摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第11-27页 |
1.1 古菌概述 | 第11-13页 |
1.1.1 古菌的分类地位 | 第11页 |
1.1.2 古菌的形态和特征 | 第11-13页 |
1.2 极端嗜盐古菌 | 第13-15页 |
1.2.1 极端嗜盐古菌的简介 | 第13-14页 |
1.2.2 极端嗜盐古菌生产PHAs的研究 | 第14-15页 |
1.3 地中海富盐菌 | 第15页 |
1.4 古菌的相关代谢途径 | 第15-20页 |
1.4.1 糖酵解途径 | 第15-17页 |
1.4.2 古菌中PHAs的合成途径 | 第17页 |
1.4.3 乙酸的活化和利用机制 | 第17-18页 |
1.4.4 古菌中的酮酸代谢途径 | 第18-20页 |
1.5 乙酰乳酸合酶的研究 | 第20-25页 |
1.5.1 乙酰乳酸合酶简介 | 第20-22页 |
1.5.2 支链氨基酸的合成 | 第22-23页 |
1.5.3 嗜盐古菌中 2-酮酸的相关研究 | 第23-25页 |
1.6 论文的内容、目的及意义 | 第25-27页 |
第2章 材料和方法 | 第27-38页 |
2.1 材料 | 第27-30页 |
2.1.1 菌株 | 第27页 |
2.1.2 质粒 | 第27-28页 |
2.1.3 引物 | 第28-29页 |
2.1.4 常用的酶和生化试剂 | 第29页 |
2.1.5 实验使用的仪器设备 | 第29-30页 |
2.2 方法 | 第30-38页 |
2.2.1 培养基和溶液的配制 | 第30-32页 |
2.2.2 极端嗜盐古菌DNA的提取 | 第32-33页 |
2.2.3 大肠杆菌中质粒的快速抽提 | 第33页 |
2.2.4 极端嗜盐古菌或者大肠杆菌中质粒的提取 | 第33-34页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态的制备 | 第34页 |
2.2.6 大肠杆菌的转化 | 第34页 |
2.2.7 嗜盐古菌的转化(PEG介导) | 第34-35页 |
2.2.8 极端嗜盐古菌中基于pyrF基因的基因敲除 | 第35-36页 |
2.2.9 二苯胺法测定DNA含量 | 第36页 |
2.2.10 MG发酵培养基中葡萄糖浓度的测定 | 第36页 |
2.2.11 PHAs检测(气相色谱法) | 第36-37页 |
2.2.12 分子生物学设计辅助软件 | 第37-38页 |
第3章 乙酰乳酸合酶相关基因缺失突变株的构建 | 第38-45页 |
3.1 实验设计 | 第38-39页 |
3.2 结果与讨论 | 第39-44页 |
3.2.1 敲除质粒的构建 | 第39-42页 |
3.2.2 突变株的构建 | 第42-44页 |
3.3 本章小结 | 第44-45页 |
第4章 乙酰乳酸合酶功能性亚基的鉴定 | 第45-54页 |
4.1 实验设计 | 第45页 |
4.2 实验结果与讨论 | 第45-53页 |
4.2.1 发酵实验 | 第45-48页 |
4.2.2 支链氨基酸添加实验 | 第48-53页 |
4.3 本章小结 | 第53-54页 |
第5章 结论与展望 | 第54-56页 |
(一)结论 | 第54页 |
(二)展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63页 |