玉米Rubisco活化酶基因的克隆与表达分析
| 符号说明 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-14页 |
| ·RCA的分子特性 | 第9-10页 |
| ·RCA亚基构成及产生机制 | 第9-10页 |
| ·RCA基因表达 | 第10页 |
| ·RCA活性调控 | 第10页 |
| ·RCA与Rubisco作用机制 | 第10-12页 |
| ·RCA与植物光合作用和产量的关系 | 第12-13页 |
| ·调节植物光合作用 | 第12页 |
| ·调节作物的产量 | 第12-13页 |
| ·高温条件下RCA的作用及响应 | 第13-14页 |
| ·RCA调节植物耐高温逆境 | 第13页 |
| ·高温引起RCA变化 | 第13-14页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第14页 |
| 2. 材料与方法 | 第14-24页 |
| ·试验材料 | 第14页 |
| ·本实验用到的引物 | 第14-16页 |
| ·基因克隆 | 第16-18页 |
| ·序列检索 | 第16页 |
| ·总RNA提取 | 第16页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增 | 第17页 |
| ·PCR产物纯化 | 第17-18页 |
| ·PCR产物克隆 | 第18页 |
| ·质粒小量制备 | 第18页 |
| ·序列分析 | 第18页 |
| ·叶片蛋白提取及RCA蛋白纯化 | 第18-19页 |
| ·原核表达及重组蛋白纯化 | 第19-20页 |
| ·Western blot分析 | 第20-21页 |
| ·MALDI-TOF/TOF分析 | 第21页 |
| ·亚细胞定位 | 第21-22页 |
| ·基因表达量测定 | 第22-23页 |
| ·实验样品采集 | 第23-24页 |
| ·单株产量测定 | 第24页 |
| ·数据统计分析 | 第24页 |
| 3. 结果与分析 | 第24-41页 |
| ·玉米RCA基因的克隆与序列分析 | 第24-29页 |
| ·玉米自交系总RNA的提取与cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·玉米RCA基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·序列分析 | 第26-29页 |
| ·RCA蛋白体外表达分析 | 第29-32页 |
| ·RCA基因原核表达 | 第29页 |
| ·原核表达产物分析 | 第29-32页 |
| ·玉米叶片RCA蛋白分析 | 第32页 |
| ·RCA亚细胞定位 | 第32-34页 |
| ·载体构建 | 第32-33页 |
| ·目标蛋白的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| ·扩增效率分析 | 第34-35页 |
| ·RCA基因表达模式分析 | 第35-40页 |
| ·组织表达分析 | 第35-36页 |
| ·昼夜表达变化规律 | 第36-38页 |
| ·不同生育时期的表达特性 | 第38-39页 |
| ·RCA基因逆境表达分析 | 第39-40页 |
| ·玉米RCA基因与产量之间关系 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-44页 |
| ·玉米Zmrca1、Zmrca3基因编码机制 | 第41-42页 |
| ·玉米RCA基因的进化 | 第42-43页 |
| ·玉米RCA基因表达特性 | 第43页 |
| ·玉米RCA基因与产量之间的关系 | 第43-44页 |
| 5. 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
