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氧氟沙星噬菌体抗体库构建及筛选

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-19页
   ·兽药残留概述第8-9页
     ·兽药残留的原因第8页
     ·动物性食品中兽药残留的危害第8-9页
     ·兽药残留监测监控状况第9页
   ·动物性食品中喹诺酮类药物残留第9-11页
     ·喹诺酮类药物概述第9-10页
     ·喹诺酮类药物的理化特性第10-11页
     ·喹诺酮类药物残留的危害第11页
   ·喹诺酮类药物残留检测研究进展第11-14页
     ·微生物检测法第11-12页
     ·免疫分析法(IAs)第12页
     ·色谱法第12-13页
     ·液-质联用法第13页
     ·高效毛细管电泳分析法第13-14页
   ·氧氟沙星概述第14页
   ·基因工程抗体第14-15页
     ·抗体简介第14-15页
     ·基因工程抗体第15页
   ·噬菌体抗体库技术第15-18页
     ·噬菌体抗体库技术简介第15-16页
     ·噬菌体抗体库技术原理第16页
     ·根据噬菌体载体的类型分类第16页
     ·噬菌体抗体库技术的优点第16-17页
     ·噬菌体抗体库技术的应用及其研究进展第17-18页
   ·论文研究的目的及意义第18-19页
2 材料与方法第19-40页
   ·实验材料第19-25页
     ·实验所用的单克隆抗体细胞及菌种第19页
     ·实验所用的工具酶、抗生素和载体第19页
     ·实验所需试剂第19-21页
     ·实验所用试剂盒第21页
     ·实验所用仪器第21-22页
     ·PCR扩增所用的引物第22-24页
     ·主要溶液和培养基的配置方法第24-25页
   ·实验方法第25-40页
     ·提取氧氟沙星单克隆细胞的总RNA第25-27页
     ·cDNA第一链的合成第27-28页
     ·单链抗体基因片段扩增第28-29页
     ·重叠延伸PCR第29-30页
     ·抗体库构建第30-33页
     ·抗体库淘选第33-35页
     ·淘选后噬菌体的ELISA筛选第35页
     ·筛选后噬菌体scFv基因克隆第35-40页
3 实验结果与分析第40-48页
   ·氧氟沙星单克隆抗体细胞总RNA的提取第40页
   ·氧氟沙星重链V_H基因和轻链V_L基因片段的扩增第40-41页
   ·氧氟沙星单抗细胞scFv片段的扩增第41页
   ·噬菌体单链抗体库的构建第41-42页
   ·原始抗体库质量检测第42-43页
   ·噬菌体抗体库的淘选及PCR验证第43-45页
     ·淘选第43-44页
     ·淘选之后的PCR验证第44-45页
   ·淘选后噬菌体的ELISA筛选第45页
   ·对筛选后的重组scFv基因克隆第45-46页
   ·质粒PCR与酶切验证第46-47页
   ·测序第47-48页
4 结论第48-49页
5 展望第49-50页
6 参考文献第50-57页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第57-58页
8 致谢第58页

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