| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 概述 | 第12页 |
| 1.2 植物防御昆虫的策略 | 第12-15页 |
| 1.2.1 直接防御和间接防御 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物在咬食后信号转导通路 | 第13-15页 |
| 1.3 植物Kunitz家族结构特征 | 第15-17页 |
| 1.3.1 蛋白酶抑制剂简介 | 第15页 |
| 1.3.2 植物丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族特征 | 第15-17页 |
| 1.4 植物Kunitz家族功能 | 第17-19页 |
| 1.4.1 调节内源蛋白酶活性 | 第17页 |
| 1.4.2 抗虫性 | 第17-18页 |
| 1.4.3 抗癌、抗炎 | 第18-19页 |
| 1.5 植源性防御蛋白在植食性昆虫消化道中的活性 | 第19-22页 |
| 1.5.1 植源性防御蛋白在植食性昆虫消化道中稳定存在 | 第19页 |
| 1.5.2 植源性防御蛋白在植食性昆虫消化道中具有活性 | 第19-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-24页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第22页 |
| 2.2 研究主要内容 | 第22-23页 |
| 2.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第三章 桑树Kunitz基因的鉴定、克隆及生物信息学分析 | 第24-46页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第24-27页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.1.2 获取基因序列的数据库 | 第24页 |
| 3.1.3 使用的生物学软件 | 第24页 |
| 3.1.4 实验试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.5 相关溶液配制方法 | 第25-27页 |
| 3.1.6 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-33页 |
| 3.2.1 桑树Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的鉴定 | 第27页 |
| 3.2.2 桑树RNA的提取与检测 | 第27-28页 |
| 3.2.3 RNA反转体系 | 第28页 |
| 3.2.4 桑树Kunitz家族相关基因的克隆 | 第28-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.3.1 桑树Kunitz家族基因的克隆分析 | 第33页 |
| 3.3.2 桑树Kunitz家族基因的理化性质分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 桑树Kunitz家族结构域分析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 桑树Kunitz家族基因结构分析 | 第35页 |
| 3.3.5 桑树Kunitz基因系统发生分析 | 第35-37页 |
| 3.3.6 桑树Kunitz基因保守基序分析 | 第37-38页 |
| 3.3.7 桑树与其它物种Kunitz基因系统发生树 | 第38页 |
| 3.3.8 桑树Kunitz家族基因上游转录调控位点分析 | 第38-43页 |
| 3.4 总结与讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 桑树Kunitz基因表达分析 | 第46-54页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 相关溶液配制方法 | 第46页 |
| 4.1.4 主要使用仪器 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 RNA提取与检测 | 第47页 |
| 4.2.2 RNA反转体系 | 第47页 |
| 4.2.3 桑树内参引物(MnActin3)检测cDNA质量 | 第47页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR(qRT-PCR)检测川桑Kunitz基因表达量 | 第47-49页 |
| 4.3 结果和分析 | 第49-52页 |
| 4.3.1 桑树内参引物(MnActin3)检测川桑cDNA质量 | 第49页 |
| 4.3.2 Kunitz家族基因在川桑组织表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3.3 咬食处理下桑树Kunitz家族基因在川桑叶片中表达分析 | 第50-52页 |
| 4.4 总结与讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 MnKPI-9蛋白水平的表达分析及在家蚕消化道内的稳定性分析 | 第54-68页 |
| 5.1 实验材料和试剂 | 第54-58页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 5.1.3 相关溶液配制方法 | 第55-58页 |
| 5.1.4 实验器材 | 第58页 |
| 5.2 实验方法 | 第58-62页 |
| 5.2.1 桑树蛋白质的提取 | 第58-59页 |
| 5.2.2 蛋白浓度的检测 | 第59-60页 |
| 5.2.3 Western Blot分析 | 第60-61页 |
| 5.2.4 活性检测 | 第61-62页 |
| 5.3 结果和分析 | 第62-65页 |
| 5.3.1 Western Blot结果检测MnKPI-9在川桑组织表达 | 第62页 |
| 5.3.2 Western Blot结果检测MnKPI-9在咬食处理下川桑叶片中的表达 | 第62-63页 |
| 5.3.3 Western Blot结果检测MnKPI-9在家蚕消化道中的稳定性 | 第63-64页 |
| 5.3.4 MnKPI-9在家蚕消化道中具有活性 | 第64-65页 |
| 5.4 总结与讨论 | 第65-68页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第68-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录 | 第78-84页 |
| 在读期间发表文章及参研课题 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
