| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 研究现状、成果 | 第13-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-16页 |
| 一、miR-346在宫颈癌中的作用研究 | 第16-36页 |
| 1.1 材料和方法 | 第16-26页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第17-26页 |
| 1.2 结果 | 第26-31页 |
| 1.2.1 Real-time PCR检测miR-346在子宫颈癌组织和正常子宫颈组织中的差异表达 | 第26-27页 |
| 1.2.2 pcDNA3.1/pri-miR-346质粒的构建 | 第27页 |
| 1.2.3 细胞转染效率检测 | 第27页 |
| 1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3.1/pri-miR-346表达的有效性 | 第27-29页 |
| 1.2.5 MTT实验检测miR-346对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第29页 |
| 1.2.6 细胞集落形成实验检测miR-346对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第29-30页 |
| 1.2.7 细胞生长曲线实验检测miR-346对宫颈癌细胞生长能力的影响 | 第30-31页 |
| 1.2.8 动物实验检测封闭内源性miR-346对裸鼠成瘤能力的影响 | 第31页 |
| 1.3 讨论 | 第31-34页 |
| 1.3.1 miR-346的研究进展 | 第32页 |
| 1.3.2 miR-346对宫颈癌细胞的表型影响 | 第32-34页 |
| 1.4 小结 | 第34-36页 |
| 二、miR-346在宫颈癌细胞系中靶定hTERT的确定及验证 | 第36-53页 |
| 2.1 材料和方法 | 第36-45页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第38-45页 |
| 2.2 结果 | 第45-49页 |
| 2.2.1 EGFP荧光报告载体的构建 | 第45-46页 |
| 2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证hTERT是miR-346的直接作用靶基因 | 第46-47页 |
| 2.2.3 Real-Time PCR方法检测在过表达以及封闭miR-346后的HeLa细胞中hTERT mRNA的表达水平 | 第47-48页 |
| 2.2.4 免疫荧光实验检测在过表达及封闭miR-346后的HeLa细胞中hTERT蛋白的表达水平 | 第48-49页 |
| 2.2.5 Western blot检测在封闭miR-346后的HeLa细胞中hTERT蛋白的表达水平 | 第49页 |
| 2.3 讨论 | 第49-52页 |
| 2.3.1 荧光报告载体实验、Real-time PCR实验在靶基因验证中的作用 | 第50-51页 |
| 2.3.2 miR-346对靶基因hTERT的正性调节作用 | 第51-52页 |
| 2.4 小结 | 第52-53页 |
| 三、挽救实验验证miR-346对hTERT靶定作用的特异性 | 第53-59页 |
| 3.1 材料和方法 | 第53页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第53页 |
| 3.2 结果 | 第53-56页 |
| 3.2.1 RT-PCR和Western blot验证pSilencer/si-hTERT质粒的有效性 | 第53-54页 |
| 3.2.2 MTT实验分析hTERT对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第54页 |
| 3.2.3 细胞集落形成实验分析hTERT对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.4 挽救实验验证miR-346对hTERT靶定功能的特异性 | 第55-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-58页 |
| 3.3.1 基因hTERT的介绍 | 第56-57页 |
| 3.3.2 基因hTERT与肿瘤的关系 | 第57页 |
| 3.3.3 基因hTERT对宫颈癌细胞生长的影响 | 第57-58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第63-64页 |
| 综述 MicroRNA、hTERT与宫颈癌 | 第64-73页 |
| 综述参考文献 | 第69-73页 |
