| 摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第18-42页 |
| 1.1 miRNA概述 | 第18-30页 |
| 1.1.1 miRNA的定义 | 第18-20页 |
| 1.1.2 miRNA的产生与进化 | 第20-26页 |
| 1.1.3 miRNA的调控与功能 | 第26-30页 |
| 1.2 miRNA在机体环境胁迫应答中的作用机制 | 第30-35页 |
| 1.2.1 miRNA在生物胁迫应答中的调控作用 | 第30-34页 |
| 1.2.2 miRNA在非生物胁迫应答中的调控作用 | 第34-35页 |
| 1.3 无脊椎动物miRNA及其调控机制的研究进展 | 第35-39页 |
| 1.3.1 无脊椎动物miRNA的组成与功能 | 第35-37页 |
| 1.3.2 无脊椎动物miRNA在环境胁迫应答中的作用 | 第37-39页 |
| 1.4 本研究目的及意义 | 第39-42页 |
| 第二章 材料与方法 | 第42-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第42-48页 |
| 2.1.1 实验动物、菌株和细胞 | 第42页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第42-44页 |
| 2.1.3 miRNA及引物信息 | 第44-47页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-60页 |
| 2.2.1 长牡蛎神经递质刺激实验 | 第48页 |
| 2.2.2 长牡蛎病原刺激实验 | 第48-49页 |
| 2.2.3 长牡蛎干露胁迫实验 | 第49页 |
| 2.2.4 长牡蛎血淋巴细胞原代培养及刺激实验 | 第49页 |
| 2.2.5 总miRNA、mRNA提取及cDNA合成 | 第49-50页 |
| 2.2.6 miRNA鉴定及表达分析 | 第50-51页 |
| 2.2.7 miRNA靶基因预测及注释 | 第51页 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR检测miRNA及基因表达 | 第51-52页 |
| 2.2.9 长牡蛎蛋白提取及Western Blot实验 | 第52页 |
| 2.2.10 基因克隆与序列分析 | 第52-53页 |
| 2.2.11 HEK293T细胞培养及转染实验 | 第53页 |
| 2.2.12 双荧光素酶报告基因实验 | 第53-54页 |
| 2.2.13 长牡蛎miRNA过表达及敲减实验 | 第54-56页 |
| 2.2.14 长牡蛎基因干扰实验 | 第56页 |
| 2.2.15 长牡蛎血淋巴细胞迁移能力测定 | 第56页 |
| 2.2.16 长牡蛎血淋巴细胞吞噬能力测定 | 第56-57页 |
| 2.2.17 长牡蛎血淋巴细胞凋亡水平测定 | 第57页 |
| 2.2.18 长牡蛎血淋巴胆碱及ACh测定 | 第57-58页 |
| 2.2.19 长牡蛎血淋巴细胞抑菌能力测定 | 第58页 |
| 2.2.20 长牡蛎血淋巴细胞内Ca2+测定 | 第58页 |
| 2.2.21 长牡蛎血淋巴NOS及NO测定 | 第58-59页 |
| 2.2.22 长牡蛎组织切片及HE染色 | 第59-60页 |
| 第三章 结果 | 第60-142页 |
| 3.1 长牡蛎miRNA的鉴定及在神经递质刺激中的应答模式 | 第60-74页 |
| 3.1.1 长牡蛎血淋巴miRNA的鉴定 | 第60-66页 |
| 3.1.2 长牡蛎miRNA在神经递质刺激中的应答模式 | 第66-74页 |
| 3.2 长牡蛎病原菌胁迫相关miRNA的鉴定及功能分析 | 第74-112页 |
| 3.2.1 cgi-miR-92d在细胞因子免疫响应中的调控作用 | 第74-80页 |
| 3.2.2 scaffold42648_5080 在血淋巴细胞迁移中的调控作用 | 第80-91页 |
| 3.2.3 cgi-miR-2d在病原吞噬中的调控作用 | 第91-100页 |
| 3.2.4 cgi-miR-2d在胆碱能系统与免疫系统互作中的调控作用 | 第100-112页 |
| 3.3 长牡蛎干露胁迫相关miRNA的鉴定及功能分析 | 第112-142页 |
| 3.3.1 cgi-miR-365 的表达激活及对热休克蛋白的调控作用 | 第112-120页 |
| 3.3.2 多个miRNA在一氧化氮的合成及及炎症反应中的协同作用 | 第120-142页 |
| 第四章 讨论 | 第142-166页 |
| 4.1 长牡蛎miRNA调控神经内分泌免疫调节网络 | 第142-146页 |
| 4.1.1 长牡蛎miRNA组成及分子特征 | 第142-144页 |
| 4.1.2 长牡蛎miRNA介导了复杂的神经内分泌免疫调节作用 | 第144-146页 |
| 4.2 长牡蛎miRNA调控免疫应答反应 | 第146-157页 |
| 4.2.1 cgi-miR-92d抑制细胞因子CgTNF表达 | 第146-148页 |
| 4.2.2 scaffold42648_5080 调控血淋巴细胞迁移 | 第148-151页 |
| 4.2.3 cgi-miR-2d促进血淋巴细胞吞噬作用 | 第151-154页 |
| 4.2.4 cgi-miR-2d抑制通过介导胆碱能系统的激活调控免疫应答 | 第154-157页 |
| 4.3 长牡蛎miRNA调控干露胁迫应答 | 第157-166页 |
| 4.3.1 cgi-miR-365 直接诱导CgHSP90基因表达 | 第157-160页 |
| 4.3.2 多个miRNA协同调控CaM/NOS通路抑制炎症反应 | 第160-166页 |
| 第五章 结论与展望 | 第166-170页 |
| 5.1 结论 | 第166-168页 |
| 5.2 展望 | 第168-170页 |
| 参考文献 | 第170-200页 |
| 致谢 | 第200-202页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第202-203页 |
