| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 黄河三角洲滨海湿地概况 | 第13-14页 |
| 2 放线菌 | 第14-18页 |
| 2.1 放线菌概述 | 第14-15页 |
| 2.2 极端环境和特殊生境放线菌研究进展 | 第15-17页 |
| 2.3 放线菌的分离研究 | 第17-18页 |
| 3 分子生物学技术在微生物多样性分析的应用 | 第18-20页 |
| 3.1 16S rDNA 文库分析法 | 第18-19页 |
| 3.2 荧光原位杂交技术（FISH） | 第19页 |
| 3.3 变性梯度凝胶电泳技术（DGGE） | 第19页 |
| 3.4 限制性片段的长度多态性（RFLP） | 第19-20页 |
| 3.5 扩增片段长度多态性分析（AFLP） | 第20页 |
| 3.6 末端限制性片段长度多态性分析（T-RFLP） | 第20页 |
| 4 功能基因研究现状 | 第20-24页 |
| 4.1 聚酮合成酶（PKS）基因研究现状 | 第21-23页 |
| 4.2 非核糖体肽合成酶（NRPS）基因研究现状 | 第23-24页 |
| 5 本论文研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 非培养技术分析黄河三角洲滨海湿地放线菌多样性 | 第25-47页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1 土壤样品 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第25-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.1 土壤样品部分理化性质的测定 | 第27-28页 |
| 2.2 基因克隆文库的建立 | 第28-31页 |
| 2.3 16S rDNA 序列的克隆测序 | 第31-32页 |
| 2.4 16S rDNA 文库的系统发育分析及多样性分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-46页 |
| 3.1 样品的采集 | 第33页 |
| 3.2 土壤样品可溶性总盐及 pH 的测定 | 第33-34页 |
| 3.3 样品 DNA 的提取及纯化 | 第34-35页 |
| 3.4 纯化产物的 PCR 扩增 | 第35页 |
| 3.5 放线菌 16S rDNA 基因克隆文库的构建及 RFLP 分析 | 第35-36页 |
| 3.6 16S rDNA 基因文库多样性指数分析 | 第36-37页 |
| 3.7 16S rDNA 基因序列的多样性及系统发育分析 | 第37-46页 |
| 4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 纯培养技术分析黄河三角洲滨海湿地放线菌多样性 | 第47-63页 |
| 1 实验材料 | 第47-50页 |
| 1.1 样品 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第47-48页 |
| 1.3 培养基 | 第48-50页 |
| 1.4 引物 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-52页 |
| 2.1 放线菌分离培养 | 第50页 |
| 2.2 放线菌的纯化及保藏 | 第50-51页 |
| 2.3 放线菌菌株基因组 DNA 提取 | 第51页 |
| 2.4 放线菌菌株 16S rDNA 的基因扩增 | 第51-52页 |
| 2.5 PCR 产物回收 | 第52页 |
| 2.6 胶回收产物连接及转化 | 第52页 |
| 2.7 阳性克隆的验证 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-62页 |
| 3.1 滨海湿地放线菌菌株的分离 | 第52-57页 |
| 3.2 滨海湿地放线菌菌株基因组 DNA 的提取 | 第57页 |
| 3.3 滨海湿地放线菌菌株 16S rDNA 的基因扩增 | 第57-58页 |
| 3.4 黄河滨海湿地放线菌多样性及 16S rDNA 系统发育分析 | 第58-61页 |
| 3.5 非培养放线菌多样性与纯培养分离结果比较 | 第61-62页 |
| 4 本章小结 | 第62-63页 |
| 第四章 黄河三角洲滨海湿地纯培养放线菌的活性潜力评估 | 第63-79页 |
| 1 实验材料 | 第63-65页 |
| 1.1 样品 | 第63页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第63-64页 |
| 1.3 培养基 | 第64页 |
| 1.4 功能基因扩增的引物 | 第64-65页 |
| 1.5 供试致病菌株 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-67页 |
| 2.1 分离菌株生物学特性的初步探究 | 第65页 |
| 2.2 分离菌株的抑菌活性实验 | 第65-66页 |
| 2.3 功能基因的扩增 | 第66-67页 |
| 2.4 目的基因片段的回收 | 第67页 |
| 2.5 回收基因片段的连接、转化 | 第67页 |
| 2.6 阳性克隆的验证 | 第67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-77页 |
| 3.1 PKS-I、PKS-II 和 NRPS 基因的扩增结果及分析 | 第67-74页 |
| 3.2 分离菌株生物学特性的初步探究 | 第74页 |
| 3.3 分离菌株抑菌活性实验结果与分析 | 第74-77页 |
| 4 本章小结 | 第77-79页 |
| 论文总结 | 第79-81页 |
| 研究展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 发表的学术论文 | 第87-88页 |
