| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 一 肺炎链球菌与肺炎疫苗 | 第12-17页 |
| (一) 肺炎链球菌简介 | 第12-13页 |
| (二) 肺炎链球菌疫苗 | 第13-17页 |
| 二 肺炎链球菌PhtD和PcpA蛋白疫苗简介 | 第17-18页 |
| (一) PhtD蛋白的结构和蛋白疫苗的研究进展 | 第17-18页 |
| (二) PcpA蛋白的结构和PcpA截断型蛋白疫苗的研究进展 | 第18页 |
| 四 论文设计 | 第18-21页 |
| (一) 论文目的 | 第18-19页 |
| (二) 实验方案设计 | 第19-21页 |
| 第二章 肺炎链球菌PhtD和PcpA蛋白的制备 | 第21-47页 |
| 第一节 实验材料、试剂与仪器 | 第21-23页 |
| (一) 动物、质粒、菌株、毒株 | 第21页 |
| (二) 酶及试剂盒 | 第21-22页 |
| (三) 主要试剂 | 第22-23页 |
| 第二节 实验方法 | 第23-32页 |
| (一) 表达质粒pET20b-PhtD的构建 | 第23-25页 |
| (二) PhtD蛋白的表达、纯化 | 第25-26页 |
| (三) PhtD蛋白Western-Blot检测: | 第26-27页 |
| (四) 表达质粒pET20b-PhtD~(N210)的构建 | 第27-28页 |
| (五) PhtD~(N210)蛋白的表达、纯化 | 第28-29页 |
| (六) PhtD~(N210)蛋白Westem-Blot检测: | 第29页 |
| (七) 表达质粒pET20b- PcpA~(N377)的构建 | 第29-31页 |
| (八) PcpA~(N377)蛋白的表达、纯化 | 第31页 |
| (九) PcpA~(N377)蛋白Western-Blotting检测: | 第31-32页 |
| 第三节 实验结果与讨论 | 第32-47页 |
| (一) PhtD、PhtD~(N210)、PcpA~(N377)蛋白的基因设计 | 第32-34页 |
| (二) 质粒pET20b-PhtD的构建 | 第34-35页 |
| (三) PhtD蛋白的表达、纯化与Westen-Blotting验证 | 第35-39页 |
| (四) 表达质粒pET20b- PhtD~(N210)的构建 | 第39-41页 |
| (五) PhtD~(N210)蛋白的表达与纯化 | 第41-43页 |
| (六) 表达质粒pET20b- PcpA~(N377)的构建 | 第43-44页 |
| (七) PcpA~(N377)蛋白的表达、纯化与Western-Blotting验证 | 第44-47页 |
| 第三章 肺炎链球菌PhtD和PcpA蛋白疫苗的评价研究 | 第47-54页 |
| 第一节 材料、试剂 | 第47页 |
| (一) 主要菌株和试剂 | 第47页 |
| 第二节 实验方法 | 第47页 |
| (一) 小鼠免疫和攻毒 | 第47页 |
| 第三节 实验结果 | 第47-52页 |
| (一) PhtD、PhtD~(N210)、PcpA~(N377)蛋白疫苗的免疫原性评价 | 第47-49页 |
| (二) PhtD、PhtD~(N210)、PcpA~(N377)蛋白疫苗的免疫保护性研究 | 第49-52页 |
| 第四节 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 PcpA~(N377)蛋白免疫多克隆抗体的抗粘附功能研究 | 第54-60页 |
| 一 材料、试剂 | 第54-55页 |
| (一) 细胞、药品 | 第54-55页 |
| 二 实验方法 | 第55-56页 |
| (一) PcpA~(N377)蛋白多克隆抗体的制备 | 第55页 |
| (二) PcpA~(N377)蛋白多克隆抗体抗粘附功能实验步骤 | 第55-56页 |
| 三 实验结果 | 第56-59页 |
| (一) PcpA~(N377)蛋白多克隆抗体的制备 | 第56页 |
| (二) PcpA~(N377)蛋白抗体抗粘附功能实验条件的摸索 | 第56-58页 |
| (三) PcpA抗体抗肺炎链球菌抗粘附功能研究结果 | 第58-59页 |
| 四 讨论 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
