摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-22页 |
1.1 人工授精 | 第11-12页 |
1.2 精子能量代谢研究进展 | 第12-13页 |
1.2.1 精子代谢所需的能量物质 | 第12页 |
1.2.2 不同阶段精子能量需求特征 | 第12页 |
1.2.3 精子的糖代谢途径 | 第12-13页 |
1.2.4 葡萄糖和果糖对精子代谢的影响 | 第13页 |
1.3 影响精子液态保存的因素 | 第13-16页 |
1.3.1 低温对精子的影响 | 第13-14页 |
1.3.2 精浆对精子的影响 | 第14页 |
1.3.3 离子物质对精子的影响 | 第14页 |
1.3.4 糖类物质对精子的影响 | 第14-15页 |
1.3.5 ROS对精子的影响 | 第15-16页 |
1.4 细胞利用葡萄糖代谢途径 | 第16-18页 |
1.5 精子质量检测方法 | 第18-20页 |
1.5.1 精子运动能力 | 第18-19页 |
1.5.2 精子活率 | 第19页 |
1.5.3 精子顶体状态 | 第19页 |
1.5.4 质膜完整性的检测 | 第19-20页 |
1.5.5 线粒体膜电位 | 第20页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-28页 |
2.1 实验药品及主要仪器 | 第22页 |
2.1.1 主要药品 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
2.2 实验动物 | 第22页 |
2.3 溶液的配制 | 第22-24页 |
2.3.1 主要稀释液配方 | 第22-23页 |
2.3.2 抑制剂及浓储液配制 | 第23页 |
2.3.3 低渗溶液的配制 | 第23页 |
2.3.4 荧光染液的配制 | 第23-24页 |
2.4 精液的采集 | 第24页 |
2.5 精液的稀释与分装 | 第24页 |
2.6 降温曲线的绘制 | 第24页 |
2.7 精液的降温与保存 | 第24-25页 |
2.8 精子质量的检测 | 第25-26页 |
2.8.1 精子活力和活率检测 | 第25页 |
2.8.2 精子顶体完整率检测 | 第25-26页 |
2.8.3 质膜完整性的检测 | 第26页 |
2.9 实验设计 | 第26-27页 |
2.9.1 Ca~(2+)、Mg~(2+)对液态保存猪精子的影响 | 第26页 |
2.9.2 保存温度对猪液态精液保存的影响 | 第26页 |
2.9.3 不同浓度的葡萄糖对猪精液液态保存的影响 | 第26页 |
2.9.4 丙酮酸对猪精液液态保存的影响 | 第26页 |
2.9.5 糖酵解途径对液态保存猪精子的作用 | 第26-27页 |
2.9.6 磷酸戊糖途径对液态保存猪精子的作用 | 第27页 |
2.9.7 鱼藤酮对液态保存猪精子的影响 | 第27页 |
2.10 统计分析 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-45页 |
3.1 猪精液体外保存系统的优化与构建 | 第28-32页 |
3.1.1 三种保存温度的降温速率测定 | 第28-29页 |
3.1.2 不同保存温度对猪精子存活率的影响 | 第29-31页 |
3.1.3 Ca~(2+)、Mg~(2+)对液态保存猪精子的影响 | 第31-32页 |
3.2 液态保存过程中葡萄糖对猪精子的影响 | 第32-45页 |
3.2.1 不同浓度的葡萄糖对猪精子存活率的影响 | 第32-35页 |
3.2.2 稀释液中添加3mM葡萄糖对精子顶体和质膜功能的影响 | 第35-37页 |
3.2.3 不同浓度的丙酮酸钠对猪精子存活率的影响 | 第37-39页 |
3.2.4 添加碘醋酸钠阻断葡萄糖糖酵解代谢途径对猪精子存活影响 | 第39-41页 |
3.2.5 添加6-氨基烟酰胺阻断葡萄糖磷酸戊糖途径对猪精子存活影响 | 第41-42页 |
3.2.6 线粒体电子传递阻断剂鱼藤酮对液态保存猪精子的影响 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 用PBS进行猪精液体外保存系统构建的重要性 | 第45页 |
4.2 保存温度及降温速率对猪精子的影响 | 第45页 |
4.3 钙、镁离子对猪精子存活的影响 | 第45-46页 |
4.4 葡萄糖在猪精液液态保存中的作用 | 第46页 |
4.5 液态保存过程中猪精子葡萄糖代谢的可能途径 | 第46-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |