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FGFs在人和小鼠早期牙胚中表达模式的比较及其功能的初步研究

中文摘要第2-4页
Abstract第4-5页
中文文摘第6-9页
目录第9-13页
绪论第13-27页
    1、牙齿发育第13-27页
        1. 哺乳动物牙齿发育过程第13-16页
        2. 哺乳动物牙齿发育机制第16-24页
            2.1 颅面神经嵴在牙齿早期发育中的作用第16页
            2.2 牙齿发育早期牙上皮与牙间充质相互作用第16页
            2.3 牙齿发育的分子机制第16-24页
                2.3.1 WNTs第16页
                2.3.2 BMPs第16-17页
                2.3.3 SHH第17-18页
                2.3.4 FGFs第18-23页
                2.3.5 信号通路间的交互作用第23-24页
        2、原位杂交第24-25页
        3、利用慢病毒进行过表达技术第25-26页
        4、研究意义第26-27页
第1章 材料和方法第27-43页
    1.1 材料第27-31页
        1.1.1 材料来源第27页
        1.1.2 实验动物第27页
        1.1.3 细胞第27页
        1.1.4 菌株和质粒载体第27页
        1.1.5 主要实验仪器第27-28页
        1.1.6 主要实验试剂第28页
        1.1.7 常用培养基及缓冲液第28-29页
        1.1.8 原位杂交试剂第29-31页
    1.2 方法第31-43页
        1.2.1 人/小鼠牙胚总RNA的提取第31-32页
        1.2.2 总RNA反转为cDNA第32页
        1.2.3 RT-PCR(Reverse transcription-PCR)第32-33页
        1.2.4 Real-time PCR第33页
        1.2.5 重组质粒构建第33-35页
        1.2.6 原位杂交第35-38页
        1.2.7 慢病毒的生产第38-40页
            1.2.7.1 大量提取慢病毒包装质粒第38-39页
            1.2.7.2 293T细胞的培养第39页
            1.2.7.3 磷酸钙法转染293T细胞产慢病毒第39-40页
            1.2.7.4 慢病毒上清液的浓缩第40页
            1.2.7.5 浓缩慢病毒滴度测定第40页
        1.2.8 嵌合体过表达/重组技术第40-41页
            1.2.8.1 E13.5小鼠牙胚间充质细胞的分离第40页
            1.2.8.2 慢病毒感染E13.5小鼠牙胚间充质细胞第40-41页
            1.2.8.3 E11.5小鼠牙胚上皮的分离第41页
            1.2.8.4 嵌合体重组第41页
            1.2.8.5 小鼠肾囊膜移植第41页
            1.2.8.6 嵌合体取材、固定、包埋及切片第41页
        1.2.9 HE(Hematoxylin and Eosin)和AZAN染色第41-42页
        1.2.10 石蜡切片免疫组化第42-43页
第2章 结果第43-65页
    2.1 人类早期牙胚FGFs表达模式研究第43-57页
        2.1.1 人类早期牙胚FGFs表达模式的初步确定第43-44页
        2.1.2 人FGFs基因的克隆及探针制备第44-45页
        2.1.3 人类早期牙胚FGFs的表达模式检测第45-57页
            2.1.3.1 FGF1在人类早期牙胚的表达模式第45-46页
            2.1.3.2 FGF2在人类早期牙胚的表达模式第46-48页
            2.1.3.3 FGF3在人类早期牙胚的表达模式第48-49页
            2.1.3.4 FGF4在人类早期牙胚的表达模式第49-50页
            2.1.3.6 FGF7在人类早期牙胚的表达模式第50-51页
            2.1.3.7 FGF8在人类早期牙胚的表达模式第51-53页
            2.1.3.8 FGF9在人类早期牙胚的表达模式第53-54页
            2.1.3.9 FGF10在人类早期牙胚的表达模式第54-55页
            2.1.3.10 FGF15/19在人类早期牙胚的表达模式第55-56页
            2.1.3.11 FGF18在人类早期牙胚的表达模式第56-57页
    2.2 FGFs在哺乳动物牙齿发育功能的研究第57-65页
        2.2.1 慢病毒质粒载体的构建及慢病毒的制备第57-59页
        2.2.2 小鼠间充质分别过表达Fgf7,Fgf9,Fgf17和Fgf18体系的建立第59-61页
        2.2.3 Fgf7,Fgf9,Fgf17和Fgf18在小鼠牙齿发育功能的初步研究第61-65页
            2.2.3.1 Fgf7的过表达并未明显影响小鼠牙齿的发育第61-62页
            2.2.3.2 Fgf9的过表达并未明显影响小鼠牙齿的发育第62页
            2.2.3.3 Fgf17的过表达并未明显影响小鼠牙齿的发育第62页
            2.2.3.4 FgF18的达能够明显延缓小鼠牙齿的发育速率第62-65页
第3章 分析与讨论第65-71页
    3.1 FGFs参与调控哺乳动物牙齿发育的调控第65-68页
    3.2 FGF18参与调控小鼠牙齿发育速率第68-69页
    3.3 研究人类牙齿发育特性的重要性第69-71页
第4章 结论第71-73页
    4.1 FGFs参与调控哺乳动物牙齿发育的调控第71页
    4.2 FGF18参与调控小鼠牙齿发育速率第71-73页
附录第73-89页
    附录1 基因和蛋白质符号说明第73-74页
    附录2 引物第74-76页
    附录3 质粒载体第76-77页
    附录4 测序报告单第77-89页
参考文献第89-99页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第99-101页
致谢第101-105页
个人简历第105-107页

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