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MiR-155靶向抑制TGFβ R2表达促进胃癌生长侵袭的实验研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
缩略语/符号说明第15-17页
前言第17-21页
    研究现状、成果第17-20页
    研究目的、方法第20-21页
一、miR-155对胃癌生物学功能影响的实验研究第21-47页
    1.1 对象和方法第21-38页
        1.1.1 临床组织标本第21页
        1.1.2 实验细胞系第21页
        1.1.3 实验动物第21页
        1.1.4 实验设备和实验仪器第21-22页
        1.1.5 实验试剂和抗体第22-23页
        1.1.6 实验试剂和溶液配置方法第23-25页
            1.1.6.1 细胞培养所需试剂配置第23-24页
            1.1.6.2 其它各实验所需试剂配置第24-25页
        1.1.7 实验方法第25-38页
            1.1.7.1 细胞培养第25-28页
            1.1.7.2 细胞转染第28-29页
            1.1.7.3 组织总RNA提取第29-30页
            1.1.7.4 细胞总RNA的提取第30-31页
            1.1.7.5 逆转录反应第31-32页
            1.1.7.6 实时荧光定量 PCR (quantitative Real-Time PCR, qRT-PCR)第32-34页
            1.1.7.7 EdU细胞增殖实验第34-36页
            1.1.7.8 Transwell实验第36-37页
            1.1.7.9 细胞划痕实验第37-38页
            1.1.7.10 统计学分析第38页
    1.2 实验结果第38-42页
        1.2.1 miR-155在胃癌患者血清及胃癌组织中的表达水平第38-39页
        1.2.2 体外实验证实miR-155对胃癌生物学行为的影响第39-42页
            1.2.2.1 构建稳定过表达/沉默miR-155的SGC7901细胞系第39-40页
            1.2.2.2 miR-155促进胃癌细胞增殖第40-41页
            1.2.2.3 miR-155促进胃癌细胞系SGC7901侵袭迁移第41-42页
    1.3 讨论第42-46页
    1.4 小结第46-47页
二、miR-155通过靶向调控TGFβR2对胃癌生物学功能影响的实验研究第47-86页
    2.1 对象和方法第47-71页
        2.1.1 临床组织标本第47页
        2.1.2 实验细胞系第47页
        2.1.3 实验动物第47页
        2.1.4 实验设备和实验仪器第47-48页
        2.1.5 实验试剂和抗体第48-50页
        2.1.6 实验试剂和溶液配置方法第50-54页
            2.1.6.1 细胞培养所需试剂配置第50页
            2.1.6.2 WesternBlot所需主要试剂第50-53页
            2.1.6.3 荧光素酶报告基因实验所需主要试剂第53-54页
        2.1.7 实验方法第54-71页
            2.1.7.1 细胞培养第54页
            2.1.7.2 过表达/沉默miRNA-155第54-55页
            2.1.7.3 过表达/沉默TGFβR2第55-56页
            2.1.7.4 组织石蜡包埋第56-57页
            2.1.7.5 免疫组织化学实验第57-58页
            2.1.7.6 组织蛋白提取第58-59页
            2.1.7.7 细胞蛋白提取第59页
            2.1.7.8 蛋白免疫印迹实验(Westernblotting)第59-62页
            2.1.7.9 组织总RNA提取第62-63页
            2.1.7.10 细胞总RNA提取第63-64页
            2.1.7.11 逆转录反应第64-65页
            2.1.7.12 实时荧光定量 PCR (quantitative Real-Time PCR, q RT-PCR)第65-68页
            2.1.7.13 生物信息学预测第68页
            2.1.7.14 荧光素酶报告基因第68-69页
            2.1.7.15 EdU细胞增殖实验第69页
            2.1.7.16 Transwell实验第69页
            2.1.7.17 细胞划痕实验第69页
            2.1.7.18 小鼠成瘤实验第69-70页
            2.1.7.19 统计学分析第70-71页
    2.2 实验结果第71-81页
        2.2.1 胃癌组织中TGFβR2的表达水平分析第71-72页
            2.2.1.1 胃癌组织中TGFβR2高表达第71页
            2.2.1.2 胃癌组织中TGFβR2表达量增高,其mRNA水平无显著改变第71-72页
        2.2.2 miR-155靶向调控TGFβR2表达第72-74页
            2.2.2.1 通过生物信息学软件进行靶点预测第72-73页
            2.2.2.2 荧光素酶报告基因实验证实TGFβR2是miR-155的靶基因第73-74页
        2.2.3 体外实验证实miR-155在转录后水平负向调控TGFβR2的表达第74-75页
        2.2.4 体外实验证实TGFβR2对胃癌生物学行为的影响第75-81页
            2.2.4.1 构建稳定过表达/沉默TGFβR2的SGC7901细胞系第75页
            2.2.4.2 TGFβR2抑制胃癌细胞增殖第75-77页
            2.2.4.3 TGFβR2抑制胃癌细胞侵袭迁移第77-79页
            2.2.4.4 miR-155-TGFβR2信号通路对体内肿瘤生长的影响第79-81页
    2.3 讨论第81-85页
    2.4 小结第85-86页
全文结论第86-88页
论文创新点第88-89页
参考文献第89-100页
发表论文和参加科研情况说明第100-101页
综述 MicroRNAs在胃癌诊治中的研究现状第101-118页
    综述参考文献第109-118页
致谢第118-120页
个人简历第120页

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