| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1.1 性别决定概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 性染色体决定性别 | 第15-16页 |
| 1.1.2 其他因素决定性别 | 第16页 |
| 1.2 果蝇的性别调控 | 第16-19页 |
| 1.2.1 体细胞性别调控 | 第17-18页 |
| 1.2.2 剂量补偿 | 第18-19页 |
| 1.3 家蚕的性别调控模式 | 第19-22页 |
| 1.3.1 家蚕性染色体研究 | 第19-20页 |
| 1.3.2 家蚕性别决定的分子机制 | 第20-21页 |
| 1.3.3 家蚕中dsx基因研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 长链非编码RNA概述 | 第22-27页 |
| 1.4.1 长链非编码RNA的基本特征 | 第23-24页 |
| 1.4.2 长链非编码RNA的作用机制 | 第24-25页 |
| 1.4.3 家蚕中长链非编码RNA研究进展 | 第25-27页 |
| 第2章 引言 | 第27-29页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第27-28页 |
| 2.2 科学问题及研究内容 | 第28页 |
| 2.3 技术路线 | 第28-29页 |
| 第3章 家蚕Bmdsx基因区间内lncRNA的克隆及鉴定 | 第29-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第30页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要溶剂及配制 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 3.2.1 家蚕Bmdsx基因区间内lncRNA的克隆 | 第31-35页 |
| 3.2.2 lncRNA在mRNA水平各组织的表达特征 | 第35-37页 |
| 3.2.3 Bmdsx-AS1的组织及细胞水平定位 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 家蚕Bmdsx基因区间内lncRNA的克隆及序列分析 | 第38-40页 |
| 3.3.2 Bmdsx-AS1在RNA水平的组织表达特征 | 第40-41页 |
| 3.3.3 Bmdsx-AS1在RNA水平的细胞及组织定位 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第4章 Bmdsx-AS1的功能研究 | 第45-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-52页 |
| 4.2.1 利用RNAi下调个体内Bmdsx-AS1的表达 | 第46-48页 |
| 4.2.2 增量表达Bmdsx-AS1基因的转基因载体构建 | 第48-49页 |
| 4.2.3 转基因家蚕获得 | 第49-50页 |
| 4.2.4 转基因家蚕插入位点检测 | 第50-51页 |
| 4.2.5 转基因家蚕的分子水平检测 | 第51-52页 |
| 4.2.6 转基因家蚕的下游靶基因检测 | 第52页 |
| 4.2.7 转基因家蚕表型观察 | 第52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-59页 |
| 4.3.1 利用RNAi干涉个体内Bmdsx-AS1 | 第52-54页 |
| 4.3.2 增量表达Bmdsx-AS1基因的转基因载体构建 | 第54-55页 |
| 4.3.3 增量表达Bmdsx-AS1基因的转基因家蚕品系的获得及插入位点检测 | 第55-56页 |
| 4.3.4 转基因家蚕的分子水平检测 | 第56-58页 |
| 4.3.5 转基因家蚕对Bmdsx下游靶基因的影响 | 第58页 |
| 4.3.6 转基因家蚕表型观察 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第5章 Bmdsx-AS1结合蛋白的筛选 | 第61-71页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61-62页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第61-62页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第62页 |
| 5.1.4 主要溶液的配制 | 第62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62-67页 |
| 5.2.1 提取精巢核蛋白 | 第62-63页 |
| 5.2.2标记探针Bmdsx-AS1 | 第63-64页 |
| 5.2.3 探针检测 | 第64页 |
| 5.2.4 RNA-proteinpulldown | 第64-65页 |
| 5.2.5 SDS-PAGE检测 | 第65-66页 |
| 5.2.6 银染分析 | 第66页 |
| 5.2.7 LC-MS/MS鉴定 | 第66-67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-69页 |
| 5.3.1 合成目的RNA | 第67页 |
| 5.3.2 标记目的RNA | 第67页 |
| 5.3.3 RNA-proteinpulldown | 第67-68页 |
| 5.3.4 LC-MS/MS分析 | 第68-69页 |
| 5.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第6章 蛋白的原核表达与纯化及蛋白与Bmdsx-AS1的互作关系研究 | 第71-87页 |
| 6.1 材料与方法 | 第71-74页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第71页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第71-72页 |
| 6.1.3 实验试剂 | 第72页 |
| 6.1.4 主要溶液的配制 | 第72-74页 |
| 6.2 实验方法 | 第74-80页 |
| 6.2.1 hnRNPH基因的克隆及原核表达载体构建 | 第74-76页 |
| 6.2.2 hnRNPH蛋白原核表达条件摸索 | 第76-77页 |
| 6.2.3 hnRNPH蛋白的纯化 | 第77-78页 |
| 6.2.4 凝胶阻滞实验 | 第78-80页 |
| 6.3 结果与分析 | 第80-85页 |
| 6.3.1 hnRNPH基因的克隆及原核表达载体构建 | 第80-82页 |
| 6.3.2 hnRNPH蛋白原核表达条件摸索 | 第82-83页 |
| 6.3.3 hnRNPH蛋白的纯化 | 第83-84页 |
| 6.3.4 凝胶阻滞实验 | 第84-85页 |
| 6.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第7章 综合与讨论 | 第87-89页 |
| 7.1 家蚕Bmdsx基因区间内lncRNA的克隆及鉴定 | 第87页 |
| 7.2 Bmdsx-AS1的功能研究 | 第87-88页 |
| 7.3 Bmdsx-AS1结合蛋白的筛选 | 第88页 |
| 7.4 HnRNPH蛋白与Bmdsx-AS1基因互作关系验证 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 在读期间发表的论文及参加课题 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
