摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 黄芪多糖 | 第13-14页 |
1.2 肿瘤细胞免疫原性死亡的形成 | 第14-16页 |
1.3 肿瘤细胞免疫原性死亡相关蛋白:钙网蛋白 | 第16-17页 |
1.4 肿瘤细胞免疫原性死亡相关信号分子:细胞外ATP | 第17-18页 |
1.5 肿瘤细胞免疫原性死亡相关蛋白:高迁移率族蛋白B1 | 第18-19页 |
第二章 黄芪多糖和蜜炙黄芪多糖的提取及含量测定 | 第19-23页 |
2.1 仪器和试剂 | 第19-20页 |
2.1.1 主要仪器 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-21页 |
2.2.1 样品的制备 | 第20页 |
2.2.2 多糖的提取分离和纯化 | 第20页 |
2.2.3 多糖的含量测定 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-23页 |
2.3.1 实验结果 | 第21-23页 |
第三章 蜜炙黄芪多糖诱导人肺癌细胞A549的细胞免疫原性死亡 | 第23-39页 |
3.1 仪器和试剂 | 第23-25页 |
3.1.1 主要仪器 | 第23-24页 |
3.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
3.1.3 常用试剂的配制 | 第25页 |
3.2 实验方法和步骤 | 第25-29页 |
3.2.1 细胞培养 | 第25-26页 |
3.2.2 CCK8检测细胞增殖活性 | 第26-27页 |
3.2.3 A549细胞周期及凋亡检测 | 第27页 |
3.2.4 细胞表面MHC-I与Hsp70分子的检测 | 第27-28页 |
3.2.5 细胞表面的钙网蛋白的检测 | 第28页 |
3.2.6 细胞外ATP释放检测实验 | 第28-29页 |
3.2.7 统计学处理 | 第29页 |
3.3 实验结果和分析 | 第29-39页 |
3.3.1 蜜炙黄芪多糖对A549细胞的增殖影响 | 第29-30页 |
3.3.2 蜜炙黄芪多糖对诱导A549细胞凋亡及细胞周期的影响 | 第30-32页 |
3.3.3 蜜炙黄芪多糖对A549细胞表面的MHC-I与Hsp70分子的表达影响 | 第32-35页 |
3.3.4 蜜炙黄芪多糖对A549细胞表面的钙网蛋白的表达影响 | 第35-36页 |
3.3.5 蜜炙黄芪多糖能诱导A549细胞凋亡时ATP释放的影响 | 第36-39页 |
第四章 蜜炙黄芪多糖诱导小鼠结肠癌和黑色素瘤细胞的免疫原性死亡 | 第39-59页 |
4.1 仪器和试剂 | 第39-41页 |
4.1.1 主要仪器 | 第39-40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
4.2 实验方法和步骤 | 第41-45页 |
4.2.1 细胞培养 | 第41页 |
4.2.2 细胞增殖活性检测 | 第41页 |
4.2.3 细胞凋亡检测 | 第41-42页 |
4.2.4 流式细胞术检测细胞表面相关分子的表达 | 第42-43页 |
4.2.5 细胞外ATP释放检测实验 | 第43页 |
4.2.6 小鼠T淋巴细胞增殖实验 | 第43-45页 |
4.2.7 统计分析 | 第45页 |
4.3 结果和分析 | 第45-59页 |
4.3.1 蜜炙黄芪多糖对B16与MC38细胞的增殖影响 | 第45-46页 |
4.3.2 蜜炙黄芪多糖对MC38与B16细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
4.3.3 蜜炙黄芪多糖对B16与MC38细胞表面的分子表达影响 | 第48-52页 |
4.3.4 蜜炙黄芪多糖对MC38与B16细胞免疫原性死亡时释放ATP的影响 | 第52-53页 |
4.3.5 蜜炙黄芪多糖对MC38与B16细胞免疫原性死亡时CRT的表达影响 | 第53-56页 |
4.3.6 蜜炙黄芪多糖对小鼠T细胞增殖的影响 | 第56-59页 |
第五章 蜜炙黄芪多糖促进小鼠树突状细胞的成熟 | 第59-71页 |
5.1 仪器和试剂 | 第59-61页 |
5.1.1 主要仪器 | 第59-60页 |
5.1.2 主要试剂 | 第60-61页 |
5.2 实验方法和步骤 | 第61-63页 |
5.2.1 细胞培养 | 第62页 |
5.2.2. 流式细胞术检测蜜炙黄芪多糖对DC2.4 细胞表面分子的表达 | 第62页 |
5.2.3 小鼠骨髓DC细胞的分离与培养 | 第62-63页 |
5.2.4 FACS检测蜜炙黄芪多糖对小鼠骨髓DC表面分子的表达 | 第63页 |
5.3. 实验结果与分析 | 第63-71页 |
5.3.1 黄芪多糖和蜜炙黄芪多糖对DC2.4 细胞的成熟的影响 | 第63-66页 |
5.3.2 蜜炙黄芪多糖对小鼠骨髓DC的成熟影响 | 第66-71页 |
第六章 蜜炙黄芪多糖对小鼠移植瘤抑制实验 | 第71-78页 |
6.1 仪器和试剂 | 第71-72页 |
6.1.1 主要仪器 | 第71页 |
6.1.2 主要试剂 | 第71-72页 |
6.2 实验方法和步骤 | 第72页 |
6.2.1 细胞的培养 | 第72页 |
6.2.2 收集细胞 | 第72页 |
6.3 C57/B6小鼠黑色素移植瘤模型的构建 | 第72-73页 |
6.4 统计学分析 | 第73页 |
6.5 实验结果和分析 | 第73-78页 |
6.5.1 蜜炙黄芪多糖对黑色素移植瘤生长的影响 | 第73-75页 |
6.5.2 蜜炙黄芪多糖对C57/B6小鼠体重的影响 | 第75页 |
6.5.3 蜜炙黄芪多糖对C57/B6黑色素移植瘤小鼠CD3+T细胞的影响 | 第75-78页 |
第七章 总结与展望 | 第78-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第87-88页 |
附录 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |