| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 符号与缩略语说明 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-35页 |
| 1 转基因棉花概况 | 第15-17页 |
| 1.1 转基因棉花研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.1 Bt基因 | 第15页 |
| 1.1.2 转基因棉花研究历程 | 第15-16页 |
| 1.2 转基因棉花发展现状 | 第16页 |
| 1.2.1 国外种植情况 | 第16页 |
| 1.2.2 国内种植情况 | 第16页 |
| 1.3 转基因棉花的经济和社会效益 | 第16-17页 |
| 2 转基因棉花的安全性问题 | 第17-19页 |
| 2.1 转基因棉花安全性研究 | 第17-19页 |
| 2.1.1 Bt杀虫蛋白的时空表达 | 第17页 |
| 2.1.2 Bt基因逃逸风险 | 第17-18页 |
| 2.1.3 靶标害虫对Bt棉产生抗性进化的风险 | 第18页 |
| 2.1.4 Bt棉花对非靶标生物体的影响 | 第18-19页 |
| 2.2 转基因棉花安全性检测方法简介 | 第19页 |
| 3 土壤微生物群落结构研究现状 | 第19-23页 |
| 3.1 土壤微生物多样性 | 第19-20页 |
| 3.2 土壤微生物多样性研究方法 | 第20-21页 |
| 3.2.1 传统培养分离方法 | 第20页 |
| 3.2.2 生物标记物方法 | 第20页 |
| 3.2.3 BIOLOG鉴定系统 | 第20-21页 |
| 3.2.4 分子生物学方法 | 第21页 |
| 3.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第21-22页 |
| 3.3.1 变性梯度凝胶电泳技术发展及原理 | 第21-22页 |
| 3.3.2 DGGE技术的优缺点 | 第22页 |
| 3.4 转基因棉花对土壤微生物群落结构的影响 | 第22-23页 |
| 4 土壤酶活性研究现状 | 第23-27页 |
| 4.1 土壤酶概述及研究现状 | 第23页 |
| 4.2 关于纤维素降解菌 | 第23-24页 |
| 4.2.1 纤维素的结构 | 第23-24页 |
| 4.2.2 纤维素降解菌 | 第24页 |
| 4.3 纤维素酶系及其作用机制 | 第24-26页 |
| 4.3.1 纤维素酶的组成 | 第24-25页 |
| 4.3.2 纤维素酶的结构 | 第25页 |
| 4.3.3 纤维素酶的作用机制 | 第25-26页 |
| 4.4 纤维素酶活力检测方法 | 第26-27页 |
| 4.4.1 纤维素总酶活的检测 | 第26页 |
| 4.4.2 单一组分酶活力检测 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-35页 |
| 实验部分 | 第35-87页 |
| 第一章 PCR-DGGE技术检测转基因棉花对土壤细菌群落结构的影响 | 第35-55页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 1.1 试验材料 | 第35-37页 |
| 1.1.1 供试作物 | 第35-36页 |
| 1.1.2 供试土壤 | 第36页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 1.1.4 主要试剂及培养基 | 第37页 |
| 1.2 试验方法 | 第37-40页 |
| 1.2.1 试验设计 | 第37-38页 |
| 1.2.2 试验原理及步骤 | 第38-40页 |
| 1.3 试验数据统计分析 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-52页 |
| 2.1 土壤细菌总DNA的提取和纯化 | 第40页 |
| 2.2 细菌16S rRNA基因V3区PCR扩增 | 第40-41页 |
| 2.3 PCR产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第41-52页 |
| 2.3.1 单价转基因棉GK-12和亲本SM距棉花根部不同距离土壤样品的DGGE分析 | 第41-43页 |
| 2.3.2 单价转基因棉GK-12和亲本SM距棉花根部不同距离土壤样品的DGGE图谱聚类分析 | 第43-45页 |
| 2.3.3 单价转基因棉GK-12和亲本SM距棉花根部不同距离土壤样品的主成份分析 | 第45-48页 |
| 2.3.4 价转基因棉33B和亲本5415距棉花根部不同距离土壤样品的DGGE分析 | 第48-49页 |
| 2.3.5 价转基因棉33B和亲本5415距棉花根部不同距离土壤样品的DGGE图谱聚类分析 | 第49-51页 |
| 2.3.6 双价转基因棉33B和亲本5415距棉花根部不同距离土壤样品的主成份分析 | 第51-52页 |
| 3 本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第二章 转基因棉花对土壤纤维素降解菌数量的影响 | 第55-65页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| 1.1 试验材料 | 第55-56页 |
| 1.1.1 供试作物 | 第55页 |
| 1.1.2 供试土壤 | 第55页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第55页 |
| 1.1.4 主要试剂及培养基 | 第55-56页 |
| 1.2 试验方法 | 第56页 |
| 1.2.1 试验设计 | 第56页 |
| 1.2.2 试验原理及步骤 | 第56页 |
| 1.3 试验数据统计分析 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-62页 |
| 2.1 纤维素降解菌在羧甲基纤维素钠-刚果红平板上的生长情况 | 第56-57页 |
| 2.2 不同生育期棉田土壤纤维素降解菌数量的变化 | 第57-59页 |
| 2.3 转基因棉花与亲本对照的土壤纤维素降解菌数量的差异 | 第59-62页 |
| 2.4 讨论分析 | 第62页 |
| 3 本章小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第三章 转基因棉花对土壤纤维素降解酶活性的影响 | 第65-75页 |
| 1 材料与方法 | 第65-67页 |
| 1.1 试验材料 | 第65-66页 |
| 1.1.1 供试作物 | 第65页 |
| 1.1.2 供试土壤 | 第65页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第65页 |
| 1.1.4 主要试剂及培养基 | 第65-66页 |
| 1.2 试验方法 | 第66-67页 |
| 1.2.1 试验设计 | 第66页 |
| 1.2.2 试验原理及步骤 | 第66-67页 |
| 1.3 试验数据统计分析 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-73页 |
| 2.1 对-硝基酚标准曲线的制作 | 第67-68页 |
| 2.2 不同生育期棉田土壤β-葡萄糖苷酶活性的变化 | 第68-70页 |
| 2.3 转基因棉花与亲本对照的土壤β-葡萄糖苷酶活性差异 | 第70-72页 |
| 2.4 讨论分析 | 第72-73页 |
| 3 本章小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 第四章 土壤纤维素降解菌的筛选、分离及初步鉴定 | 第75-87页 |
| 1 材料与方法 | 第75-79页 |
| 1.1 试验材料 | 第75-76页 |
| 1.1.1 供试作物 | 第75页 |
| 1.1.2 供试土壤 | 第75页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第75页 |
| 1.1.4 主要试剂及培养基 | 第75-76页 |
| 1.2 试验方法 | 第76-79页 |
| 1.2.1 试验设计 | 第76页 |
| 1.2.2 试验原理及步骤 | 第76-79页 |
| 1.3 试验数据统计分析 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-85页 |
| 2.1 纤维素降解菌的分离和纯化 | 第79-80页 |
| 2.2 复筛——DNS法检测纤维素总酶活性 | 第80-81页 |
| 2.2.1 葡萄糖标准曲线的制作 | 第80页 |
| 2.2.2 纤维素总酶活性(以滤纸为底物)的测定 | 第80-81页 |
| 2.3 土壤纤维素降解菌的初步鉴定 | 第81-85页 |
| 2.3.1 16S rRNA基因的PCR扩增 | 第81-82页 |
| 2.3.2 基于16S rRNA基因序列的系统发育分析 | 第82-85页 |
| 3 本章小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 本论文的创新点及不足之处 | 第89-91页 |
| 附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第91-93页 |
| 附录二 相似性矩阵 | 第93-96页 |
| 附录三 相关DNA序列 | 第96-99页 |
| 攻读硕士学位期间发表或已接收的学术论文 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
