| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 硒在机体内的代谢 | 第11-12页 |
| 1.2 硒蛋白的种类与功能 | 第12-14页 |
| 1.2.1 抗氧化硒蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2.2 脱碘酶家族硒蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.3 钙调节硒蛋白 | 第14页 |
| 1.3 硒对甲状腺功能的影响 | 第14-15页 |
| 1.4 硒对肾脏的影响 | 第15页 |
| 1.5 炎症基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6 目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 试验的总体设计 | 第17页 |
| 2.2 样品的采集与处理 | 第17页 |
| 2.3 主要仪器和试剂 | 第17-18页 |
| 2.3.1 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.4 鸡HO-1和iNOS基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备 | 第18-23页 |
| 2.4.1 鸡HO-1和iNOS基因序列的克隆与鉴定 | 第18-21页 |
| 2.4.2 鸡HO-1和iNOS基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第21-22页 |
| 2.4.3 抗鸡HO-1和iNOS多克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
| 2.5 检测项目与方法 | 第23-26页 |
| 2.5.1 甲状腺激素检测 | 第23页 |
| 2.5.2 组织抗氧化功能检测 | 第23页 |
| 2.5.3 肾功能指标检测 | 第23-24页 |
| 2.5.4 肾脏HO-1和iNOS蛋白表达的检测 | 第24页 |
| 2.5.5 引物的设计与合成 | 第24-25页 |
| 2.5.6 实时PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.5.7 2~(-△△Ct)法分析基因表达的相对差异 | 第26页 |
| 2.6 试验数据的分析与统计 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-37页 |
| 3.1 鸡HO-1和iNOS多克隆抗体制备 | 第27-31页 |
| 3.1.1 组织中总RNA的提取与鉴定 | 第27页 |
| 3.1.2 鸡HO-1和iNOS基因的PCR扩增结果 | 第27-28页 |
| 3.1.3 鸡HO-1和iNOS mRNA基因序列的测序结果 | 第28页 |
| 3.1.4 重组表达载体的构建与鉴定 | 第28页 |
| 3.1.5 融合蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第28-30页 |
| 3.1.6 多克隆抗体的制备和鉴定结果 | 第30-31页 |
| 3.2 鸡抗氧化功能的检测结果 | 第31-32页 |
| 3.2.1 鸡肾脏组织抗氧化功能的检测结果 | 第31-32页 |
| 3.2.2 鸡甲状腺组织抗氧化功能的检测结果 | 第32页 |
| 3.3 鸡肾脏功能指标的检测结果 | 第32-33页 |
| 3.4 鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA和蛋白表达的检测结果 | 第33-34页 |
| 3.4.1 实时PCR检测方法的建立 | 第33页 |
| 3.4.2 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA表达影响的检测结果 | 第33-34页 |
| 3.5 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS蛋白表达影响的检测结果 | 第34页 |
| 3.6 缺硒对鸡甲状腺功能影响的检测结果 | 第34-37页 |
| 3.6.1 血清中T_3、T_4、FT_3、FT_4和TSH检测结果 | 第34-35页 |
| 3.6.2 缺硒对鸡甲状腺25种硒蛋白mRNA的检测结果 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-42页 |
| 4.1 鸡HO-1和iNOS的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第37-38页 |
| 4.2 缺硒对鸡肾脏的影响 | 第38-40页 |
| 4.2.1 缺硒对鸡肾脏HO-1表达的影响 | 第38-39页 |
| 4.2.2 缺硒对鸡肾脏iNOS表达的影响 | 第39页 |
| 4.2.3 缺硒对鸡肾脏抗氧化功能的影响 | 第39-40页 |
| 4.2.4 缺硒对肾功能指标检测的影响 | 第40页 |
| 4.3 缺硒对鸡甲状腺组织内25种硒蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| 4.4 缺硒对鸡甲状腺激素的影响 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
