中文摘要 | 第9-14页 |
英文摘要 | 第14-18页 |
第一部分 缺氧复氧导致肾素(前体)受体在 H9c2 胚胎大鼠心肌细胞中的表达变化 | 第19-43页 |
(一) 前言 | 第19页 |
(二) 材料和方法 | 第19-31页 |
1、 实验材料 | 第19-21页 |
2、 H9c2 细胞培养及传代 | 第21-22页 |
3、 免疫细胞化学方法和步骤 | 第22-23页 |
4、 免疫荧光方法和步骤 | 第23-24页 |
5、 RT-PCR 检测 (P)RR mRNA 表达 | 第24-26页 |
6、 siRNA 干扰实验 | 第26-27页 |
7、 Real-Time PCR 检测(P)RR mRNA 的表达 | 第27-29页 |
8、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立 | 第29页 |
9、 实验分组 | 第29页 |
10、 Western blot 方法测定(P)RR 蛋白表达 | 第29-31页 |
(三) 数据统计方法 | 第31页 |
(四) 结果 | 第31-34页 |
1、 (P)RR 在 H9c2 胚胎大鼠心肌细胞中的表达 | 第31-32页 |
2、 (P)RR 干扰的效率检测结果 | 第32-33页 |
3、 缺氧复氧致(P)RR 蛋白表达的变化 | 第33-34页 |
(五) 讨论 | 第34-37页 |
(六) 结论 | 第37-38页 |
(七) 参考文献 | 第38-43页 |
第二部分 缺氧复氧致 H9c2 心肌细胞凋亡及炎症因子表达增加 | 第43-59页 |
(一) 前言 | 第43页 |
(二) 材料和方法 | 第43-49页 |
1、 实验材料 | 第43-45页 |
2、 H9c2 细胞培养及传代 | 第45-46页 |
3、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立 | 第46页 |
4、 Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡步骤 | 第46页 |
5、 Western blot 方法检测 Caspase-3 蛋白表达 | 第46-48页 |
6、 ELISA 方法测定炎症因子表达 | 第48-49页 |
(三) 数据统计方法 | 第49页 |
(四) 结果 | 第49-51页 |
1、 Annexin V-FITC/PI 法检测缺氧复氧组 H9c2 细胞凋亡率 | 第49-50页 |
2、 缺氧复氧致 H9c2 细胞 Caspase-3 蛋白表达水平增加 | 第50-51页 |
3、 缺氧复氧致 H9c2 细胞分泌炎症因子增加 | 第51页 |
(五) 讨论 | 第51-55页 |
(六) 结论 | 第55-56页 |
(七) 参考文献 | 第56-59页 |
第三部分 肾素(前体)受体介导的 H9c2 心肌细胞缺氧复氧损伤的信号转导机制 | 第59-88页 |
(一) 前言 | 第59页 |
(二) 材料和方法 | 第59-66页 |
1、 实验材料 | 第59-62页 |
2、 H9c2 细胞培养及传代 | 第62-63页 |
3、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立 | 第63页 |
4、 实验分组 | 第63页 |
5、 Western blot 检测 p-p38 及 Caspase-3 蛋白表达量 | 第63-65页 |
6、 siRNA 干扰实验 | 第65页 |
7、 ELISA 方法检测炎症因子表达水平 | 第65-66页 |
(三) 数据统计方法 | 第66页 |
(四) 结果 | 第66-74页 |
1、 缺氧复氧致 p38MAPK 磷酸化水平增加 | 第66-67页 |
2、 siRNA 干扰(P)RR 致 p-p38MAPK 表达下调 | 第67-69页 |
3、 siRNA 干扰(P)RR 单独或合并阻断 p38MAPK 能够减轻缺氧复氧所致细胞凋亡 | 第69-72页 |
4、 siRNA 干扰(P)RR 单独或合并阻断 p38MAPK 对缺氧复氧所致炎症因子IL-6、TNF-a、TGF-β表达的影响 | 第72-74页 |
(五) 讨论 | 第74-80页 |
(六) 结论 | 第80-81页 |
(七) 参考文献 | 第81-88页 |
综述 | 第88-100页 |
参考文献 | 第95-100页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |