| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 水稻稻瘟病 | 第11页 |
| 1.2 稻瘟病菌的侵染循环过程 | 第11-12页 |
| 1.3 泛素和泛素化作用 | 第12页 |
| 1.4 去泛素化的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.4.1 去泛素化作用 | 第12-13页 |
| 1.4.2 去泛素化酶 | 第13-16页 |
| 1.4.2.1 泛素特异性蛋白酶UBP家族 | 第15页 |
| 1.4.2.2 泛素羧基末端水解酶(UCH) | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的主要意义 | 第16-17页 |
| 2 材料方法 | 第17-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 供试植物 | 第17页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第17页 |
| 2.1.4 培养基 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第18页 |
| 2.2 生物信息学分析方法 | 第18页 |
| 2.3 试验方法 | 第18-28页 |
| 2.3.2 稻瘟病菌核酸的提取 | 第18-20页 |
| 2.3.2.1 稻瘟病菌DNA的粗提取 | 第18-19页 |
| 2.3.2.2 稻瘟病菌CTAB法精提DNA | 第19页 |
| 2.3.2.3 稻瘟病菌RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.3.3 PCR反应 | 第20-23页 |
| 2.3.3.1 普通PCR反应 | 第20页 |
| 2.3.3.2 反转录PCR | 第20-21页 |
| 2.3.3.3 荧光实时定量PCR | 第21-22页 |
| 2.3.3.4 重叠延伸PCR | 第22-23页 |
| 2.3.4 原生质体的制备与转化 | 第23页 |
| 2.3.5 载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.3.5.1 细菌转化和转化子的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.5.2 酶切反应与连接反应 | 第24页 |
| 2.3.6 突变体基本表型的分析 | 第24-28页 |
| 2.3.6.1 菌落的生长与形态观察 | 第24-25页 |
| 2.3.6.2 产孢量测定 | 第25页 |
| 2.3.6.3 分生孢子梗的观察 | 第25页 |
| 2.3.6.4 分生孢子萌发实验 | 第25页 |
| 2.3.6.5 分生孢子隔膜的观察 | 第25页 |
| 2.3.6.6 大麦接种实验 | 第25页 |
| 2.3.6.7 水稻喷雾接种实验 | 第25-26页 |
| 2.3.6.8 水稻造伤接种实验 | 第26页 |
| 2.3.6.9 洋葱表皮侵染实验 | 第26页 |
| 2.3.6.10 大麦表皮侵染实验 | 第26页 |
| 2.3.6.11 敏感性测定 | 第26-27页 |
| 2.3.6.12 不同单一碳源培养基菌落生长形态观察 | 第27页 |
| 2.3.6.13 混合碳源培养基菌落生长形态观察 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-45页 |
| 3.1 生物信息学分析结果 | 第28-31页 |
| 3.1.1 稻瘟病菌Moubp1结构域及氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
| 3.1.2 稻瘟病菌Moubp1的系统进化分析 | 第29-31页 |
| 3.2 基因Moubp1缺失突变体及互补菌株的获得 | 第31-32页 |
| 3.3 稻瘟病菌Moubp1的功能分析 | 第32-45页 |
| 3.3.1 菌落生长形态观察 | 第32-33页 |
| 3.3.2 产孢量统计及分生孢子梗观察 | 第33-34页 |
| 3.3.3 孢子形态观察分析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 分生孢子的萌发及附着胞形成能力 | 第35-36页 |
| 3.3.5 致病性试验 | 第36-37页 |
| 3.3.6 洋葱表皮侵染 | 第37-39页 |
| 3.3.7 大麦表皮侵染 | 第39-40页 |
| 3.3.8 黑色素合成相关基因的表达量测定 | 第40页 |
| 3.3.9 敏感性分析 | 第40-41页 |
| 3.3.10 亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 3.3.11 不同碳源培养基的菌落生长形态观察分析 | 第42-45页 |
| 4 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 4.1 生物信息学分析 | 第45页 |
| 4.2 突变体的表型性分析 | 第45-47页 |
| 4.2.1 Moubp1参与稻瘟病菌营养生长和黑色素形成 | 第45页 |
| 4.2.2 Moubp1参与稻瘟病菌孢子形成发育 | 第45页 |
| 4.2.3 Moubp1对稻瘟病菌的致病性有重要作用 | 第45-46页 |
| 4.2.4 Moubp1影响稻瘟病菌对碳源的利用 | 第46-47页 |
| 5 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
