摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
第1章 前言 | 第14-25页 |
1.1 昆虫对钠离子通道阻抑剂的抗药性 | 第14-18页 |
1.1.1 氰氟虫腙 | 第14-15页 |
1.1.2 亚致死浓度氰氟虫腙对昆虫的影响 | 第15页 |
1.1.3 不同杀虫剂与氰氟虫腙之间的交互抗性 | 第15-16页 |
1.1.4 昆虫对钠离子通道阻抑剂的抗性机理 | 第16-17页 |
1.1.5 昆虫对钠离子通道阻抑剂的抗性遗传 | 第17-18页 |
1.2 Para型钠离子通道研究进展 | 第18-22页 |
1.2.1 昆虫钠离子通道的克隆 | 第18-20页 |
1.2.2 钠离子通道与昆虫抗药性关系 | 第20-22页 |
1.2.2.1 位点突变与抗药性关系 | 第20-21页 |
1.2.2.2 可变剪接与抗药性关系 | 第21页 |
1.2.2.3 RNA编辑与抗药性关系 | 第21-22页 |
1.3 适合度与昆虫抗药性关系的研究 | 第22-23页 |
1.4 研究目的意义和主要内容 | 第23-25页 |
1.4.1 研究目的意义 | 第23-24页 |
1.4.2 技术路线 | 第24-25页 |
第2章 小菜蛾对氰氟虫腙抗性选育及生化机理 | 第25-35页 |
2.1 材料和方法 | 第25-29页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第25-26页 |
2.1.2 供试药剂 | 第26页 |
2.1.3 供试器材 | 第26页 |
2.1.4 生物活性测定 | 第26-27页 |
2.1.5 抗性选育 | 第27页 |
2.1.6 交互抗性 | 第27页 |
2.1.7 增效剂对氰氟虫腙增效作用测定 | 第27-28页 |
2.1.8 解毒酶酶活力测定 | 第28-29页 |
2.1.8.1 羧酸酯酶活性测定 | 第28页 |
2.1.8.2 谷胱甘肽S-转移酶活性测定 | 第28页 |
2.1.8.3 多功能氧化酶活性测定 | 第28页 |
2.1.8.4 蛋白含量测定 | 第28-29页 |
2.1.9 数据分析 | 第29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-32页 |
2.2.1 小菜蛾对氰氟虫腙抗性选育 | 第29-30页 |
2.2.2 Meta-SEL品系与其他杀虫剂的交互抗性 | 第30-31页 |
2.2.3 小菜蛾对氰氟虫腙抗性的生化机理 | 第31-32页 |
2.2.3.1 抗性和敏感品系小菜蛾体内3种解毒酶活性 | 第31页 |
2.2.3.2 TPP/DEM/PBO对氰氟虫腙的增效作用 | 第31-32页 |
2.3 讨论 | 第32-35页 |
第3章 抗氰氟虫腙小菜蛾品系生物适合度及其遗传方式研究 | 第35-47页 |
3.1 材料和方法 | 第35-38页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第35页 |
3.1.2 供试药剂 | 第35页 |
3.1.3 供试器材 | 第35页 |
3.1.4 生物活性测定 | 第35-36页 |
3.1.5 抗氰氟虫腙小菜蛾品系的生物适合度 | 第36页 |
3.1.6 小菜蛾对氰氟虫腙的抗性遗传方式 | 第36-37页 |
3.1.7 数据分析 | 第37-38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-45页 |
3.2.1 小菜蛾抗性和敏感品系的生命表及适合度 | 第38-42页 |
3.2.2 抗氰氟虫腙小菜蛾品系的抗性遗传方式 | 第42-45页 |
3.3 讨论 | 第45-47页 |
第4章 小菜蛾钠离子通道的克隆及其表达量研究 | 第47-69页 |
4.1 材料和方法 | 第47-56页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第47页 |
4.1.2 供试试剂 | 第47-48页 |
4.1.3 仪器和设备 | 第48页 |
4.1.4 常用试剂的配置 | 第48-49页 |
4.1.5 E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
4.1.6 引物设计 | 第50-51页 |
4.1.7 总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第51-52页 |
4.1.7.1 小菜蛾总RNA的提取 | 第51页 |
4.1.7.2 第一链cDNA合成 | 第51-52页 |
4.1.8 PCR扩增 | 第52-53页 |
4.1.8.1 RT- PCR反应 | 第52-53页 |
4.1.8.2 实时荧光定量PCR反应 | 第53页 |
4.1.9 割胶回收 | 第53-54页 |
4.1.10 连接 | 第54页 |
4.1.11 转化 | 第54-55页 |
4.1.12 蓝白斑筛选 | 第55页 |
4.1.13 序列和数据分析 | 第55-56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-67页 |
4.2.1 小菜蛾抗性和感敏品系钠离子通道基因的克隆 | 第56页 |
4.2.2 小菜蛾钠离子通道基因的同源性和系统进化分析 | 第56-63页 |
4.2.3 小菜蛾抗性和感敏品系钠离子通道基因比较 | 第63-66页 |
4.2.4 小菜蛾抗性和感敏品系钠离子通道基因表达量比较 | 第66-67页 |
4.3 讨论 | 第67-69页 |
第5章 小菜蛾钠离子通道点突变及可变剪接稳定性验证 | 第69-78页 |
5.1 材料和方法 | 第69-74页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第69页 |
5.1.2 供试试剂 | 第69页 |
5.1.3 仪器和设备 | 第69-70页 |
5.1.4 常用试剂的配置 | 第70页 |
5.1.5 引物设计 | 第70-71页 |
5.1.6 小菜蛾钠离子通道F1809Y的突变频率测定 | 第71-72页 |
5.1.6.1 单头小菜蛾基因组DNA的提取 | 第71-72页 |
5.1.6.2 PCR扩增 | 第72页 |
5.1.7 总RNA的提取及第一链cDNA合成 | 第72-74页 |
5.1.7.1 单头小菜蛾总RNA的提取 | 第72-73页 |
5.1.7.2 第一链cDNA合成 | 第73页 |
5.1.7.3 PCR扩增 | 第73页 |
5.1.7.4 割胶回收 | 第73页 |
5.1.7.5 连接、转化及测序 | 第73-74页 |
5.1.8 序列分析 | 第74页 |
5.2 结果与分析 | 第74-76页 |
5.2.1 单头小菜蛾基因组DNA质量检测 | 第74-75页 |
5.2.2 小菜蛾钠离子通道基因位点突变频率检测 | 第75页 |
5.2.3 小菜蛾钠离子通道基因可变剪接稳定性验证 | 第75-76页 |
5.3 讨论 | 第76-78页 |
第6章 小菜蛾对氰氟虫腙抗性稳定性研究 | 第78-84页 |
6.1 材料和方法 | 第78-80页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第78页 |
6.1.2 供试试剂 | 第78-79页 |
6.1.3 仪器和设备 | 第79页 |
6.1.4 小菜蛾对氰氟虫腙抗性稳定性测定 | 第79页 |
6.1.5 小菜蛾抗性衰退品系体内3种解毒酶活性测定 | 第79页 |
6.1.6 3种增效剂对氰氟虫腙的增效作用 | 第79-80页 |
6.1.7 小菜蛾抗性衰退品系钠离子通道位点F1809Y的突变频率 | 第80页 |
6.1.8 数据分析 | 第80页 |
6.2 结果与分析 | 第80-83页 |
6.2.1 小菜蛾对氰氟虫腙的抗性稳定性 | 第80-81页 |
6.2.2 小菜蛾UNSEL和敏感品系体内3种解毒酶活性 | 第81页 |
6.2.3 3种增效剂对氰氟虫腙的增效作用 | 第81-82页 |
6.2.4 PxNav位点F1809Y的突变频率 | 第82-83页 |
6.3 讨论 | 第83-84页 |
第7章 总结与展望 | 第84-86页 |
7.1 总结 | 第84页 |
7.2 创新点 | 第84页 |
7.3 展望 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-102页 |
附录 攻读博士学位期间发表文章 | 第102-103页 |
致谢 | 第103-104页 |