摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
英文缩略表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-33页 |
1.1 细胞壁的结构与功能 | 第14-16页 |
1.1.1 胞间层和初生细胞壁 | 第15-16页 |
1.1.2 次生细胞壁 | 第16页 |
1.2 果胶的研究进展 | 第16-25页 |
1.2.1 果胶的结构 | 第16-22页 |
1.2.2 果胶的连接方式 | 第22-23页 |
1.2.3 果胶降解酶 | 第23-25页 |
1.3 果胶裂解酶的研究进展 | 第25-29页 |
1.3.1 果胶裂解酶的催化机制 | 第25-27页 |
1.3.2 果胶裂解酶基因在植物中的研究 | 第27-29页 |
1.4 细胞壁生物技术研究 | 第29-31页 |
1.4.1 细胞壁免疫组织化学技术 | 第29-30页 |
1.4.2 基于ELISA的糖组学分析 | 第30-31页 |
1.4.3 原子力显微镜 | 第31页 |
1.5 本研究目的和意义 | 第31-33页 |
第二章 实验材料和方法 | 第33-52页 |
2.1 实验材料 | 第33页 |
2.1.1 材料来源 | 第33页 |
2.2 试验试剂与仪器 | 第33-34页 |
2.2.1 试剂 | 第33-34页 |
2.2.2 仪器 | 第34页 |
2.2.3 菌株和载体 | 第34页 |
2.3 试验方法 | 第34-52页 |
2.3.1 农艺性状考查 | 第34页 |
2.3.2 遗传群体的构建及分析 | 第34-35页 |
2.3.3 细胞学分析 | 第35-36页 |
2.3.4 透射电镜分析 | 第36页 |
2.3.5 DNA的提取及PCR | 第36-37页 |
2.3.6 DEL1的图位克隆 | 第37-38页 |
2.3.7 载体构建及遗传转化 | 第38-41页 |
2.3.8 水稻转基因 | 第41-42页 |
2.3.9 基因的进化分析 | 第42页 |
2.3.10 水稻总RNA的提取、反转录及qRT-PCR | 第42-44页 |
2.3.11 GUS组织化学分析 | 第44-45页 |
2.3.12 细胞壁中性单糖及纤维素含量测定 | 第45页 |
2.3.13 糖醛酸及半纤维素含量测定 | 第45-46页 |
2.3.14 果胶裂解酶(PEL)活测定 | 第46-47页 |
2.3.15 免疫组织化学分析 | 第47页 |
2.3.16 流式细胞仪分析 | 第47页 |
2.3.17 叶片衰老生理指标测定 | 第47-51页 |
2.3.18 TUNEL检测叶片PCD | 第51页 |
2.3.19 转录组实验 | 第51-52页 |
第三章 结果与分析 | 第52-78页 |
3.1 del1植株矮小 | 第52-57页 |
3.1.1 del1表现出发育受阻 | 第52-54页 |
3.1.2 del1茎变短、变细 | 第54-55页 |
3.1.3 del1细胞数目减少 | 第55-56页 |
3.1.4 del1细胞周期进程受到阻碍 | 第56-57页 |
3.2 del1叶片衰老 | 第57-62页 |
3.2.1 del1叶片表现出早衰表型 | 第57-58页 |
3.2.2 del1叶绿体发育异常 | 第58-59页 |
3.2.3 del1叶片活性氧积累 | 第59-60页 |
3.2.4 del1引起抗氧化及衰老相关基因表达升高 | 第60-61页 |
3.2.5 del1加速叶片程序化死亡 | 第61-62页 |
3.3 del1由单隐性核基因控制 | 第62-63页 |
3.4 DEL1的图位克隆 | 第63-64页 |
3.5 转基因功能验证 | 第64-66页 |
3.6 DEL1编码一个果胶裂解酶前体蛋白 | 第66-67页 |
3.7 DEL1的进化分析 | 第67-68页 |
3.8 DEL1的表达模式 | 第68-70页 |
3.9 DEL1突变导致果胶裂解酶活性下降并改变细胞壁的组成和结构 | 第70-72页 |
3.10 DEL1突变导致同聚半乳糖醛酸甲酯化程度升高 | 第72-74页 |
3.11 转录组分析显示del1中许多与细胞壁和衰老相关基因表达发生显著变化 | 第74-78页 |
第四章 讨论 | 第78-81页 |
4.1 DEL1通过改变细胞周期进程影响水稻正常发育 | 第78页 |
4.2 DEL1通过ROS的积累加速叶片衰老 | 第78-79页 |
4.3 可能引起DEL1表型的分子机制 | 第79-81页 |
第五章 全文结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-98页 |
附录Ⅰ 常用试剂及培养基配方 | 第98-107页 |
附录Ⅱ 作者简历及攻读学位期间研究成果 | 第107-109页 |
致谢 | 第109-111页 |