摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1. 前言 | 第11-21页 |
1.1 细胞凋亡概述 | 第11-13页 |
1.1.1 细胞凋亡定义 | 第11页 |
1.1.2 细胞凋亡的形态变化和生化变化 | 第11-12页 |
1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第12页 |
1.1.4 细胞色素C与细胞凋亡 | 第12-13页 |
1.2 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)与细胞凋亡 | 第13-15页 |
1.2.1 Caspase家族及其特征 | 第13-14页 |
1.2.2 Caspase在细胞凋亡中的作用 | 第14-15页 |
1.3 Apaf-1与细胞凋亡 | 第15-17页 |
1.3.1 Apaf-1的结构与分布 | 第15页 |
1.3.2 Apaf-1相互作用因子 | 第15-16页 |
1.3.3 Apaf-1参与的细胞凋亡信号通路 | 第16-17页 |
1.3.4 Apaf-1在胚胎发育中的作用 | 第17页 |
1.4 昆虫细胞凋亡的信号通路 | 第17-20页 |
1.4.1 依赖于细胞色素C释放的凋亡通路 | 第18页 |
1.4.2 与线虫细胞凋亡类似的途径 | 第18-19页 |
1.4.3 不依赖于Caspase的凋亡途径 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2. 实验材料和方法 | 第21-37页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 昆虫细胞 | 第21页 |
2.1.2 菌种和载体 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
2.1.4 所用试剂的配制 | 第22-24页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第24页 |
2.2 实验方法与操作步骤 | 第24-37页 |
2.2.1 利用Trizol法提取SL-1细胞总RNA | 第24-25页 |
2.2.2 RT-PCR法对目的基因Apaf-1中间片段的扩增 | 第25-31页 |
2.2.3 RACE法对斜纹夜蛾(SL-1)Apaf-1基因cDNA扩增 | 第31-37页 |
3. 实验结果 | 第37-50页 |
3.1 SL-1总RNA电泳检测 | 第37页 |
3.2 SL-1的Apaf-1基因片段的PCR扩增及序列测定 | 第37-38页 |
3.3 SL-1 Apaf-1 cDNA5'端的延伸 | 第38-39页 |
3.4 SL-1 Apaf-1 cDNA3'端的延伸 | 第39-42页 |
3.5 SL-1 Apaf-1cDNA5’末端的扩增(5’RACE) | 第42-43页 |
3.6 SL-1 Apaf-1cDNA3'末端的扩增(3'RACE) | 第43-45页 |
3.7 cDNA全长与序列分析 | 第45-50页 |
3.7.1 斜纹夜蛾Apaf-1基因cDNA序列拼接结构及推导出的氨基酸序列基本信息 | 第45-47页 |
3.7.2 同源性比较 | 第47-48页 |
3.7.3 系统发育分析 | 第48-49页 |
3.7.4 蛋白结构与功能预测 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56页 |