| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 绪论 | 第10-22页 |
| 一、牙齿的发育 | 第10-15页 |
| 1. 小鼠和人的牙齿发育过程 | 第10-11页 |
| 2. 哺乳动物牙齿发育的分子机制 | 第11-15页 |
| 二、多基因共表达系统的研究进展 | 第15-18页 |
| 1. 单启动子多基因(多顺反子)系统 | 第16-17页 |
| 2. 单基因多载体共表达系统 | 第17页 |
| 3. 多重转录单元多基因系统 | 第17-18页 |
| 三、牙髓干细胞为基础的牙齿再生的研究进展 | 第18-20页 |
| 四、本实验研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第一章 材料和方法 | 第22-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 1.1.1 实验材料的来源 | 第22页 |
| 1.1.2 菌株、质粒和细胞 | 第22页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 1.1.4 实验试剂 | 第23页 |
| 1.1.5 实验试剂配方 | 第23-26页 |
| 1.1.6 PCR引物 | 第26-27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 1.2.1 质粒的改造 | 第27-32页 |
| 1.2.2 cDNA克隆 | 第32页 |
| 1.2.3 RNA探针制备 | 第32-33页 |
| 1.2.4 原位杂交检测 | 第33-34页 |
| 1.2.5 牙髓干细胞的分离和培养 | 第34-35页 |
| 1.2.6 细胞的复苏、培养、传代和冻存 | 第35页 |
| 1.2.7 脂质体Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染步骤 | 第35-36页 |
| 1.2.8 细胞总蛋白提取 | 第36页 |
| 1.2.9 Western blot | 第36-38页 |
| 第二章 实验结果 | 第38-54页 |
| 2.1 人牙胚表达的DLX1为转录子亚型1 | 第38-40页 |
| 2.2 DLX1转录因子在人牙胚发育过程中的表达检测 | 第40页 |
| 2.3 MSX1、PAX9、DLX1共表达载体的构建 | 第40-46页 |
| 2.3.1 改造质粒示意图 | 第40-41页 |
| 2.3.2 pEcoRI~+的构建 | 第41-42页 |
| 2.3.3 pCMV的构建 | 第42-43页 |
| 2.3.4 MSXl片段的获得 | 第43页 |
| 2.3.5 构建pCMV-MSX1、pCMV-PAX9、pCMV.DLXW1 | 第43-44页 |
| 2.3.6 构建pCMV-MSX1-PAX9-DLX1质粒 | 第44-45页 |
| 2.3.7 构建pCMV~--MSX1-PAX9-DLX1质粒 | 第45-46页 |
| 2.4 多基因共表达对DPSC分化的影响 | 第46-54页 |
| 2.4.1 牙髓干细胞分离和培养 | 第47页 |
| 2.4.2 牙髓干细胞多向分化潜能的鉴定 | 第47-48页 |
| 2.4.3 优化转染条件,确定转染时间 | 第48-49页 |
| 2.4.4 优化转染条件,调整DNA/lipo 2000剂量比 | 第49-50页 |
| 2.4.5 脂质体转染共表达载体到DPSC、hEDMC、ihEDMC4初步检测MSX1、PAX9、DLX1的表达 | 第50-52页 |
| 2.4.6 脂质体转染DPSC,2W后收获细胞,检测DPSC分化方向 | 第52-54页 |
| 第三章 分析和讨论 | 第54-58页 |
| 3.1 多基因共表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.2 目的基因转入受体细胞 | 第55-56页 |
| 3.3 共表达载体对DPSC分化的影响 | 第56-57页 |
| 3.4 本实验的研究展望 | 第57-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-60页 |
| 附录1 | 第60-62页 |
| 附录2 | 第62-64页 |
| 附录3 | 第64-66页 |
| 附录4 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
