| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-27页 |
| 1.1 角蛋白概述 | 第16-18页 |
| 1.1.1 角蛋白的结构 | 第16页 |
| 1.1.2 角蛋白的加工方法 | 第16-17页 |
| 1.1.3 角蛋白的应用 | 第17-18页 |
| 1.2 角蛋白酶概述 | 第18-20页 |
| 1.2.1 角蛋白酶的来源及分类 | 第18-19页 |
| 1.2.2 角蛋白酶的理化性质 | 第19-20页 |
| 1.3 角蛋白酶的发酵优化 | 第20-21页 |
| 1.3.1 角蛋白酶的培养优化 | 第20-21页 |
| 1.3.2 角蛋白酶的发酵罐水平生产 | 第21页 |
| 1.4 角蛋白酶的异源表达 | 第21-23页 |
| 1.4.1 角蛋白酶基因及表达 | 第21-22页 |
| 1.4.2 毕赤酵母表达系统简介 | 第22页 |
| 1.4.3 毕赤酵母表达系统宿主细胞及载体 | 第22-23页 |
| 1.4.4 外源基因在毕赤酵母中高效表达的影响因素 | 第23页 |
| 1.5 角蛋白酶的应用 | 第23-25页 |
| 1.6 研究目的、意义及内容 | 第25-27页 |
| 1.6.1 研究目的、意义 | 第25页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌Y3-4产角蛋白酶的酶学性质 | 第27-39页 |
| 2.1 材料、仪器与试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.1 菌株 | 第27页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 培养基及一些溶液的配制 | 第28页 |
| 2.2 B.subtilis Y3-4角蛋白酶的理化性质 | 第28-30页 |
| 2.2.1 粗酶液提取 | 第28页 |
| 2.2.2 角蛋白酶纯化 | 第28页 |
| 2.2.3 角蛋白酶活性测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 底物特异性 | 第29页 |
| 2.2.5 最适反应温度 | 第29页 |
| 2.2.6 最适反应pH | 第29页 |
| 2.2.7 pH稳定性 | 第29-30页 |
| 2.2.8 温度稳定性 | 第30页 |
| 2.3 B.subtilis Y3-4酶液的耐受性研究 | 第30-31页 |
| 2.3.1 抑制剂对酶活的影响 | 第30页 |
| 2.3.2 还原剂对酶活的影响 | 第30页 |
| 2.3.3 氧化剂对酶活的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.4 去垢剂对酶活的影响 | 第31页 |
| 2.3.5 金属离子对酶活的影响 | 第31页 |
| 2.3.6 酶与洗衣液的兼容性 | 第31页 |
| 2.4 B.subtilis Y3-4酶液的应用 | 第31-32页 |
| 2.4.1 生物降解 | 第31页 |
| 2.4.2 脱毛能力 | 第31页 |
| 2.4.3 去污效果 | 第31-32页 |
| 2.5 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.5.1 B.subtilis Y3-4角蛋白酶的理化性质 | 第32-34页 |
| 2.5.2 B.subtilis Y3-4酶液的耐受性研究 | 第34-36页 |
| 2.5.3 B.subtilis Y3-4酶液的应用 | 第36-38页 |
| 2.6 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌FJ-3-16的发酵条件优化、脱毛应用及异源表达 | 第39-58页 |
| 3.1 材料、仪器与试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.1 菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第39页 |
| 3.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第39页 |
| 3.1.4 培养基及一些溶液的配制 | 第39-40页 |
| 3.2 B.subtilis FJ-3-16发酵优化 | 第40-41页 |
| 3.2.1 菌株培养方法 | 第40页 |
| 3.2.2 单因素实验 | 第40-41页 |
| 3.2.3 利用Plackett-Burman(PB)设计对FM培养基配方的优化 | 第41页 |
| 3.2.4 利用中心组合设计(CCD)实验对FM培养基配方的优化 | 第41页 |
| 3.3 B.subtilis FJ-3-16发酵罐发酵产酶 | 第41-42页 |
| 3.4 B.subtilis FJ-3-16酶法脱毛 | 第42页 |
| 3.4.1 对原料皮脱毛效果 | 第42页 |
| 3.4.2 不同脱毛温度对脱毛效果的影响 | 第42页 |
| 3.4.3 对整蹄的脱毛效果 | 第42页 |
| 3.5 B.subtilis FJ-3-16角蛋白基因kerFJ的异源表达 | 第42-46页 |
| 3.5.1 B.subtilis FJ-3-16提基因组 | 第42页 |
| 3.5.2 角蛋白基因kerFJ的扩增 | 第42-43页 |
| 3.5.3 质粒pPICZαA和kerFJ酶切与连接 | 第43-44页 |
| 3.5.4 转化E. coli DH5α感受态细胞 | 第44页 |
| 3.5.5 pPICZαA-kerFJ阳性转化子的筛选 | 第44页 |
| 3.5.6 pPICZαA-kerFJ的线性化 | 第44-45页 |
| 3.5.7 P.pastoris GS115感受态细胞的制备与转化 | 第45页 |
| 3.5.8 重组子筛选 | 第45-46页 |
| 3.5.9 摇瓶筛选 | 第46页 |
| 3.6 结果与分析 | 第46-56页 |
| 3.6.1 B.subtilis FJ-3-16发酵优化结果 | 第46-50页 |
| 3.6.2 50 L发酵罐放大实验 | 第50-51页 |
| 3.6.3 酶法脱毛 | 第51-53页 |
| 3.6.4 角蛋白基因kerFJ的异源表达 | 第53-56页 |
| 3.7 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 蜡样芽孢杆菌Y-15对羽毛废弃物的降解研究 | 第58-75页 |
| 4.1 材料、仪器与试剂 | 第58页 |
| 4.1.1 菌株 | 第58页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第58页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第58页 |
| 4.1.4 培养基及其配制 | 第58页 |
| 4.2 B.cereus Y-15降解羽毛能力评价 | 第58-59页 |
| 4.2.1 B.cereus Y-15生长、产酶曲线及降解曲线绘制 | 第58-59页 |
| 4.2.2 菌株B.subtilis FJ-3-16与B.cereus Y-15进行比较 | 第59页 |
| 4.2.3 SEM观察底物结构变化 | 第59页 |
| 4.3 B.cereus Y-15发酵优化 | 第59-61页 |
| 4.3.1 菌株培养及角蛋白酶活测定 | 第59页 |
| 4.3.2 单因素实验 | 第59-60页 |
| 4.3.3 PB实验 | 第60页 |
| 4.3.4 CCD实验 | 第60-61页 |
| 4.3.5 B.cereus Y-15粗酶液提取及降解羽毛效果 | 第61页 |
| 4.4 B.cereus Y-15粗酶液的理化性质 | 第61页 |
| 4.5 结果与分析 | 第61-73页 |
| 4.5.1 B.cereus Y-15降解羽毛能力评价 | 第61-64页 |
| 4.5.2 B.cereus Y-15发酵优化 | 第64-70页 |
| 4.5.3 B.cereus Y-15粗酶液的理化性质 | 第70-73页 |
| 4.6 讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 三株角蛋白降解菌菌株的比较研究 | 第75-81页 |
| 5.1 材料、仪器与试剂 | 第75页 |
| 5.1.1 菌株 | 第75页 |
| 5.1.2 仪器设备、试剂 | 第75页 |
| 5.1.3 培养基及其配制 | 第75页 |
| 5.2 菌株生长特性 | 第75-76页 |
| 5.2.1 显微镜观察 | 第75页 |
| 5.2.2 生长pH | 第75页 |
| 5.2.3 生长温度 | 第75-76页 |
| 5.2.4 盐耐受性 | 第76页 |
| 5.3 菌株所产角蛋白酶的理化性质 | 第76页 |
| 5.4 发酵产酶工艺及应用 | 第76页 |
| 5.5 结果 | 第76-78页 |
| 5.5.1 菌株生长特性 | 第76-77页 |
| 5.5.2 菌株所产角蛋白酶的理化性质 | 第77页 |
| 5.5.3 发酵产酶工艺及应用 | 第77-78页 |
| 5.6 讨论 | 第78-81页 |
| 总结与展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表论文和申请专利 | 第93-94页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第94页 |
