| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第13-36页 |
| 1 miRNA或DNA核酸分子的检测策略 | 第13-20页 |
| 1.1 miRNA的发现以及相关概念 | 第13-14页 |
| 1.2 反转录聚合酶链式扩增反应（RT-PCR） | 第14-15页 |
| 1.3 基于核酸序列的扩增(NASBA)和转录介导扩增(TMA) | 第15-17页 |
| 1.4 链位移放大反应(SDA) | 第17-18页 |
| 1.5 RNA印迹法 | 第18-19页 |
| 1.6 原位杂交反应 (ISH) | 第19页 |
| 1.7 杂交链式反应 (HCR) | 第19-20页 |
| 2 酶辅助放大策略在生化分析中的应用 | 第20-25页 |
| 2.1 酶辅助放大策略的应用前景 | 第20页 |
| 2.2 常用的酶辅助放大策略 | 第20-25页 |
| 2.2.1 内切酶信号放大策略 | 第21页 |
| 2.2.2 螺旋酶依赖扩增(HDA)策略 | 第21-22页 |
| 2.2.3 重组酶聚合酶扩增 (RPA) | 第22-23页 |
| 2.2.4 外切酶Ⅲ-辅助目标再循环法 | 第23-24页 |
| 2.2.5 指数放大反应 | 第24-25页 |
| 3 荧光探针 | 第25-29页 |
| 3.1 核酸荧光探针 | 第26-27页 |
| 3.1.1 核酸荧光探针的原理及应用 | 第26-27页 |
| 3.1.2 核酸探针的杂交选择性 | 第27页 |
| 3.2 适体荧光探针 | 第27-29页 |
| 3.2.1 RNA适体荧光探针 | 第27-28页 |
| 3.2.2 DNA适体荧光探针 | 第28-29页 |
| 4 量子点 | 第29-32页 |
| 4.1 生物相容性量子点的制备 | 第29-32页 |
| 4.1.1 生物系统量子点的合成 | 第29-31页 |
| 4.1.1.1 活酵母细胞量子点的合成 | 第31页 |
| 4.1.2 仿生系统中量子点的合成 | 第31-32页 |
| 4.1.2.1 人工仿生体系中量子点的合成 | 第31-32页 |
| 4.1.3 生物分子化学合成量子点的功能化 | 第32页 |
| 4.1.3.1 量子点的水增溶作用 | 第32页 |
| 5 核酸纳米技术的应用 | 第32-34页 |
| 5.1 核酸纳线的构建 | 第33页 |
| 5.2 核酸纳米笼的形成 | 第33-34页 |
| 6 本文的研究思路 | 第34-36页 |
| 第二章基于酶辅助靶标多重循环扩增和羧基碳量子点淬灭荧光检测的研究 | 第36-52页 |
| 1 前言 | 第36-37页 |
| 2 实验部分 | 第37-41页 |
| 2.1 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 2.3.1 羧基碳量子点的合成 | 第39页 |
| 2.3.2 基于靶标刺激和酶催化的循环扩增过程 | 第39页 |
| 2.3.3 荧光淬灭 | 第39-40页 |
| 2.3.4 基于羧基碳量子点构建荧光传感平台 | 第40页 |
| 2.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和制备 | 第40-41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-51页 |
| 3.1 羧基碳量子点的表征 | 第41页 |
| 3.2 基于酶辅助靶标多重循环扩增和羧基碳量子点淬灭荧光检测的机理 | 第41-43页 |
| 3.3 对基于酶辅助靶标循环扩增反应机理的电泳表征 | 第43-44页 |
| 3.4 对基于酶辅助靶标循环扩增和cCQD淬灭荧光检测的研究 | 第44-47页 |
| 3.4.1 荧光传感分析方法可行性探究 | 第44-46页 |
| 3.4.2 荧光淬灭剂羧基碳量子点（cCQD）最佳用量的优化 | 第46-47页 |
| 3.5 荧光传感平台的反应条件的优化 | 第47-49页 |
| 3.5.1 酶浓度对构建的荧光生物传感器荧光信号的影响 | 第47-48页 |
| 3.5.2 基于酶辅助靶标多重循环扩增反应时间的优化 | 第48-49页 |
| 3.6 基于酶辅助靶标多重循环扩增和羧基碳量子点淬灭荧光检测MicroRNA | 第49-50页 |
| 3.7 荧光生物传感器的特异性研究 | 第50-51页 |
| 4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 基于目标循环放大策略利用DNA纳米网状结构组装荧光传感体系 | 第52-69页 |
| 1 前言 | 第52-53页 |
| 2 实验部分 | 第53-56页 |
| 2.1 试剂 | 第53-54页 |
| 2.2 实验装置 | 第54-55页 |
| 2.3 实验部分 | 第55-56页 |
| 2.3.1 利用靶标刺激的循环放大策略 | 第55页 |
| 2.3.2 有序的DNA纳米网状结构组装体系 | 第55页 |
| 2.3.3 AFM样品处理过程 | 第55页 |
| 2.3.4 凝胶电泳 | 第55-56页 |
| 2.3.5 荧光测量体系 | 第56页 |
| 3 结果与讨论 | 第56-68页 |
| 3.1 实验机理 | 第56-58页 |
| 3.2 成功进行聚合介导的亚稳态组装的关键因素的讨论 | 第58页 |
| 3.3 循环放大策略的凝胶电泳分析表征 | 第58-59页 |
| 3.4 有序的DNA纳米网状结构组装的凝胶电泳分析表征 | 第59-60页 |
| 3.5 对荧光传感体系的研究 | 第60-62页 |
| 3.5.1 对荧光传感体系可行性的研究 | 第60页 |
| 3.5.2 DNA纳米网状结构的透射电镜的表征 | 第60-61页 |
| 3.5.3 DNA纳米网状结构的原子力显微镜（AFM）的表征 | 第61-62页 |
| 3.6 实验条件的优化 | 第62-65页 |
| 3.6.1 酶对荧光传感的影响的研究 | 第62-63页 |
| 3.6.2 组装时间的优化 | 第63-64页 |
| 3.6.3 退火温度的研究 | 第64-65页 |
| 3.7 基于目标循环放大策略利用DNA纳米网状结构组装荧光传感器 | 第65-66页 |
| 3.8 荧光生物传感器检测MicroRNA-21 的选择性研究 | 第66-67页 |
| 3.9 在实际样品中对miRNA进行检测 | 第67-68页 |
| 4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 基于靶标交叉链位移循环放大和距离依赖性光诱导电子转移检测MicroRNA的荧光生物传感平台 | 第69-87页 |
| 1 前言 | 第69-70页 |
| 2 实验部分 | 第70-74页 |
| 2.1 主要试剂 | 第70-72页 |
| 2.2 实验仪器 | 第72页 |
| 2.3 实验步骤 | 第72-74页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第72页 |
| 2.3.2 DNA/AgNCs的制备 | 第72页 |
| 2.3.3 荧光反应体系 | 第72-73页 |
| 2.3.4 探针的设计原理 | 第73-74页 |
| 3 实验部分 | 第74-86页 |
| 3.1 DNA/AgNCs的表征图 | 第74-75页 |
| 3.2 基于靶标交叉链位移循环放大和距离依赖性光诱导电子转移检测MicroRNA的机理 | 第75-76页 |
| 3.3 靶标交叉链位移循环放大策略的凝胶电泳分析表征 | 第76-77页 |
| 3.4 基于靶标交叉链位移循环放大和距离依赖性光诱导电子转移检测MicroRNA荧光生物传感平台的研究 | 第77-80页 |
| 3.4.1 对荧光生物传感平台的可行性研究 | 第77-79页 |
| 3.4.2 不同条件下以探针为合成模板的DNA/AgNCS荧光发射情况的研究 | 第79-80页 |
| 3.5 对实验条件进行优化 | 第80-83页 |
| 3.5.1 对反应体系最佳pH值的研究 | 第80页 |
| 3.5.2 对血红素(Hemin)最佳浓度的确定 | 第80-81页 |
| 3.5.3 探究酶的用量对荧光传感平台的影响 | 第81-82页 |
| 3.5.4 DNA/AgNCs与G-四聚体/血红素的荧光恢复效率和空间长度的关系 | 第82-83页 |
| 3.6 基于靶标交叉链位移循环放大和距离依赖性光诱导电子转移检测MicroRNA的荧光生物传感平台 | 第83-84页 |
| 3.7 荧光生物传感器选择性的研究 | 第84-85页 |
| 3.8 实验抗干扰检测 | 第85-86页 |
| 4 本章小结 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读学位期间已发表学术论文目录 | 第101-102页 |
