| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 苏云金杆菌 | 第10-11页 |
| 1.1.1 杀虫晶体蛋白 | 第10-11页 |
| 1.1.3 Cry蛋白的杀虫作用机理 | 第11页 |
| 1.2 鳞翅目昆虫APN | 第11-14页 |
| 1.2.1 APN的结构特征 | 第11-12页 |
| 1.2.2 APN的分类 | 第12-14页 |
| 1.3 鳞翅目昆虫APN与Bt毒蛋白的结合 | 第14-16页 |
| 1.3.1 APN与Bt毒蛋白结合的特性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 APN与Bt毒蛋白的结合区域 | 第15页 |
| 1.3.3 APN变异与昆虫Bt抗性的关系 | 第15-16页 |
| 1.4 选题依据及目的意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 供试虫源 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基 | 第17页 |
| 2.1.4 试剂及溶液 | 第17-19页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 Bt菌株CYZ-4 对美国白蛾亚致死效应测定 | 第19-20页 |
| 2.2.2 cry2Ab基因的克隆及原核表达 | 第20-22页 |
| 2.2.3 Cry2Ab重组蛋白的镍柱纯化及特异抗体的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.4 美国白蛾氨肽酶N基因的克隆及序列分析 | 第23-25页 |
| 2.2.5 美国白蛾氨肽酶N基因hcapn1的原核表达 | 第25-27页 |
| 2.2.6 Bt毒蛋白与Hc APN1重组蛋白的Ligand blot分析 | 第27-28页 |
| 2.2.7 结构域Hc APN1G，Hc APN1E的克隆表达及特异抗体制备 | 第28-29页 |
| 2.2.8 Cry9Ea6毒蛋白与Hc APN1G，Hc APN1E蛋白的Ligand blot分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-39页 |
| 3.1 Bt菌株CYZ-4 对美国白蛾亚致死效应测定 | 第30-31页 |
| 3.1.1 Bt菌株CYZ-4 对美国白蛾活性及亚致死剂量的确定 | 第30页 |
| 3.1.2 Bt菌株CYZ-4 对美国白蛾生物学特性的影响 | 第30-31页 |
| 3.2 Bt质粒提取分析 | 第31页 |
| 3.3 cry2Ab基因的克隆与序列分析 | 第31-32页 |
| 3.4 cry2Ab33基因的原核表达 | 第32-33页 |
| 3.4.1 重组质粒p ET30a-2Ab33的构建 | 第32-33页 |
| 3.4.2 重组蛋白的诱导表达 | 第33页 |
| 3.5 hcapn1基因的克隆及序列分析 | 第33-35页 |
| 3.6 Hc APN1及Hc APN1G，Hc APN1E重组蛋白的原核表达 | 第35-37页 |
| 3.6.1 原核重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.6.2 重组质粒的原核表达 | 第36-37页 |
| 3.7 Cry1Ac，Cry9Ea6毒蛋白对美国白蛾的活性测定 | 第37页 |
| 3.8 Bt毒蛋白与Hc APN1的Ligand blot分析 | 第37-39页 |
| 3.8.1 Bt毒蛋白的消化 | 第37-38页 |
| 3.8.2 Bt毒蛋白和Hc APN1重组蛋白，Hc APN1G，Hc APN1E的Ligand blot分析 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 附录 | 第47-48页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
