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microRNA-138对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其与microRNA-346竞争性调控hTERT的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
符号说明第10-12页
前言第12-17页
    研究现状、成果第12-16页
    研究目的、方法第16-17页
一、miR-138在宫颈癌中的作用研究第17-26页
    1.1 材料和方法第17-23页
        1.1.1 实验材料第17-18页
        1.1.2 实验方法第18-23页
    1.2 结果第23-26页
        1.2.1 Real-time PCR检测miR-138在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的差异表达第23页
        1.2.2 质粒的转染效率检测第23-24页
        1.2.3 转染pcDNA3/pri-miR-138的HeLa细胞中miR-138的表达水平第24页
        1.2.4 miR-138对宫颈癌细胞生长活性的影响第24-25页
        1.2.5 miR-138对宫颈癌细胞集落形成能力的影响第25-26页
二、在宫颈癌中miR-138靶基因的筛选及验证第26-42页
    2.1 材料和方法第26-36页
        2.1.1 实验材料第26-27页
        2.1.2 实验方法第27-36页
    2.2 结果第36-42页
        2.2.1 miR-138靶定hTERT的生物信息学预测第36-37页
        2.2.2 EGFP荧光报告载体质粒的构建第37-38页
        2.2.3 EGFP荧光报告载体实验验证hTERT是miR-138的直接靶基因第38-39页
        2.2.4 Real time PCR检测hTERT在转染miR-138的HeLa细胞中的表达第39页
        2.2.5 WB检测hTERT蛋白在转染miR-138的HeLa细胞中的表达第39-40页
        2.2.6 表达hTERT(不含3'UTR)的质粒的验证第40页
        2.2.7 pcDNA3/hTERT对宫颈癌细胞生长活性的挽救能力第40-41页
        2.2.8 pcDNA3/hTERT对宫颈癌细胞集落形成的挽救能力第41-42页
三、miR-346和miR-138协调调控hTERT的表达第42-46页
    3.1 材料和方法第42页
        3.1.1 实验材料第42页
        3.1.2 实验方法第42页
    3.2 结果第42-46页
        3.2.1 miR-138与miR-346对hTERT的结合位点的预测第42页
        3.2.2 不同剂量的miR-138和miR-346对hTERT表达的影响第42-43页
        3.2.3 不同剂量的miR-138和miR-346对HeLa细胞增殖能力的影响第43-44页
        3.2.4 不同突变hTERT-3'UTR质粒的构建第44-45页
        3.2.5 不同突变hTERT-3'UTR质粒验证miRNAs对hTERT调节的特异性第45-46页
讨论第46-51页
结论第51-52页
参考文献第52-56页
发表论文和参加科研情况说明第56-57页
综述 hTERT, p53及其相关micrRNAs在肿瘤中的调控关系第57-70页
    综述参考文献第64-70页
致谢第70页

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