摘要 | 第8-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-28页 |
1.1 微孢子虫基本特征概述 | 第16-20页 |
1.1.1 微孢子虫的结构 | 第17-18页 |
1.1.2 微孢子虫的侵染机制 | 第18-19页 |
1.1.3 微孢子虫的生活史 | 第19-20页 |
1.2 微孢子虫与宿主的相互作用 | 第20-23页 |
1.2.1 微孢子虫的代谢和转运蛋白 | 第20-21页 |
1.2.2 微孢子虫的分泌蛋白 | 第21-22页 |
1.2.3 微孢子虫对宿主细胞代谢和凋亡的调控 | 第22-23页 |
1.3 己糖激酶的基本特征和功能 | 第23-28页 |
1.3.1 己糖激酶的结构与分类 | 第23-24页 |
1.3.2 己糖激酶在代谢与凋亡中的功能 | 第24-25页 |
1.3.3 己糖激酶在免疫识别中的功能 | 第25-28页 |
第二章 引言 | 第28-32页 |
2.1 研究背景与目的意义 | 第28-29页 |
2.2 主要研究内容 | 第29-30页 |
2.3 研究技术路线 | 第30-32页 |
第三章 家蚕微粒子己糖激酶NbHXK的特征鉴定 | 第32-56页 |
3.1 材料与方法 | 第32-48页 |
3.1.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.2 试剂及溶液配制 | 第32-37页 |
3.1.3 主要仪器 | 第37页 |
3.1.4 实验方法与步骤 | 第37-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-54页 |
3.2.1 NbHXK基因克隆和序列分析 | 第48-51页 |
3.2.2 NbHXK信号肽分泌性验证 | 第51-53页 |
3.2.3 NbHXK在宿主细胞中的定位及核定位信号截短分析 | 第53-54页 |
3.3 讨论 | 第54-56页 |
第四章 家蚕微粒子侵染引起BmHXK和BmGLUT表达量上调 | 第56-66页 |
4.1 材料与方法 | 第56-61页 |
4.1.1 实验材料 | 第56页 |
4.1.2 试剂及溶液配制 | 第56页 |
4.1.3 主要仪器 | 第56-57页 |
4.1.4 实验方法与步骤 | 第57-61页 |
4.2 结果与分析 | 第61-64页 |
4.2.1 家蚕微粒子在家蚕中肠增殖情况检测 | 第61-62页 |
4.2.2 NbHXK在家蚕微粒子侵染家蚕中肠后的表达情况分析 | 第62页 |
4.2.3 BmHXK和BmGLUT在家蚕微粒子侵染家蚕中肠前后的表达情况分析 | 第62-63页 |
4.2.4 BmHXK在家蚕微粒子侵染家蚕BmN-SWU1和BmE细胞前后的表达情况分析 | 第63-64页 |
4.3 讨论 | 第64-66页 |
第五章 NbHXK和BmHXK促进家蚕微粒子的增殖 | 第66-84页 |
5.1 材料与方法 | 第66-69页 |
5.1.1 实验材料 | 第66页 |
5.1.2 试剂及溶液配制 | 第66-67页 |
5.1.3 主要仪器 | 第67页 |
5.1.4 实验方法与步骤 | 第67-69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-82页 |
5.2.1 BmHXK基因的克隆和亚细胞定位分析 | 第69-73页 |
5.2.2 大肠杆菌、家蚕微粒子侵染和饥饿处理对BmHXK定位的影响 | 第73-76页 |
5.2.3 共转NbHXK和BmHXK后饥饿处理检测亚细胞定位 | 第76-77页 |
5.2.4 过表达与敲除载体的构建与效率验证 | 第77-79页 |
5.2.5 NbHXK和BmHXK对家蚕微粒子增殖的影响 | 第79-80页 |
5.2.6 己糖激酶抑制剂2-DG对家蚕细胞葡萄糖摄取和增殖活力的影响 | 第80-81页 |
5.2.7 己糖激酶抑制剂2-DG对家蚕微粒子增殖的影响 | 第81-82页 |
5.3 讨论 | 第82-84页 |
第六章 NbHXK和BmHXK分别与BmVDAC具有相互作用 | 第84-94页 |
6.1 材料与方法 | 第84-86页 |
6.1.1 实验材料 | 第84页 |
6.1.2 试剂及溶液配制 | 第84-85页 |
6.1.3 主要仪器 | 第85页 |
6.1.4 实验方法与步骤 | 第85-86页 |
6.2 结果与分析 | 第86-92页 |
6.2.1 BmVDAC基因的克隆和亚细胞定位分析 | 第86-89页 |
6.2.2 免疫共沉淀分析BmHXK和NbHXK分别与BmVDAC的相互作用 | 第89-90页 |
6.2.3 双分子荧光互补分析BmHXK和NbHXK分别与BmVDAC的相互作用 | 第90-91页 |
6.2.4 荧光共定位分析BmHXK和NbHXK分别与BmVDAC的相互作用 | 第91-92页 |
6.3 讨论 | 第92-94页 |
第七章 NbHXK和BmHXK能够增强宿主细胞代谢并抑制宿主细胞凋亡 | 第94-108页 |
7.1 材料与方法 | 第94-97页 |
7.1.1 实验材料 | 第94页 |
7.1.2 试剂及溶液配制 | 第94-95页 |
7.1.3 主要仪器 | 第95页 |
7.1.4 实验方法与步骤 | 第95-97页 |
7.2 结果与分析 | 第97-105页 |
7.2.1 家蚕微粒子侵染后对宿主细胞的能量代谢和凋亡的影响 | 第97-98页 |
7.2.2 检测NbHXK和BmHXK对细胞葡萄糖吸收的影响 | 第98-99页 |
7.2.3 检测NbHXK和BmHXK对细胞内ATP含量的影响 | 第99-100页 |
7.2.4 检测NbHXK和BmHXK对细胞增殖活力的影响 | 第100-101页 |
7.2.5 检测NbHXK和BmHXK对细胞活性氧水平的影响 | 第101-103页 |
7.2.6 检测NbHXK和BmHXK对细胞凋亡的影响 | 第103-105页 |
7.3 讨论 | 第105-108页 |
第八章 研究总结与展望 | 第108-112页 |
8.1 结论 | 第108-109页 |
8.2 展望 | 第109-112页 |
论文创新点 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-122页 |
在读期间发表学术论文及参研课题情况 | 第122-124页 |
致谢 | 第124页 |