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玉米大斑病菌StLAC2基因与黑色素合成及致病性关系研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
缩写词表第6-9页
1 引言第9-12页
    1.1 玉米大斑病及其致病机理第9页
    1.2 黑色素的形成及作用第9-10页
    1.3 漆酶基因的研究进展第10-12页
2 材料和方法第12-24页
    2.1 试验材料第12-14页
        2.1.1 菌株与质粒第12页
        2.1.2 主要试剂及其配置第12-14页
        2.1.3 培养基第14页
        2.1.4 仪器设备第14页
    2.2 StLAC2 基因敲除转化子的创制及分析第14-18页
        2.2.1 玉米大斑病菌基因组 DNA 的提取第14-15页
        2.2.2 StLAC2 基因同源片段的 PCR 扩增第15-16页
        2.2.3 PCR 扩增产物和潮霉素基因(HPH)回收、连接第16页
        2.2.4 连接产物的克隆及测序第16-17页
        2.2.5 目的片段与目标载体的连接第17-18页
    2.3 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除转化子的获得第18-21页
        2.3.1 玉米大斑病菌的原生质体转化第18-19页
        2.3.2 敲除转化子的筛选第19页
        2.3.3 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除转化子的 PCR 验证第19页
        2.3.4 转化子的 Southern blot 验证第19-21页
    2.4 玉米大斑病菌 StLAC2 基因敲除突变体的分析第21-24页
        2.4.1 突变菌株生长发育分析第21页
        2.4.2 突变菌株的渗透调节能力分析第21页
        2.4.3 突变菌株漆酶活性的测定第21-22页
        2.4.4 突变菌株的胞内黑色素分析第22页
        2.4.5 突变菌株附着胞产生及穿透能力观察第22页
        2.4.6 突变菌株的侵染力观察第22-24页
3 结果与分析第24-32页
    3.1 StLAC2 基因同源重组载体构建第24-25页
        3.1.1 StLAC2 基因同源片段的克隆第24页
        3.1.2 StLAC2 基因敲除载体的酶切验证第24-25页
    3.2 StLAC2 基因敲除突变体的获得及突变体分析第25-32页
        3.2.1 玉米大斑病菌原生质体的再生及转化子筛选第25页
        3.2.2 突变体的 PCR 鉴定第25-26页
        3.2.3 转化子的 Southern blot 鉴定第26-27页
        3.2.4 突变菌株的形态学特征第27页
        3.2.5 突变菌株的菌丝形态第27页
        3.2.6 突变菌株的产孢量第27-28页
        3.2.7 突变菌株的生长速度第28页
        3.2.8 突变菌株的渗透调节能力第28-29页
        3.2.9 突变菌株的漆酶活性第29-30页
        3.2.10 突变菌株的黑色素含量第30页
        3.2.11 突变菌株附着胞穿透能力第30-31页
        3.2.12 突变菌株侵染力观察第31-32页
4 讨论第32-34页
    4.1 漆酶基因与黑色素合成的关系第32页
    4.2 DHN 黑色素与病原菌致病性的关系第32-34页
5 结论第34-35页
参考文献第35-39页
附录:夏玉米区丝黑穗病病原菌的鉴定和生物学特性分析第39-51页
    摘要第39-40页
    1 引言第40-41页
    2 材料和方法第41-44页
        2.1 供试菌株第41页
        2.2 丝黑穗病菌分离纯化及 DNA 提取第41-42页
        2.3 供试菌株分子鉴定第42页
        2.4 丝轴黑粉菌冬孢子形态特征分析第42页
        2.5 温度对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响第42页
        2.6 土壤湿度对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响第42-43页
        2.7 pH 对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响第43页
        2.8 刺激物对春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发的影响第43页
            2.8.1 NaOH 对冬孢子萌发的影响第43页
            2.8.2 H2O2对冬孢子萌发的影响第43页
            2.8.3 CuSO4、HCl 对冬孢子萌发的影响第43页
        2.9 春、夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子的药剂敏感性比较第43页
        2.10 夏玉米区丝黑穗发病地区气象资料分析第43-44页
    3 结果与分析第44-49页
        3.1 夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子形态鉴定第44-45页
        3.2 丝轴黑粉菌分子鉴定第45页
        3.3 春夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子萌发温度的比较第45-46页
        3.4 土壤湿度与春夏玉米区丝黑穗病菌冬孢子萌发的关系第46页
        3.5 不同 pH 对丝黑穗冬孢子萌发的影响第46-47页
        3.6 不同刺激物对丝黑穗冬孢子萌发的影响第47页
        3.7 春夏玉米区丝轴黑粉菌冬孢子的药剂敏感性分析第47-48页
        3.8 气象情况对发病的影响第48-49页
    4 结论第49-50页
    参考文献第50-51页
在读期间发表的学术论文第51-52页
作者简历第52-53页
致谢第53-54页

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