| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒特征 | 第13-15页 |
| 1.2 PRRSV的感染机制及其受体研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 PRRSV的感染机制 | 第15页 |
| 1.2.2 PRRSV主要受体的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3 细胞型朊蛋白及其功能的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3.1 细胞型朊蛋白 | 第19页 |
| 1.3.2 PrPC调节吞噬作用和炎症反应 | 第19页 |
| 1.3.3 PrPC促进流产布氏杆菌感染巨噬细胞 | 第19-20页 |
| 1.3.4 PrPC是布氏杆菌感染肠道上皮细胞的入侵受体 | 第20页 |
| 1.4 脂筏及其与病原感染关系的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4.1 脂筏 | 第20页 |
| 1.4.2 脂筏与PrPC | 第20页 |
| 1.4.3 脂筏与病毒感染 | 第20-21页 |
| 1.4.4 脂筏在PRRSV感染Marc-145细胞中的作用 | 第21页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 PRRSV青海株的分离鉴定及全基因组测序分析 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1.1 主要实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验所需溶液及其配制 | 第23页 |
| 2.1.4 病料采集与处理 | 第23页 |
| 2.1.5 病毒分离 | 第23-24页 |
| 2.1.6 分离毒株的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.1.7 免疫荧光实验 | 第26页 |
| 2.1.8 电镜观察病毒粒子 | 第26-27页 |
| 2.1.9 TCID50 | 第27-28页 |
| 2.1.10全长扩增引物设计 | 第28页 |
| 2.1.11病毒RNA提取 | 第28页 |
| 2.1.12全基因RT-PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.1.13 PCR产物的回收 | 第29页 |
| 2.1.14纯化PCR产物与T载体的连接及连接产物转化 | 第29页 |
| 2.1.15重组质粒DNA的提取 | 第29页 |
| 2.1.16重组质粒的双酶切鉴定 | 第29页 |
| 2.2 实验结果 | 第29-34页 |
| 2.2.1 病毒分离结果 | 第29-30页 |
| 2.2.2 RT-PCR鉴定结果 | 第30-32页 |
| 2.2.3 免疫荧光实验结果 | 第32页 |
| 2.2.4 电镜结果 | 第32页 |
| 2.2.5 TCID50 | 第32-33页 |
| 2.2.6 病毒全长基因组扩增结果 | 第33-34页 |
| 2.3 讨论分析 | 第34-38页 |
| 2.3.1 不同PRRSV毒株间基因长度差异及同源性分析 | 第34-36页 |
| 2.3.2 ORF1编码的非结构蛋白同源性比较 | 第36页 |
| 2.3.3 NSP2区域变异分析 | 第36-38页 |
| 第三章 PRRSV QH08与其它疫苗毒株对MARC-145的毒力比较 | 第38-45页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.1.1 细胞与毒株 | 第38-39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 PRRSV在Marc-145细胞上的增殖 | 第39页 |
| 3.1.4 PRRSV不同毒株各代次的TCID50 | 第39-40页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第40-45页 |
| 3.2.1 PRRSV不同毒株各代次的TCID50值 | 第40-42页 |
| 3.2.2 PRRSV不同毒株各代次CPE出现的时间 | 第42-43页 |
| 3.2.3 讨论分析 | 第43-45页 |
| 第四章 PRRSV感染MARC-145对细胞型朊蛋白表达影响的研究 | 第45-53页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第45-48页 |
| 4.1.1 细胞培养与试剂 | 第45-46页 |
| 4.1.2 PRRSV的培养病毒滴度测定 | 第46页 |
| 4.1.3 PRRSV RNA提取和cDNA合成 | 第46页 |
| 4.1.4 PRRSV、PrPC和CD163的实时定量PCR | 第46-47页 |
| 4.1.5 流式细胞术分析Marc-145细胞上PrPC、CD163和PRRSV的表达 | 第47-48页 |
| 4.2 实验结果 | 第48-52页 |
| 4.2.1 PRRSV感染Marc-145细胞对PrPC表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.2.2 PRRSV感染Marc-145细胞对CD163表达的影响 | 第49-51页 |
| 4.2.3 PRRSV、PrPC和CD163的关系 | 第51-52页 |
| 4.3 讨论分析 | 第52-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
