中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
一、miR-138在宫颈癌中的作用研究 | 第17-26页 |
1.1 材料和方法 | 第17-23页 |
1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-23页 |
1.2 结果 | 第23-26页 |
1.2.1 Real-time PCR检测miR-138在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的差异表达 | 第23页 |
1.2.2 质粒的转染效率检测 | 第23-24页 |
1.2.3 转染pcDNA3/pri-miR-138的HeLa细胞中miR-138的表达水平 | 第24页 |
1.2.4 miR-138对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第24-25页 |
1.2.5 miR-138对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第25-26页 |
二、在宫颈癌中miR-138靶基因的筛选及验证 | 第26-42页 |
2.1 材料和方法 | 第26-36页 |
2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 实验方法 | 第27-36页 |
2.2 结果 | 第36-42页 |
2.2.1 miR-138靶定hTERT的生物信息学预测 | 第36-37页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体质粒的构建 | 第37-38页 |
2.2.3 EGFP荧光报告载体实验验证hTERT是miR-138的直接靶基因 | 第38-39页 |
2.2.4 Real time PCR检测hTERT在转染miR-138的HeLa细胞中的表达 | 第39页 |
2.2.5 WB检测hTERT蛋白在转染miR-138的HeLa细胞中的表达 | 第39-40页 |
2.2.6 表达hTERT(不含3'UTR)的质粒的验证 | 第40页 |
2.2.7 pcDNA3/hTERT对宫颈癌细胞生长活性的挽救能力 | 第40-41页 |
2.2.8 pcDNA3/hTERT对宫颈癌细胞集落形成的挽救能力 | 第41-42页 |
三、miR-346和miR-138协调调控hTERT的表达 | 第42-46页 |
3.1 材料和方法 | 第42页 |
3.1.1 实验材料 | 第42页 |
3.1.2 实验方法 | 第42页 |
3.2 结果 | 第42-46页 |
3.2.1 miR-138与miR-346对hTERT的结合位点的预测 | 第42页 |
3.2.2 不同剂量的miR-138和miR-346对hTERT表达的影响 | 第42-43页 |
3.2.3 不同剂量的miR-138和miR-346对HeLa细胞增殖能力的影响 | 第43-44页 |
3.2.4 不同突变hTERT-3'UTR质粒的构建 | 第44-45页 |
3.2.5 不同突变hTERT-3'UTR质粒验证miRNAs对hTERT调节的特异性 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第56-57页 |
综述 hTERT, p53及其相关micrRNAs在肿瘤中的调控关系 | 第57-70页 |
综述参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |