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印尼热泉菌Bacillus sp. Car19产热稳定κ-卡拉胶酶的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-25页
    1.1 卡拉胶简介第12-14页
    1.2 卡拉胶的应用第14-15页
    1.3 卡拉胶生理活性研究进展第15-16页
        1.3.1 抗肿瘤活性第15页
        1.3.2 抗病毒活性第15页
        1.3.3 抗凝血活性第15-16页
        1.3.4 治疗胃及肠道消化性溃疡第16页
    1.4 卡拉胶寡糖活性研究进展第16-18页
        1.4.1 抗病毒活性第17页
        1.4.2 抗肿瘤活性第17-18页
        1.4.3 抗氧化活性第18页
        1.4.4 抑制血管生成第18页
    1.5 卡拉胶寡糖制备方法简介第18-20页
        1.5.1 物理法裂解第19页
        1.5.2 化学法降解第19页
        1.5.3 酶法降解第19-20页
    1.6 卡拉胶寡糖分离纯化方法简介第20页
    1.7 卡拉胶酶简介第20-23页
        1.7.1 κ-卡拉胶酶第21-22页
        1.7.2 ι-卡拉胶酶第22-23页
        1.7.3 λ-卡拉胶酶简介第23页
    1.8 卡拉胶酶的应用第23-25页
        1.8.1 卡拉胶酶在抗肿瘤方面的应用第23页
        1.8.2 卡拉胶酶在藻类生物乙醇制备方面的应用第23-24页
        1.8.3 卡拉胶酶作为清洁剂的添加剂第24页
        1.8.4 卡拉胶酶用于藻类原生质体的分离和制备第24-25页
第2章 印尼热泉样品产κ-卡拉胶酶菌株的筛选及多样性分析第25-34页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 样品采集第25页
        2.1.2 主要试剂第25页
        2.1.3 培养基第25页
        2.1.4 配比试剂第25-26页
        2.1.5 实验所用仪器第26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 富集培养第26页
        2.2.2 对富集培养液进行初筛第26页
        2.2.3 卢戈氏碘液染色法进行复筛第26-27页
        2.2.4 卡拉胶酶活性菌株16SrRNA基因鉴定第27页
        2.2.5 卡拉胶酶活性菌株系统发育树的构建第27页
        2.2.6 卡拉胶酶活力测定——DNS法第27-30页
    2.3 实验结果与分析第30-32页
        2.3.1 卡拉胶酶活性菌株的初筛与复筛第30-31页
        2.3.2 DNS法测定酶活第31页
        2.3.3 产卡拉胶酶活性菌株的系统发育分析第31-32页
    2.4 讨论第32-33页
    2.5 小结第33-34页
第3章 卡拉胶酶产生菌Bacillus sp. Car19的发酵条件优化第34-50页
    3.1 实验材料第34-35页
        3.1.1 实验菌株第34页
        3.1.2 实验试剂第34页
        3.1.3 主要仪器第34-35页
        3.1.4 培养基第35页
    3.2 实验方法第35-40页
        3.2.1 Bacillus sp. Car19种子液的培养第35页
        3.2.2 Bacillus sp. Car19的发酵条件优化第35-40页
    3.3 结果与分析第40-48页
        3.3.1 单因素实验结果第40-43页
        3.3.2 Plackett-Burman实验确定影响Bacillus sp. Car19产酶量的主要因素第43-44页
        3.3.3 最陡爬坡实验结果第44页
        3.3.4 响应面Box-Behnken法获得最优发酵条件结果第44-48页
    3.4 讨论第48页
    3.5 小结第48-50页
第4章 Bacillus sp. Car19产卡拉胶酶的分离纯化及酶学性质研究第50-65页
    4.1 实验材料第50-51页
        4.1.1 菌种与培养基第50页
        4.1.2 主要试剂第50-51页
        4.1.3 主要仪器第51页
    4.2 实验方法第51-55页
        4.2.1 粗酶粉的制备第51页
        4.2.2 蛋白含量的测定第51-52页
        4.2.3 洗脱液的活性追踪第52页
        4.2.4 卡拉胶酶的分离纯化第52-53页
        4.2.5 SDS-PAGE电泳第53-54页
        4.2.6 卡拉胶酶酶学性质研究第54-55页
    4.3 结果与分析第55-63页
        4.3.1 卡拉胶酶的分离纯化第55-57页
        4.3.2 SDS-PAGE电泳确定卡拉胶酶纯度和分子量第57-58页
        4.3.3 酶学性质研究第58-63页
    4.4 讨论第63-64页
    4.5 小结第64-65页
第5章 卡拉胶寡糖促生抗病实验第65-74页
    5.1 实验材料第65-66页
        5.1.1 菌种与培养基第65-66页
        5.1.2 主要试剂和材料第66页
        5.1.3 主要仪器第66页
    5.2 实验方法第66-69页
        5.2.1 卡拉胶寡糖的制备第66-67页
        5.2.2 卡拉胶寡糖对小麦种子萌发作用试验第67页
        5.2.3 卡拉寡糖抗病毒病小区试验第67-68页
        5.2.4 卡拉寡糖对黄瓜白粉病防治试验第68-69页
    5.3 结果与分析第69-73页
        5.3.1 卡拉胶寡糖的制备第69页
        5.3.2 卡拉胶寡糖对小麦种子萌发作用试验第69-70页
        5.3.3 卡拉寡糖抗病毒病小区试验第70-71页
        5.3.4 卡拉寡糖对黄瓜白粉病防治试验第71-73页
    5.4 讨论第73页
    5.5 小结第73-74页
第6章 总结与展望第74-77页
    6.1 总结第74-75页
    6.2 展望第75-77页
参考文献第77-84页
致谢第84-85页
硕士期间研究成果第85页

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