水稻OsBRI1基因启动子的克隆及功能分析
| 常见缩略词 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| 1.1 油菜素甾醇概述 | 第11-12页 |
| 1.2 BRI1蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 BRs的信号转导机制概述 | 第14-16页 |
| 1.4 BR调节水稻的农艺性状 | 第16-20页 |
| 1.4.1 株高 | 第16页 |
| 1.4.2 叶角 | 第16-17页 |
| 1.4.3 分蘖数 | 第17-18页 |
| 1.4.4 应激反应 | 第18-19页 |
| 1.4.5 籽粒大小 | 第19页 |
| 1.4.6 干物质及籽粒产量 | 第19-20页 |
| 1.5 植物启动子概述 | 第20-25页 |
| 1.5.1 启动子结构 | 第21-22页 |
| 1.5.2 启动子类型 | 第22-24页 |
| 1.5.3 启动子的克隆方法 | 第24页 |
| 1.5.4 启动子的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 1.5.5 启动子表达模式及强度分析方法 | 第25页 |
| 1.6 立题依据和研究意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-41页 |
| 2.1 试验材料和试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 植物生长环境 | 第26页 |
| 2.1.3 菌株及质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.4 试剂药品 | 第27页 |
| 2.1.5 试验所需仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.6 生物信息学数据库及软件 | 第28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-41页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.2.1.1 BRI1蛋白序列分析 | 第28-29页 |
| 2.2.1.2 BRI1基因启动子区序列分析 | 第29页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第29页 |
| 2.2.3 启动子克隆 | 第29-35页 |
| 2.2.3.1 水稻日本晴DNA提取 | 第29页 |
| 2.2.3.2 目的片段的获得 | 第29-30页 |
| 2.2.3.3 PCR产物目的DNA片段回收 | 第30-31页 |
| 2.2.3.4 DNA片段与克隆载体连接 | 第31-32页 |
| 2.2.3.5 感受态细胞的制备、转化及鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2.3.6 质粒DNA的抽提 | 第34页 |
| 2.2.3.7 克隆片段的序列测定 | 第34-35页 |
| 2.2.4 水稻OsBRI1基因启动子序列分析 | 第35页 |
| 2.2.5 植物表达载体的构建 | 第35-38页 |
| 2.2.5.1 克隆载体及表达载体的双酶切及回收 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 目的片段与表达载体连接 | 第36-37页 |
| 2.2.5.3 根癌农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第37-38页 |
| 2.2.6 拟南芥的遗传转化及转基因植株的鉴定 | 第38-41页 |
| 2.2.6.1 拟南芥种子的处理 | 第38-39页 |
| 2.2.6.2 农杆菌介导的拟南芥浸花转化法 | 第39页 |
| 2.2.6.3 转基因植株的筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.6.4 转基因植株DNA水平的检测 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-54页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第41-47页 |
| 3.1.1 BRI1蛋白序列分析 | 第41-45页 |
| 3.1.2 BRI1基因启动子序列分析 | 第45-47页 |
| 3.2 水稻OsBRI1基因启动子克隆 | 第47-48页 |
| 3.3 水稻OsBRI1基因启动子序列分析 | 第48-50页 |
| 3.4 植物表达载体构建 | 第50-51页 |
| 3.5 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第51-53页 |
| 3.6 水稻OsBRI1基因启动子的活性分析 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 生物信息学分析 | 第54页 |
| 4.2 水稻OsBRI1基因启动子的序列扩增 | 第54页 |
| 4.3 水稻OsBRI1基因启动子的序列分析 | 第54-56页 |
| 4.4 水稻OsBRI1基因启动子的活性分析 | 第56页 |
| 4.5 GUS作为报告基因的优缺点 | 第56-57页 |
| 4.6 进一步研究设想 | 第57页 |
| 5 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第72页 |
