中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-19页 |
研究现状、成果 | 第13-17页 |
研究目的、方法 | 第17-19页 |
一、miR-17-5p在卵巢癌细胞中的作用研究 | 第19-41页 |
1.1 材料和方法 | 第19-29页 |
1.1.1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1.2 实验方法 | 第20-29页 |
1.2 结果 | 第29-36页 |
1.2.1 pcDNA3/pri -miR-17-5p质粒的构建 | 第29页 |
1.2.2 细胞转染效率检测 | 第29-30页 |
1.2.3 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-17-5p和AS0-miR-17-5p质粒的有效性 | 第30-31页 |
1.2.4 miR-17-5p对卵巢癌细胞生长活性的影响 | 第31-32页 |
1.2.5 miR-17-5P对卵巢癌细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
1.2.6 miR-17-5p对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第33-34页 |
1.2.7 miR-17-5P对卵巢癌细胞周期的影响 | 第34-36页 |
1.3 讨论 | 第36-39页 |
1.3.1 miR-17-5p在肿瘤中的作用 | 第37-38页 |
1.3.2 miR-17-5p对卵巢癌细胞的表型影响 | 第38-39页 |
1.4 小结 | 第39-41页 |
二、卵巢癌细胞系中miR-17-5p靶基因的确定及验证 | 第41-62页 |
2.1 材料和方法 | 第41-52页 |
2.1.1 实验材料 | 第41-43页 |
2.1.2 实验方法 | 第43-52页 |
2.2 结果 | 第52-59页 |
2.2.1 靶位点预测 | 第52页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体的构建 | 第52-54页 |
2.2.3 EGFP荧光报告载体实验验证YES1、CHAF1A是miR-17-5p的直接作用靶基因 | 第54-58页 |
2.2.4 Real-Time PCR方法检测在过表达miR-17-5p或封闭miR-17-5p的ES-2细胞中YES1、CHAF1A mRNA的表达水平 | 第58页 |
2.2.5 Western blot检测在过表达miR-17-5p或封闭miR-17-5p的ES-2细胞中YES1、CHAF1A蛋白的表达水平 | 第58-59页 |
2.3 讨论 | 第59-61页 |
2.3.1 荧光报告载体的应用 | 第59-60页 |
2.3.2 miR-17-5p对YES1的正性调节和对CHAF1A负性的调节 | 第60-61页 |
2.4 小结 | 第61-62页 |
三、靶基因YES1、CHAF1A在卵巢癌细胞中的作用研究 | 第62-76页 |
3.1 材料和方法 | 第62-64页 |
3.1.1 实验材料 | 第62页 |
3.1.2 实验方法 | 第62-64页 |
3.2 结果 | 第64-73页 |
3.2.1 pSilencer/si-YES1、pSilencer/si-CHAF1A质粒的构建 | 第64-65页 |
3.2.2 Western blot验证pSilencer/si-YES1、pSilencer/si-CHAF1A质粒的有效性 | 第65页 |
3.2.3 YES1、 CHAF1A对卵巢癌细胞生长活性的影响 | 第65-66页 |
3.2.4 挽救实验检测基因YES1、 CHAF1A对卵巢癌细胞生长活性的影响 | 第66-68页 |
3.2.5 YES1、CHAF1A对卵巢癌细胞增殖能力的影响 | 第68页 |
3.2.6 挽救实验检测YES1、CHAF1A对卵巢癌细胞增殖能力的影响 | 第68-70页 |
3.2.7 YES1、CHAF1A对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第70-71页 |
3.2.8 YES1、CHAF1A对卵巢癌细胞周期的影响 | 第71-73页 |
3.3 讨论 | 第73-75页 |
3.3.1 基因YES1的介绍 | 第73-74页 |
3.3.2 基因CHAF1A的介绍 | 第74页 |
3.3.3 基因YES1、CHAF1A与肿瘤的关系 | 第74页 |
3.3.4 基因YES1、CHAF1A对卵巢癌细胞生长的影响 | 第74-75页 |
3.4 小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第83-84页 |
综述 miR-17-92决定簇研究进展及展望 | 第84-93页 |
综述参考文献 | 第90-93页 |
致谢 | 第93页 |