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Bacillus licheniformis发酵生产丁醇的研究

摘要第13-15页
ABSTRACT第15-16页
第一章 文献综述第17-43页
    0 前言第17页
    1 丁醇概述第17-19页
        1.1 丁醇的性质与用途第17-19页
        1.2 丁醇的生产方法第19页
            1.2.1 化学法第19页
            1.2.2 生物法第19页
            1.2.3 发酵法生产丁醇的优势第19页
    2 丁醇发酵的菌种和工艺第19-28页
        2.1 丁醇发酵中常用的微生物第19-20页
        2.2 遗传菌株的改良第20-23页
        2.3 丁醇的发酵和提取工艺第23-28页
            2.3.1 发酵工艺第23-25页
            2.3.2 丁醇的提取工艺第25-28页
    3 丁醇发酵的代谢途径和机制第28-31页
        3.1 代谢途径第28-30页
        3.2 丁醇发酵机制第30-31页
    4 发酵法生产丁醇的研究进展第31-34页
        4.1 发酵法生产丁醇的历史第31页
        4.2 国内外生物丁醇研究状况第31-34页
    5 问题与展望第34-35页
        5.1 生物燃料丁醇发展中存在的问题及应对策略第34-35页
        5.2 生物燃料丁醇的发展前景与展望第35页
    6 本课题的研究目的、意义和主要内容第35-37页
        6.1 研究目的和意义第35-36页
        6.2 研究范围和内容第36-37页
    参考文献第37-43页
第二章 丁醇高产菌株的选育第43-65页
    0 前言第43页
    1 材料与方法第43-50页
        1.1 材料第43-47页
            1.1.1 实验材料第43页
            1.1.2 试剂第43-45页
            1.1.3 主要仪器与设备第45-46页
            1.1.4 培养基第46页
            1.1.5 溶液第46-47页
        1.2 实验方法第47-48页
            1.2.1 样品的预处理第47页
            1.2.2 菌种的分离选育第47-48页
        1.3 测定方法第48-50页
            1.3.1 溶剂产量的测定第48-50页
            1.3.2 溶剂的定性第50页
            1.3.3 生理生化检测第50页
            1.3.4 16S rRNA检测第50页
    2 结果与分析第50-60页
        2.1 菌种的分离筛选第50-55页
            2.1.1 菌种的富集和分离第50页
            2.1.2 初筛第50-51页
            2.1.3 复筛第51页
            2.1.4 菌株产溶剂稳定性实验第51-52页
            2.1.5 溶剂的定性检测第52-55页
        2.2 菌种的生理生化及分子生物学特性第55-60页
            2.2.1 CM6的形态学特性第55页
            2.2.2 CM6在液体培养基中的生长特征第55-57页
            2.2.3 CM6的生理生化特性第57页
            2.2.4 CM6的分子生物学特性第57-60页
    3 结果与讨论第60-62页
        3.1 结果第60-61页
        3.2 讨论第61-62页
    参考文献第62-65页
第三章 ~(60)Co-γ射线对Bacillus licheniformis CM6的原生质体辐照诱变第65-78页
    0 前言第65页
    1 材料与方法第65-68页
        1.1 材料第65-66页
            1.1.1 菌种第65-66页
            1.1.2 试剂第66页
            1.1.3 主要仪器与设备第66页
            1.1.4 培养基及相关溶液第66页
        1.2 培养条件第66页
        1.3 实验方法第66-68页
            1.3.1 原生质体的辐照诱变步骤第66-67页
            1.3.2 种子培养第67页
            1.3.3 原生质体的制备第67页
            1.3.4 原生质体的~(60)Co—γ射线辐照诱变第67-68页
            1.3.5 突变株的筛选第68页
        1.4 分析方法第68页
            1.4.1 菌体生长量的测定第68页
            1.4.2 溶剂产量的测定第68页
            1.4.3 原生质体形成率和再生率的计算第68页
            1.4.4 辐照致死率的计算第68页
    2 结果与分析第68-74页
        2.1 原生质体制备和再生第68-72页
            2.1.1 菌龄对原生质体制备和再生的影响第68-69页
            2.1.2 化学物质对原生质体制备和再生的影响第69-71页
            2.1.3 溶菌酶对原生质体形成和再生的影响第71-72页
        2.2 CM6的辐照诱变及高产菌株筛选第72-74页
            2.2.1 ~(60)Co—γ射线辐照对原生质体的影响第72页
            2.2.2 初筛第72-73页
            2.2.3 复筛第73页
            2.2.4 菌株遗传稳定性考察第73-74页
    3 结论第74-75页
    参考文献第75-78页
第四章 Bacillus licheniformis R3丁醇分批发酵工艺优化和动力学研究第78-117页
    0 前言第78页
    1 材料与方法第78-84页
        1.1 实验材料第78-79页
            1.1.1 菌种第78-79页
            1.1.2 试剂第79页
            1.1.3 主要仪器和设备第79页
            1.1.4 培养基第79页
        1.2 培养条件第79页
            1.2.1 斜面培养第79页
            1.2.2 种子培养第79页
            1.2.3 摇瓶的分批发酵第79页
            1.2.4 发酵罐的分批发酵第79页
        1.3 实验方法第79-83页
            1.3.1 菌体生长量的测定第79-80页
            1.3.2 菌体生物量的测定第80页
            1.3.3 溶剂产量的测定第80页
            1.3.4 糖的测定第80页
            1.3.5 实验设计第80-83页
        1.4 动力学模型的建立第83-84页
            1.4.1 菌体生长模型第83-84页
            1.4.2 产物生成模型第84页
            1.4.3 基质消耗模型第84页
    2 结果与分析第84-113页
        2.1 培养条件的优化第84-97页
            2.1.1 单因素实验第84-90页
            2.1.2 部分因子实验第90-92页
            2.1.3 Box-Behnken实验第92-97页
            2.1.4 验证实验第97页
        2.2 培养基的优化第97-110页
            2.2.1 单因素实验第97-103页
            2.2.2 部分因子实验第103-105页
            2.2.3 响应面实验Ⅰ第105-107页
            2.2.4 最陡爬坡实验第107-108页
            2.2.5 响应面实验Ⅱ第108-110页
            2.2.6 验证实验第110页
        2.3 分批发酵的动力学模型第110-113页
            2.3.1 R3的分批发酵动态曲线第110-111页
            2.3.2 模型求解第111-112页
            2.3.3 模型的验证第112-113页
    3 结论第113-114页
    参考文献第114-117页
第五章 Bacillus licheniformis R3丁醇代谢酶学特性的初步探讨第117-127页
    0 前言第117-118页
    1 材料与方法第118-121页
        1.1 实验材料第118-119页
            1.1.1 菌种第118页
            1.1.2 主要药品和试剂第118-119页
            1.1.3 主要仪器和设备第119页
            1.1.4 培养基第119页
        1.2 培养条件第119页
            1.2.1 斜面培养第119页
            1.2.2 种子培养第119页
            1.2.3 发酵培养第119页
        1.3 实验方法第119-121页
            1.3.1 溶剂产量的测定第119页
            1.3.2 细胞的破碎第119页
            1.3.3 蛋白质的测定第119-120页
            1.3.4 酶活的检测第120-121页
    2 结果与分析第121-124页
        2.1 细胞破碎条件的研究第121-122页
        2.2 乙醇脱氢酶酶活的变化第122-123页
        2.3 丁醛/醇脱氢酶酶活的变化第123页
        2.4 乙酰乙酸脱羧酶酶活的变化第123-124页
    3 结论第124-125页
    参考文献第125-127页
第六章 Bacillus licheniformis R3的流加发酵工艺优化第127-136页
    0 前言第127页
    1 材料与方法第127-128页
        1.1 实验材料第127-128页
            1.1.1 菌种第127页
            1.1.2 主要药品和试剂第127页
            1.1.3 主要仪器和设备第127页
            1.1.4 培养基第127-128页
        1.2 培养条件第128页
            1.2.1 斜面培养第128页
            1.2.2 种子培养第128页
            1.2.3 补料—分批的三角瓶发酵第128页
            1.2.4 补料—分批的发酵罐流加实验第128页
        1.3 实验方法第128页
            1.3.1 溶剂产量的测定第128页
            1.3.2 菌体生长量的测定第128页
            1.3.3 糖的测定第128页
    2 结果与分析第128-134页
        2.1 葡萄糖补料时机的选择第128-129页
        2.2 葡萄糖补料浓度对溶剂产量的影响第129-130页
        2.3 补料速率对溶剂产量的影响第130-134页
    3 结论第134-135页
    参考文献第135-136页
第七章 Bacillus licheniformis R3利用木糖发酵生产丁醇第136-149页
    0 前言第136页
    1 材料与方法第136-138页
        1.1 实验材料第136-137页
            1.1.1 原料第136页
            1.1.2 菌种第136页
            1.1.3 主要药品和试剂第136-137页
            1.1.4 主要仪器和设备第137页
            1.1.5 培养基第137页
        1.2 培养条件第137页
            1.2.1 斜面培养第137页
            1.2.2 种子培养第137页
            1.2.3 发酵培养第137页
        1.3 实验方法第137-138页
            1.3.1 溶剂产量的测定第137页
            1.3.2 木糖的测定第137-138页
            1.3.3 实验设计第138页
    2 结果与分析第138-146页
        2.1 木糖浓度对溶剂产量的影响第138-139页
        2.2 酵母浸粉浓度对溶剂产量的影响第139-140页
        2.3 接种量对溶剂产量的影响第140-141页
        2.4 木糖发酵培养基的优化第141-145页
            2.4.1 丁醇产量多元二次模型方程的建立及检验第141-142页
            2.4.2 丁醇产量响应面交互作用与优化第142-144页
            2.4.3 验证实验第144-145页
        2.5 玉米芯水解液发酵生产丁醇第145-146页
    3 结论第146-147页
    参考文献第147-149页
第八章 主要研究结果、创新与展望第149-152页
    1 主要研究结果第149-150页
    2 创新第150页
    3 展望第150-152页
致谢第152-153页
攻读博士学位期间(已、待)发表论文及科研情况第153页

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