摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩写词表 | 第6-9页 |
1 引言 | 第9-12页 |
1.1 玉米大斑病及其致病机理 | 第9页 |
1.2 黑色素的形成及作用 | 第9-10页 |
1.3 漆酶基因的研究进展 | 第10-12页 |
2 材料和方法 | 第12-24页 |
2.1 试验材料 | 第12-14页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第12页 |
2.1.2 主要试剂及其配置 | 第12-14页 |
2.1.3 培养基 | 第14页 |
2.1.4 仪器设备 | 第14页 |
2.2 StLAC2 基因敲除转化子的创制及分析 | 第14-18页 |
2.2.1 玉米大斑病菌基因组 DNA 的提取 | 第14-15页 |
2.2.2 StLAC2 基因同源片段的 PCR 扩增 | 第15-16页 |
2.2.3 PCR 扩增产物和潮霉素基因(HPH)回收、连接 | 第16页 |
2.2.4 连接产物的克隆及测序 | 第16-17页 |
2.2.5 目的片段与目标载体的连接 | 第17-18页 |
2.3 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除转化子的获得 | 第18-21页 |
2.3.1 玉米大斑病菌的原生质体转化 | 第18-19页 |
2.3.2 敲除转化子的筛选 | 第19页 |
2.3.3 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除转化子的 PCR 验证 | 第19页 |
2.3.4 转化子的 Southern blot 验证 | 第19-21页 |
2.4 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除突变体的分析 | 第21-24页 |
2.4.1 突变菌株生长发育分析 | 第21页 |
2.4.2 突变菌株的渗透调节能力分析 | 第21页 |
2.4.3 突变菌株漆酶活性的测定 | 第21-22页 |
2.4.4 突变菌株的胞内黑色素分析 | 第22页 |
2.4.5 突变菌株附着胞产生及穿透能力观察 | 第22页 |
2.4.6 突变菌株的侵染力观察 | 第22-24页 |
3 结果与分析 | 第24-32页 |
3.1 StLAC2 基因同源重组载体构建 | 第24-25页 |
3.1.1 StLAC2 基因同源片段的克隆 | 第24页 |
3.1.2 StLAC2 基因敲除载体的酶切验证 | 第24-25页 |
3.2 StLAC2 基因敲除突变体的获得及突变体分析 | 第25-32页 |
3.2.1 玉米大斑病菌原生质体的再生及转化子筛选 | 第25页 |
3.2.2 突变体的 PCR 鉴定 | 第25-26页 |
3.2.3 转化子的 Southern blot 鉴定 | 第26-27页 |
3.2.4 突变菌株的形态学特征 | 第27页 |
3.2.5 突变菌株的菌丝形态 | 第27页 |
3.2.6 突变菌株的产孢量 | 第27-28页 |
3.2.7 突变菌株的生长速度 | 第28页 |
3.2.8 突变菌株的渗透调节能力 | 第28-29页 |
3.2.9 突变菌株的漆酶活性 | 第29-30页 |
3.2.10 突变菌株的黑色素含量 | 第30页 |
3.2.11 突变菌株附着胞穿透能力 | 第30-31页 |
3.2.12 突变菌株侵染力观察 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
4.1 漆酶基因与黑色素合成的关系 | 第32页 |
4.2 DHN 黑色素与病原菌致病性的关系 | 第32-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
附录:夏玉米区丝黑穗病病原菌的鉴定和生物学特性分析 | 第39-51页 |
摘要 | 第39-40页 |
1 引言 | 第40-41页 |
2 材料和方法 | 第41-44页 |
2.1 供试菌株 | 第41页 |
2.2 丝黑穗病菌分离纯化及 DNA 提取 | 第41-42页 |
2.3 供试菌株分子鉴定 | 第42页 |
2.4 丝轴黑粉菌冬孢子形态特征分析 | 第42页 |
2.5 温度对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响 | 第42页 |
2.6 土壤湿度对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响 | 第42-43页 |
2.7 pH 对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响 | 第43页 |
2.8 刺激物对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响 | 第43页 |
2.8.1 NaOH 对冬孢子萌发的影响 | 第43页 |
2.8.2 H2O2对冬孢子萌发的影响 | 第43页 |
2.8.3 CuSO4、HCl 对冬孢子萌发的影响 | 第43页 |
2.9 春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子的药剂敏感性比较 | 第43页 |
2.10 夏玉米区丝黑穗发病地区气象资料分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-49页 |
3.1 夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子形态鉴定 | 第44-45页 |
3.2 丝轴黑粉菌分子鉴定 | 第45页 |
3.3 春夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发温度的比较 | 第45-46页 |
3.4 土壤湿度与春夏玉米区丝黑穗病菌冬孢子萌发的关系 | 第46页 |
3.5 不同 pH 对丝黑穗冬孢子萌发的影响 | 第46-47页 |
3.6 不同刺激物对丝黑穗冬孢子萌发的影响 | 第47页 |
3.7 春夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子的药剂敏感性分析 | 第47-48页 |
3.8 气象情况对发病的影响 | 第48-49页 |
4 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-51页 |
在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |