摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 ENR概述 | 第13-15页 |
1.1.1 ENR的应用 | 第13-14页 |
1.1.2 ENR的毒副作用 | 第14-15页 |
1.2 ENR残留检测方法 | 第15-17页 |
1.3 ENR的样品前处理方法 | 第17-18页 |
1.4 免疫亲和色谱技术 | 第18-21页 |
1.4.1 IAC柱的性能 | 第18页 |
1.4.2 IAC柱的应用 | 第18-20页 |
1.4.3 IAC柱的载体选择 | 第20-21页 |
1.5 立题依据与意义 | 第21-22页 |
1.6 论文的主要研究内容 | 第22-23页 |
第二章 ENR完全抗原的制备与鉴定 | 第23-33页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 试剂与仪器 | 第23-25页 |
2.2.1 试剂 | 第23-24页 |
2.2.2 溶液的配制 | 第24页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.2.4 实验动物 | 第25页 |
2.3 试验方法 | 第25-28页 |
2.3.1 ENR完全抗原的制备 | 第25-26页 |
2.3.2 ENR完全抗原的理化鉴定 | 第26-27页 |
2.3.3 ENR完全抗原的免疫原性鉴定 | 第27-28页 |
2.4 结果与讨论 | 第28-32页 |
2.4.1 完全抗原的FT-IR光谱扫描鉴定 | 第28-29页 |
2.4.2 完全抗原的紫外光谱扫描鉴定 | 第29-30页 |
2.4.3 完全抗原的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第30-31页 |
2.4.4 免疫血清效价的测定 | 第31-32页 |
2.4.5 免疫血清IC50值的测定 | 第32页 |
2.5 本章小结 | 第32-33页 |
第三章 ENR多克隆抗体的制备与鉴定 | 第33-46页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 试剂与仪器 | 第33-35页 |
3.2.1 主要试剂 | 第33-34页 |
3.2.2 相关溶液的配制 | 第34页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
3.2.4 实验动物 | 第35页 |
3.3 试验方法 | 第35-39页 |
3.3.1 免疫原溶液的配制 | 第35页 |
3.3.2 ENR-BSA免疫动物 | 第35-36页 |
3.3.3 抗血清的制备和保存 | 第36页 |
3.3.4 抗血清的纯化和保存 | 第36-37页 |
3.3.5 纯化后多克隆抗体的蛋白含量测定 | 第37页 |
3.3.6 纯化后多克隆抗体的纯度测定 | 第37页 |
3.3.7 多克隆抗体的效价和抗体工作浓度的测定 | 第37-38页 |
3.3.8 ENR对多克隆抗体的抑制曲线及半数抑制浓度IC50的测定 | 第38页 |
3.3.9 多克隆抗体的特异性测定 | 第38-39页 |
3.4 结果与讨论 | 第39-44页 |
3.4.1 动物免疫与检测 | 第39-41页 |
3.4.2 多克隆抗体的纯化 | 第41-42页 |
3.4.3 包被原和多克隆抗体工作浓度的确定 | 第42-43页 |
3.4.4 多克隆抗体的抑制曲线及半数抑制浓度IC50的测定 | 第43-44页 |
3.4.5 多克隆抗体的特异性测定 | 第44页 |
3.5 本章小结 | 第44-46页 |
第四章 以壳聚糖为载体ENR多克隆抗体IAC柱的研制 | 第46-61页 |
4.1 引言 | 第46页 |
4.2 试剂与仪器 | 第46-47页 |
4.2.1 主要试剂 | 第46-47页 |
4.2.2 相关溶液的配制 | 第47页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第47页 |
4.3 试验方法 | 第47-51页 |
4.3.1 免疫亲和吸附剂的制备 | 第47-48页 |
4.3.2 壳聚糖微球的电镜分析 | 第48页 |
4.3.3 免疫亲和吸附剂偶联率的测定 | 第48页 |
4.3.4 以壳聚糖为载体ENR多克隆抗体IAC柱评价方法的建立 | 第48页 |
4.3.5 以壳聚糖为载体ENR多克隆抗体IAC柱使用方法的优化 | 第48-49页 |
4.3.6 以壳聚糖为载体ENR多克隆抗体IAC柱的性能评价 | 第49-50页 |
4.3.7 以壳聚糖为载体ENR多克隆抗体IAC柱的实际应用 | 第50-51页 |
4.4 结果与分析 | 第51-60页 |
4.4.1 壳聚糖微球的电镜分析 | 第51页 |
4.4.2 免疫亲和吸附剂偶联率的测定 | 第51-52页 |
4.4.3 间接竞争ELSIA(ic ELISA)评价方法的建立 | 第52-53页 |
4.4.4 HPLC标准曲线 | 第53-54页 |
4.4.5 最佳上样溶液的选择 | 第54-55页 |
4.4.6 最佳洗脱溶液种类的选择 | 第55页 |
4.4.7 最佳洗脱溶液体积的选择 | 第55-56页 |
4.4.8 IAC柱的柱容量测定 | 第56-57页 |
4.4.9 IAC柱之间的重复性 | 第57页 |
4.4.10 IAC柱的重复使用性 | 第57-59页 |
4.4.11 IAC柱的特异性吸附 | 第59页 |
4.4.12 以壳聚糖为载体的ENR多克隆抗体IAC柱在实际样品中的应用 | 第59-60页 |
4.5 本章小结 | 第60-61页 |
第五章 主要结论与展望 | 第61-63页 |
5.1 主要结论 | 第61页 |
5.2 工作展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
在读学位期间发表的论文 | 第77页 |