| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第18-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-42页 |
| 1.1 甲醛污染现状及其危害 | 第19-20页 |
| 1.1.1 甲醛的性质 | 第19页 |
| 1.1.2 甲醛的污染来源及现状 | 第19-20页 |
| 1.1.3 甲醛对人体的危害 | 第20页 |
| 1.2 甲醛污染的治理方法 | 第20-22页 |
| 1.2.1 物理方法和化学方法 | 第20-21页 |
| 1.2.2 生物清除法 | 第21-22页 |
| 1.3 植物HCHO吸收能力和吸收机理的研究进展 | 第22-29页 |
| 1.3.1 植物HCHO吸收能力的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3.2 植物吸收气体HCHO机理的研究进展 | 第23-29页 |
| 1.3.2.1 调控植物气孔开放的相关因素 | 第23-28页 |
| 1.3.2.2 植物HCHO吸收的代谢途径的研究 | 第28-29页 |
| 1.4 提高植物HCHO代谢能力和抗性的遗传工程研究进展 | 第29-32页 |
| 1.4.1 过量表达FDH/SHMT提高转基因烟草吸收HCHO能力的遗传操作 | 第29-30页 |
| 1.4.2 转入甲醛光合同化途径提高转基因植物吸收HCHO能力的遗传工程 | 第30-32页 |
| 1.4.3 甲醛脱氢酶(FALDH)和其他基因的转入提高植物甲醛修复能力的遗传工程 | 第32页 |
| 1.5 植物响应HCHO胁迫生理机理和分子机理的研究进展 | 第32-36页 |
| 1.5.1 HCHO胁迫对植物生理生化特性的影响 | 第32-33页 |
| 1.5.2 植物响应HCHO胁迫应答基因的研究进展 | 第33-36页 |
| 1.5.2.1 代谢和能量相关基因 | 第33-34页 |
| 1.5.2.2 光合相关基因 | 第34-35页 |
| 1.5.2.3 防御相关基因 | 第35-36页 |
| 1.6 过氧化氢和过氧化氢酶概述 | 第36-40页 |
| 1.6.1 过氧化氢简介 | 第36-37页 |
| 1.6.2 过氧化氢酶的结构特征 | 第37页 |
| 1.6.3 过氧化氢酶的生理功能 | 第37-39页 |
| 1.6.3.1 植物的抗逆信号分子 | 第37-38页 |
| 1.6.3.2 增强植物的光合能力及延缓衰老 | 第38页 |
| 1.6.3.3 维持植物细胞内的氧化还原平衡 | 第38-39页 |
| 1.6.4 过氧化氢酶基因的克隆和转基因植物的抗逆性 | 第39-40页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 过量表达拟南芥CAT植物表达载体的构建与转基因植物的鉴定 | 第42-53页 |
| 2.1 材料与方法 | 第42-49页 |
| 2.1.1 植物材料培养 | 第43页 |
| 2.1.2 菌株及相关载体与材料 | 第43页 |
| 2.1.3 CAT入门克隆载体pENTR~*-PrbcS-~*T-CAT和植物过表达载体pK_2-PrbcS-~*T-CAT的构建 | 第43-46页 |
| 2.1.4 烟草的遗传转化及转基因烟草的培养与筛选 | 第46-47页 |
| 2.1.5 过表达CAT转基因烟草基因组插入和转录水平的检测 | 第47-48页 |
| 2.1.6 过表达CAT转基因烟草CAT活性的检测 | 第48页 |
| 2.1.7 大量培养无菌转基因烟草幼苗 | 第48-49页 |
| 2.1.8 数据统计分析 | 第49页 |
| 2.2 结果与分析 | 第49-51页 |
| 2.2.1 植物过表达载体pK_2-PrbcS-~*T-CAT的构建 | 第49-50页 |
| 2.2.2 过表达CAT转基因烟草的鉴定 | 第50-51页 |
| 2.3 讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 过量表达拟南芥CAT增强烟草对气体甲醛吸收和生理抗性 | 第53-69页 |
| 3.1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 3.1.1 植物材料培养 | 第54页 |
| 3.1.2 转基因烟草对气体甲醛吸收能力的测定 | 第54-55页 |
| 3.1.3 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草气孔导度、蒸腾速率的测定 | 第55页 |
| 3.1.4 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草气孔开度的观察 | 第55页 |
| 3.1.5 叶绿素含量的测定 | 第55页 |
| 3.1.6 可溶性糖和总蛋白含量的测定 | 第55-56页 |
| 3.1.7 H_2O_2荧光标记染色 | 第56-57页 |
| 3.1.8 H_2O_2、MDA和PC含量的测定 | 第57-58页 |
| 3.1.9 数据统计分析 | 第58页 |
| 3.2 结果与分析 | 第58-66页 |
| 3.2.1 过量表达拟南芥CAT的转基因烟草植株吸收气体甲醛能力 | 第58-60页 |
| 3.2.2 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草气孔导度、开度及蒸腾速率的比较 | 第60-62页 |
| 3.2.4 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草叶绿素含量的变化 | 第62-63页 |
| 3.2.5 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草可溶性总糖和总蛋白含量的变化 | 第63-64页 |
| 3.2.6 H_2O_2探针检测气体HCHO胁迫处理烟草叶片中的H_2O_2 | 第64-65页 |
| 3.2.7 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草叶片H_2O_2、MDA和PC含量的变化 | 第65-66页 |
| 3.3 讨论 | 第66-69页 |
| 第四章 过量表达拟南芥CAT增强烟草对气体甲醛吸收的分子机理研究 | 第69-76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第69-71页 |
| 4.1.1 胁迫处理的烟草叶片质膜提取和PM H~+-ATP酶活性测定 | 第69-70页 |
| 4.1.2 胁迫处理的烟草叶片氢泵活性测定 | 第70页 |
| 4.1.3 14-3-3蛋白抗体、向光素抗体及质膜H~+-ATPase抗体的制备 | 第70页 |
| 4.1.4 免疫共沉淀检测14-3-3蛋白与质膜H~+-ATP酶和向光素的互作 | 第70-71页 |
| 4.1.5 数据统计分析 | 第71页 |
| 4.2 结果与分析 | 第71-74页 |
| 4.2.1 气体甲醛胁迫对烟草叶片14-3-3蛋白与向光素、质膜H~+-ATPase互作的影响 | 第71-72页 |
| 4.2.2 气体甲醛胁迫对烟草叶片质膜H~+-ATPase活性的影响 | 第72-73页 |
| 4.2.3 气体甲醛胁迫对烟草叶片氢泵活性的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 过量表达拟南芥CAT增强烟草对环境污染气体甲醛吸收的机理研究 | 第76-88页 |
| 5.1 材料与方法 | 第76-78页 |
| 5.1.1 植物材料培养 | 第76-77页 |
| 5.1.2 气体甲醛胁迫处理的方法 | 第77页 |
| 5.1.3 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草气孔导度、开度及蒸腾速率的测定 | 第77页 |
| 5.1.4 叶绿素含量的测定 | 第77页 |
| 51.5 可溶性糖和总蛋白含量的测定 | 第77页 |
| 5.1.6 H_2O_2探针检测胁迫处理烟草叶片中的H_2O_2 | 第77页 |
| 5.1.7 H_2O_2、MDA和PC含量的测定 | 第77页 |
| 5.1.8 胁迫处理的烟草叶片质膜提取和PM H~+-ATP酶活性测定 | 第77页 |
| 5.1.9 胁迫处理的烟草叶片氢泵活性的测定 | 第77-78页 |
| 5.1.10 14-3-3 蛋白抗体、向光素抗体及质膜H~+-ATPase抗体的制备 | 第78页 |
| 5.1.11 免疫共沉淀检测14-3-3蛋白与向光素、质膜H~+-ATPase的互作 | 第78页 |
| 5.1.12 数据统计分析 | 第78页 |
| 5.2 结果与分析 | 第78-86页 |
| 5.2.1 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草气孔导度、开度及蒸腾速率的比较 | 第78-81页 |
| 5.2.2 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草叶绿素含量的变化 | 第81-82页 |
| 5.2.3 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草可溶性总糖和总蛋白含量的变化 | 第82-83页 |
| 5.2.4 H_2O_2探针检测胁迫处理烟草叶片中的H_2O_2 | 第83-84页 |
| 5.2.5 气体甲醛胁迫下野生型和转基因烟草叶片MDA、H_2O_2和PC含量的变化 | 第84-85页 |
| 5.2.6 气体甲醛胁迫对烟草叶片14-3-3蛋白与向光素、PMH~+-ATPase的互作水平,以及对PM H~+-ATPase活性、氢泵活性的影响 | 第85-86页 |
| 5.3 讨论 | 第86-88页 |
| 第六章 总结与展望 | 第88-90页 |
| 6.1 总结 | 第88-89页 |
| 6.2 展望 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-105页 |
| 附件A | 第105页 |
