烯键还原酶的固定化与应用研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 烯键还原酶 | 第13-16页 |
| 1.1.1 烯键还原酶的研究现状 | 第13页 |
| 1.1.2 烯键还原酶的催化机理 | 第13-14页 |
| 1.1.3 烯键还原酶催化的反应类型 | 第14-15页 |
| 1.1.4 烯键还原酶催化反应的局限性 | 第15-16页 |
| 1.2 交联酶聚集体 | 第16-17页 |
| 1.2.1 制备原理 | 第16页 |
| 1.2.2 影响因素 | 第16-17页 |
| 1.2.2.1 酶性质的影响 | 第16页 |
| 1.2.2.2 沉淀剂的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 交联剂的影响 | 第17页 |
| 1.3 仿生固定化 | 第17-19页 |
| 1.3.1 制备原理 | 第17-18页 |
| 1.3.2 影响因素 | 第18-19页 |
| 1.3.2.1 催化剂的影响 | 第18页 |
| 1.3.2.2 磷酸缓冲液的影响 | 第18-19页 |
| 1.4 纤维素载体共价固定化 | 第19-23页 |
| 1.4.1 制备原理 | 第20页 |
| 1.4.2 影响因素 | 第20-23页 |
| 1.4.2.1 木质纤维素成分的影响 | 第20-22页 |
| 1.4.2.2 木质纤维素预处理方法的影响 | 第22页 |
| 1.4.2.3 纤维素表面修饰的影响 | 第22-23页 |
| 1.5 本论文的研究思想 | 第23-25页 |
| 第2章 交联酶聚集体共固定化 | 第25-37页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.3.1 试剂的配置 | 第26页 |
| 2.3.2 ER的表达与纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.3 制备交联酶聚集体共固定化酶 | 第27页 |
| 2.3.4 蛋白浓度的测定 | 第27页 |
| 2.3.5 固定化酶固定化效率和活力回收率的测定 | 第27-28页 |
| 2.3.6 共固定化酶的SEM表征 | 第28页 |
| 2.3.7 共固定化酶的稳定性 | 第28页 |
| 2.3.8 共固定化酶的重复使用性 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-36页 |
| 2.4.1 ER的表达与纯化 | 第29页 |
| 2.4.2 沉淀剂种类和浓度的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.3 交联剂种类和浓度的影响 | 第30-32页 |
| 2.4.4 ER和GDH酶量的配比 | 第32页 |
| 2.4.5 BSA辅剂的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.6 共固定化酶的SEM表征 | 第33-34页 |
| 2.4.7 共固定化酶的稳定性 | 第34-35页 |
| 2.4.8 共固定化酶的重复使用性 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第3章 仿生共固定化 | 第37-44页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第37页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.3.2 制备仿生共固定化酶 | 第38页 |
| 3.3.3 共固定化酶的SEM表征 | 第38页 |
| 3.3.4 共固定化酶的稳定性 | 第38页 |
| 3.3.5 共固定化酶的重复使用性 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 3.4.1 催化剂PEI的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 缓冲液条件和两种酶量配比的优化 | 第39-40页 |
| 3.4.3 固定化时间的优化 | 第40页 |
| 3.4.4 共固定化酶的SEM表征 | 第40-41页 |
| 3.4.5 共固定化酶的稳定性 | 第41-42页 |
| 3.4.6 共固定化酶的重复使用性 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-44页 |
| 第4章 纤维素载体共价固定化 | 第44-55页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料 | 第44-45页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第44页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 试剂配制 | 第45页 |
| 4.3.2 木质纤维素的预处理 | 第45页 |
| 4.3.3 木质纤维素活化度的测定 | 第45-46页 |
| 4.3.4 纤维素的表面修饰 | 第46页 |
| 4.3.5 制备纤维素载体共价固定化酶 | 第46页 |
| 4.3.6 固定化酶的SEM表征 | 第46页 |
| 4.3.7 固定化酶的稳定性 | 第46-47页 |
| 4.3.8 固定化酶的重复使用性 | 第47页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 4.4.1 木质纤维素预处理的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.2 纤维素表面修饰方法的优化 | 第48-50页 |
| 4.4.3 制备纤维素载体共价固定化酶条件的优化 | 第50-51页 |
| 4.4.4 固定化酶的SEM表征 | 第51-52页 |
| 4.4.5 固定化酶的稳定性 | 第52-53页 |
| 4.4.6 固定化酶的重复使用性 | 第53-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-55页 |
| 第5章 固定化酶催化的连续反应 | 第55-61页 |
| 5.1 引言 | 第55页 |
| 5.2 实验材料 | 第55页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第55页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第55页 |
| 5.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 5.3.1 试剂的配置 | 第55-56页 |
| 5.3.2 模型反应的建立 | 第56页 |
| 5.3.3 催化反应的动力学研究 | 第56页 |
| 5.3.4 固定化酶催化的连续反应 | 第56-57页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第57-60页 |
| 5.4.1 模型反应的条件优化 | 第57-58页 |
| 5.4.2 催化反应的动力学分析 | 第58-59页 |
| 5.4.3 固定化酶催化的连续反应效果 | 第59-60页 |
| 5.5 小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 科研成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
