页 |
1.1.3 实验动物 | 第21页 |
1.1.4 实验设备和实验仪器 | 第21-22页 |
1.1.5 实验试剂和抗体 | 第22-23页 |
1.1.6 实验试剂和溶液配置方法 | 第23-25页 |
1.1.6.1 细胞培养所需试剂配置 | 第23-24页 |
1.1.6.2 其它各实验所需试剂配置 | 第24-25页 |
1.1.7 实验方法 | 第25-38页 |
1.1.7.1 细胞培养 | 第25-28页 |
1.1.7.2 细胞转染 | 第28-29页 |
1.1.7.3 组织总RNA提取 | 第29-30页 |
1.1.7.4 细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
1.1.7.5 逆转录反应 | 第31-32页 |
1.1.7.6 实时荧光定量 PCR (quantitative Real-Time PCR, qRT-PCR) | 第32-34页 |
1.1.7.7 EdU细胞增殖实验 | 第34-36页 |
1.1.7.8 Transwell实验 | 第36-37页 |
1.1.7.9 细胞划痕实验 | 第37-38页 |
1.1.7.10 统计学分析 | 第38页 |
1.2 实验结果 | 第38-42页 |
1.2.1 miR-155在胃癌患者血清及胃癌组织中的表达水平 | 第38-39页 |
1.2.2 体外实验证实miR-155对胃癌生物学行为的影响 | 第39-42页 |
1.2.2.1 构建稳定过表达/沉默miR-155的SGC7901细胞系 | 第39-40页 |
1.2.2.2 miR-155促进胃癌细胞增殖 | 第40-41页 |
1.2.2.3 miR-155促进胃癌细胞系SGC7901侵袭迁移 | 第41-42页 |
1.3 讨论 | 第42-46页 |
1.4 小结 | 第46-47页 |
二、miR-155通过靶向调控TGFβR2对胃癌生物学功能影响的实验研究 | 第47-86页 |
2.1 对象和方法 | 第47-71页 |
2.1.1 临床组织标本 | 第47页 |
2.1.2 实验细胞系 | 第47页 |
2.1.3 实验动物 | 第47页 |
2.1.4 实验设备和实验仪器 | 第47-48页 |
2.1.5 实验试剂和抗体 | 第48-50页 |
2.1.6 实验试剂和溶液配置方法 | 第50-54页 |
2.1.6.1 细胞培养所需试剂配置 | 第50页 |
2.1.6.2 WesternBlot所需主要试剂 | 第50-53页 |
2.1.6.3 荧光素酶报告基因实验所需主要试剂 | 第53-54页 |
2.1.7 实验方法 | 第54-71页 |
2.1.7.1 细胞培养 | 第54页 |
2.1.7.2 过表达/沉默miRNA-155 | 第54-55页 |
2.1.7.3 过表达/沉默TGFβR2 | 第55-56页 |
2.1.7.4 组织石蜡包埋 | 第56-57页 |
2.1.7.5 免疫组织化学实验 | 第57-58页 |
2.1.7.6 组织蛋白提取 | 第58-59页 |
2.1.7.7 细胞蛋白提取 | 第59页 |
2.1.7.8 蛋白免疫印迹实验(Westernblotting) | 第59-62页 |
2.1.7.9 组织总RNA提取 | 第62-63页 |
2.1.7.10 细胞总RNA提取 | 第63-64页 |
2.1.7.11 逆转录反应 | 第64-65页 |
2.1.7.12 实时荧光定量 PCR (quantitative Real-Time PCR, q RT-PCR) | 第65-68页 |
2.1.7.13 生物信息学预测 | 第68页 |
2.1.7.14 荧光素酶报告基因 | 第68-69页 |
2.1.7.15 EdU细胞增殖实验 | 第69页 |
2.1.7.16 Transwell实验 | 第69页 |
2.1.7.17 细胞划痕实验 | 第69页 |
2.1.7.18 小鼠成瘤实验 | 第69-70页 |
2.1.7.19 统计学分析 | 第70-71页 |
2.2 实验结果 | 第71-81页 |
2.2.1 胃癌组织中TGFβR2的表达水平分析 | 第71-72页 |
2.2.1.1 胃癌组织中TGFβR2高表达 | 第71页 |
2.2.1.2 胃癌组织中TGFβR2表达量增高,其mRNA水平无显著改变 | 第71-72页 |
2.2.2 miR-155靶向调控TGFβR2表达 | 第72-74页 |
2.2.2.1 通过生物信息学软件进行靶点预测 | 第72-73页 |
2.2.2.2 荧光素酶报告基因实验证实TGFβR2是miR-155的靶基因 | 第73-74页 |
2.2.3 体外实验证实miR-155在转录后水平负向调控TGFβR2的表达 | 第74-75页 |
2.2.4 体外实验证实TGFβR2对胃癌生物学行为的影响 | 第75-81页 |
2.2.4.1 构建稳定过表达/沉默TGFβR2的SGC7901细胞系 | 第75页 |
2.2.4.2 TGFβR2抑制胃癌细胞增殖 | 第75-77页 |
2.2.4.3 TGFβR2抑制胃癌细胞侵袭迁移 | 第77-79页 |
2.2.4.4 miR-155-TGFβR2信号通路对体内肿瘤生长的影响 | 第79-81页 |
2.3 讨论 | 第81-85页 |
2.4 小结 | 第85-86页 |
全文结论 | 第86-88页 |
论文创新点 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第100-101页 |
综述 MicroRNAs在胃癌诊治中的研究现状 | 第101-118页 |
综述参考文献 | 第109-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
个人简历 | 第120页 |