| 中文摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 生物正交反应研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1 生物正交反应 | 第10-11页 |
| 1.1.2 生物正交官能团的引入方法 | 第11-12页 |
| 1.1.3 生物正交反应的应用 | 第12-15页 |
| 1.2 蛋白质组学概述及主要研究技术 | 第15-18页 |
| 1.2.1 蛋白质组学 | 第15页 |
| 1.2.2 蛋白质组学的主要研究技术 | 第15-18页 |
| 第二章 非天然氨基酸代谢掺入法检测新生成蛋白方法的建立 | 第18-28页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 Raw264.7细胞系的培养、非天然氨基酸掺入及LPS刺激 | 第19-20页 |
| 2.2.2 总蛋白提取及点击化学反应 | 第20页 |
| 2.2.3 ELISA法测定肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表达水平 | 第20-21页 |
| 2.2.4 新生成蛋白ELISA检测方法的建立(用来检测标记Biotin的TNF-α) | 第21-22页 |
| 2.2.5 新生成蛋白免疫印迹检测方法的建立 | 第22-23页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第23-27页 |
| 2.3.1 实验体系的条件优化及建立 | 第23-25页 |
| 2.3.2 Raw264.7细胞在LPS刺激下新生成蛋白的检测 | 第25-26页 |
| 2.3.3 Raw264.7细胞在LPS刺激下新生成TNF-α蛋白的检测 | 第26-27页 |
| 2.4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 胶内点击化学反应检测新生成蛋白的方法建立 | 第28-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 3.2.1 SW-620细胞系的培养及非天然氨基酸掺入 | 第29-30页 |
| 3.2.2 总蛋白提取及胶内点击化学反应 | 第30-31页 |
| 3.2.3 新生成蛋白Westernblot检测 | 第31页 |
| 3.2.4 新生成蛋白双向电泳检测方法的建立 | 第31-34页 |
| 3.3 实验结果及讨论 | 第34-38页 |
| 3.3.1 Westernblot法验证胶内点击化学反应的可行性 | 第34-35页 |
| 3.3.2 Westernblot法验证胶内点击化学反应的效率与蛋白量之间的关系 | 第35-36页 |
| 3.3.3 探究额外掺入4mmol/LAHA对点击化学反应的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.4 双向电泳检测新生成蛋白 | 第37-38页 |
| 3.4 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 非天然氨基酸AHA对SW-620细胞系蛋白质组的影响 | 第39-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 SW-620细胞系的培养及非天然氨基酸的掺入 | 第40页 |
| 4.2.2 总蛋白提取(尿素法)及蛋白定量 | 第40-41页 |
| 4.2.3 蛋白质组的质谱检测 | 第41-43页 |
| 4.3 实验结果及讨论 | 第43-48页 |
| 4.3.1 SDS-PAGE电泳验证两组样品蛋白量是否一致 | 第43页 |
| 4.3.2 质谱检测结果 | 第43-48页 |
| 4.4 小结 | 第48-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
