中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-25页 |
1.1 辣椒疫霉病发生与防治研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 辣椒疫霉的生物学性状 | 第11-12页 |
1.1.2 辣椒疫病的传播途径和发病规律 | 第12-13页 |
1.1.3 辣椒疫霉病的防治方法 | 第13-15页 |
1.2 卵菌基因功能研究技术的研究进展 | 第15-19页 |
1.2.1 基因沉默 | 第15-16页 |
1.2.2 基因过量表达 | 第16页 |
1.2.3 利用CRISPR/Cas9系统的基因敲除 | 第16-19页 |
1.3 农杆菌介导的基因瞬时表达体系 | 第19-20页 |
1.3.1 瞬时表达体系 | 第19页 |
1.3.2 瞬时表达体系的原理 | 第19页 |
1.3.3 瞬时表达体系的载体 | 第19-20页 |
1.4 效应因子的研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 PAMPs触发的植物免疫反应(PAMP-triggered immunity, PTI) | 第21-22页 |
1.4.2 效应分子触发的免疫反应(Effector-Triggered immunity, ETI) | 第22页 |
1.4.3 RxLR效应因子的研究进展 | 第22-23页 |
1.5 细胞周期调控蛋白SDA1的研究进展 | 第23-24页 |
1.6 实验目的及意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-48页 |
2.1 材料 | 第25-30页 |
2.1.1 辣椒疫霉菌株与植物 | 第25页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第25页 |
2.1.3 酶和生化试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 相关耗材和仪器 | 第26-27页 |
2.1.5 常用培养基及有关溶液的配制 | 第27页 |
2.1.6 常用溶液和试剂的配制 | 第27-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-48页 |
2.2.1 细胞周期调控蛋白Pcsda1及RxLR效应分子及的生物信息学及基本理化性质 | 第30页 |
2.2.2 研究过程中的引物 | 第30-32页 |
2.2.3 细胞周期调控蛋白Pcsda1及RxLR效应分子的克隆 | 第32-36页 |
2.2.4 诱导游动孢子 | 第36-37页 |
2.2.5 PcSDA在辣椒疫霉中的亚细胞定位 | 第37-43页 |
2.2.6 农杆菌介导的RxLR效应因子的瞬时表达 | 第43-48页 |
3 结果与分析 | 第48-72页 |
3.1 辣椒疫霉基因克隆及序列分子 | 第48-57页 |
3.1.1 Pcsda1基因的PCR的检测和克隆 | 第48-51页 |
3.1.2 辣椒疫霉RxLR效应因子基因的PCR的检测和克隆 | 第51-57页 |
3.2 Pcsda1基因的核定位信号预测 | 第57-58页 |
3.3 Pcsda1基因在辣椒疫霉中的亚细胞定位 | 第58-59页 |
3.4 Pcsda1基因在辣椒疫霉中调节肌动蛋白细胞骨架 | 第59-61页 |
3.5 RxLR效应因子基因农杆菌瞬时表达 | 第61-72页 |
3.5.1 pBIN-GFP2重组载体的构建及农杆菌转化 | 第61页 |
3.5.2 RxLR效应因子基因农杆菌转化子在烟草体内瞬时表达 | 第61-67页 |
3.5.3 129113 融合核定位蛋白和核输出蛋白植物瞬时表达 | 第67-72页 |
4 结论与讨论 | 第72-75页 |
4.1 Pcsda1 基因和RxLR 效应因子基因生物信息分析 | 第72页 |
4.1.1 Pcsda1基因生物信息分析 | 第72页 |
4.1.2 RxLR效应因子基因生物信息分析 | 第72页 |
4.2 Pcsda1在辣椒疫霉中的亚细胞定位 | 第72-73页 |
4.3 Pcsda1基因在辣椒疫霉中调节肌动蛋白细胞骨架 | 第73页 |
4.4 RxLR效应因子基因农杆菌瞬时表达 | 第73页 |
4.5 129113 融合核定位蛋白和核输出蛋白植物瞬时表达枪瞬时表达 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第84页 |