摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词索引表 | 第9-16页 |
第1章 绪论 | 第16-30页 |
1.1 植物多酚的研究与应用 | 第16-18页 |
1.1.1 植物多酚的简介 | 第16页 |
1.1.2 植物多酚的结构和分类 | 第16-17页 |
1.1.3 植物多酚的功能 | 第17-18页 |
1.1.4 植物多酚在实际应用中的问题 | 第18页 |
1.2 植物多酚衍生化方法 | 第18-21页 |
1.2.1 物理方法 | 第18-19页 |
1.2.2 化学合成法 | 第19-20页 |
1.2.3 酶促合成法 | 第20-21页 |
1.3 非水相酶催化反应概述 | 第21-22页 |
1.3.1 非水相酶催化反应的特点 | 第21页 |
1.3.2 非水相体系中酶催化反应的影响因素 | 第21-22页 |
1.3.3 非水相反应体系中酶催化反应的应用前景 | 第22页 |
1.4 微波辐射偶联非水相酶催化技术 | 第22-24页 |
1.4.1 微波效应 | 第22页 |
1.4.2 微波加热对非水相酶促反应初速度的影响 | 第22-23页 |
1.4.3 微波加热对非水相酶促反应产率的影响 | 第23页 |
1.4.4 微波加热对酶的选择性、结构和稳定性的影响 | 第23-24页 |
1.5 熊果苷概述 | 第24页 |
1.6 熊果苷的应用研究进展 | 第24-27页 |
1.6.1 美白亮肤作用 | 第24-25页 |
1.6.2 抗炎抑菌作用 | 第25页 |
1.6.3 镇咳、祛痰、平喘 | 第25-26页 |
1.6.4 抗氧化作用 | 第26页 |
1.6.5 抗肿瘤作用 | 第26-27页 |
1.6.6 保护放射物诱导细胞凋亡 | 第27页 |
1.7 熊果苷存在的问题及衍生化研究 | 第27-28页 |
1.8 本研究的立题背景、研究意义和主要研究内容 | 第28-30页 |
第2章 熊果苷非水相酶促乙酰化反应的研究 | 第30-44页 |
2.1 仪器与材料 | 第31-32页 |
2.1.1 主要仪器 | 第31页 |
2.1.2 材料与试剂 | 第31页 |
2.1.3 酶 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32页 |
2.2.1 熊果苷的乙酰化反应 | 第32页 |
2.2.2 水活度的设定(a_w) | 第32页 |
2.2.3 分析方法 | 第32页 |
2.2.4 熊果苷衍生物的结构鉴定 | 第32页 |
2.3 结果和讨论 | 第32-40页 |
2.3.1 酶源对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第32-33页 |
2.3.2 酰基供体对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第33-34页 |
2.3.3 反应溶剂对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第34-35页 |
2.3.4 水活度对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第35-36页 |
2.3.5 温度对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第36-38页 |
2.3.6 加酶量对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第38-39页 |
2.3.7 熊果苷非水相酶促乙酰化反应的时间进程 | 第39-40页 |
2.4 熊果苷乙酰化衍生物的确证 | 第40-42页 |
2.4.1 RPTLC法确认熊果苷乙酰化衍生物 | 第40-41页 |
2.4.2 HPLC法确认熊果苷乙酰化衍生物 | 第41-42页 |
2.4.3 核磁共振法结构鉴定熊果苷乙酰化衍生物 | 第42页 |
2.5 本章小结 | 第42-44页 |
第3章 响应面法优化微波辅助熊果苷非水相酶促乙酰化反应的研究 | 第44-58页 |
3.1 仪器与材料 | 第44-45页 |
3.1.1 主要仪器 | 第44-45页 |
3.1.2 材料与试剂 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45-46页 |
3.2.1 微波辅助熊果苷酶促乙酰化催化反应 | 第45-46页 |
3.2.2 分析方法 | 第46页 |
3.3 实验设计 | 第46页 |
3.3.1 逐一单因素实验设计 | 第46页 |
3.3.2 Box-Behnken设计 | 第46页 |
3.4 结果和讨论 | 第46-50页 |
3.4.1 微波加热处理对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第46-47页 |
3.4.2 微波功率对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第47-48页 |
3.4.3 微波温度对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第48-49页 |
3.4.4 微波加热时间对熊果苷非水相酶促乙酰化反应的影响 | 第49-50页 |
3.5 Box-Behnken实验设计和响应面法分析 | 第50-52页 |
3.6 CSL酶活的响应面分析 | 第52-54页 |
3.7 验证实验及结果分析 | 第54页 |
3.8 微波加热处理下脂肪酶CSL的可重复性 | 第54-55页 |
3.9 本章小结 | 第55-58页 |
第4章 熊果苷及其酶促衍生物的体外抗氧化作用研究 | 第58-72页 |
4.1 仪器与材料 | 第58-60页 |
4.1.1 主要实验仪器 | 第58-59页 |
4.1.2 实验试剂 | 第59页 |
4.1.3 主要溶液的配制 | 第59-60页 |
4.2 实验方法 | 第60-62页 |
4.2.1 总抗氧化能力的测定方法 | 第60页 |
4.2.2 分光光度法测定清除DPPH自由基 | 第60页 |
4.2.3 分光光度法测定清除ABTS自由基 | 第60-61页 |
4.2.4 铁离子还原能力的测定(FRAP) | 第61页 |
4.2.5 超氧自由基(·O_2~-)的清除能力测定法(邻苯三酚自氧化法) | 第61页 |
4.2.6 油水分配系数溶剂预饱和 | 第61-62页 |
4.2.7 正辛醇/水分配系数的测定方法 | 第62页 |
4.2.8 统计学分析 | 第62页 |
4.3 结果与讨论 | 第62-68页 |
4.3.1 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的总抗氧化能力 | 第62-64页 |
4.3.2 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的DPPH自由基抗氧化性 | 第64-65页 |
4.3.3 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的ABTS·+抗氧化性 | 第65-66页 |
4.3.4 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的铁离子还原能力 | 第66-67页 |
4.3.5 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力 | 第67-68页 |
4.3.6 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷的亲脂性 | 第68页 |
4.4 本章小结 | 第68-72页 |
第5章 熊果苷及其酶促衍生物的体内抗氧化作用研究 | 第72-90页 |
5.1 仪器与材料 | 第72-74页 |
5.1.1 主要实验仪器 | 第72-73页 |
5.1.2 实验试剂 | 第73页 |
5.1.3 主要溶液和培养基的配制 | 第73-74页 |
5.2 实验方法 | 第74-78页 |
5.2.1 线虫的一般培养 | 第74-75页 |
5.2.2 线虫生理表型的观测 | 第75页 |
5.2.3 线虫应激抵抗力的观测 | 第75-77页 |
5.2.4 线虫寿命相关基因的表达分析 | 第77-78页 |
5.2.5 数据处理工具及统计学方法 | 第78页 |
5.3 实验结果 | 第78-87页 |
5.3.1 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫寿命的影响 | 第78-79页 |
5.3.2 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫产卵的影响 | 第79-81页 |
5.3.3 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫运动的影响 | 第81-82页 |
5.3.4 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫热应激抵抗能力的影响 | 第82-83页 |
5.3.5 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫抗化学氧化的影响 | 第83-85页 |
5.3.6 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫抗紫外辐射的影响 | 第85-86页 |
5.3.7 对紫外辐射条件下线虫体内ROS的检测 | 第86页 |
5.3.8 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对线虫衰老相关基因的影响 | 第86-87页 |
5.4 本章小结 | 第87-90页 |
第6章 熊果苷及其酶促衍生物抗肿瘤及作用机理的研究 | 第90-114页 |
6.1 仪器与材料 | 第91-93页 |
6.1.1 主要实验仪器 | 第91页 |
6.1.2 材料与试剂 | 第91-92页 |
6.1.3 实验中涉及的细胞株和实验动物 | 第92页 |
6.1.4 主要溶液的配制 | 第92-93页 |
6.2 实验方法 | 第93-99页 |
6.2.1 细胞复苏 | 第93页 |
6.2.2 细胞培养 | 第93-94页 |
6.2.3 细胞冻存 | 第94页 |
6.2.4 MTT抗癌活性测定 | 第94-95页 |
6.2.5 NaOH裂解法测定黑素含量 | 第95页 |
6.2.6 L-DOPA法测定酪氨酸酶活性 | 第95-96页 |
6.2.7 细胞周期的测定方法 | 第96页 |
6.2.8 细胞凋亡的测定方法 | 第96页 |
6.2.9 线粒体膜电位实验 | 第96-97页 |
6.2.10 western blotting检测细胞凋亡信号通路 | 第97-98页 |
6.2.11 细胞划痕实验的测定方法 | 第98页 |
6.2.12 细胞迁移实验的测定方法 | 第98-99页 |
6.2.13 黑色素瘤小鼠模型的建立和分组处理方法 | 第99页 |
6.2.14 统计学处理 | 第99页 |
6.3 实验结果 | 第99-111页 |
6.3.1 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞形态的影响 | 第99-101页 |
6.3.2 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞增殖的影响 | 第101-103页 |
6.3.3 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞的酪氨酸酶活性抑制率的影响 | 第103-104页 |
6.3.4 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞的黑素含量影响 | 第104-105页 |
6.3.5 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞周期的影响 | 第105-106页 |
6.3.6 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞凋亡的影响 | 第106-107页 |
6.3.7 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞线粒体膜电位的影响 | 第107-108页 |
6.3.8 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞凋亡蛋白Caspase的影响 | 第108-109页 |
6.3.9 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对小鼠B16细胞迁移的影响 | 第109-110页 |
6.3.10 熊果苷及其 6′-乙酰化熊果苷对BALB/c裸鼠体内黑色素瘤增殖的影响 | 第110-111页 |
6.4 本章小结 | 第111-114页 |
第7章 结论与展望 | 第114-118页 |
参考文献 | 第118-134页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第134-136页 |
致谢 | 第136页 |