| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-49页 |
| ·DNA损伤 | 第15页 |
| ·DNA损伤修复 | 第15-17页 |
| ·DNA烷基化损伤 | 第17-21页 |
| ·DNA烷基化简介 | 第17-19页 |
| ·烷基化DNA损伤的修复 | 第19-21页 |
| ·AlkB蛋白的研究 | 第21-28页 |
| ·AlkB的发现以及功能 | 第21-22页 |
| ·AlkB同源蛋白的研究 | 第22-23页 |
| ·人AlkB家族蛋白的研究 | 第23页 |
| ·AlkB同源蛋白的保守特性 | 第23-25页 |
| ·AlkB家族的蛋白的生物学功能研究 | 第25-28页 |
| ·rDNA转录 | 第28-35页 |
| ·核仁结构以及相关蛋白 | 第28-31页 |
| ·Pol Ⅰ介导的rDNA转录 | 第31-32页 |
| ·rDNA转录相关蛋白的研究 | 第32-34页 |
| ·Ku70在rDNA转录中的作用 | 第34-35页 |
| ·表观遗传学简介 | 第35-44页 |
| ·组蛋白甲基化修饰 | 第36-40页 |
| ·DNA甲基化 | 第40-44页 |
| ·组蛋白甲基化与DNA甲基化的联系 | 第44页 |
| ·UHRF1与表观遗传调控 | 第44-49页 |
| ·UHRF1介绍 | 第45-46页 |
| ·UHRF1与癌症 | 第46-47页 |
| ·UHRF家族成员UHRF2 | 第47-49页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第49-73页 |
| ·实验材料 | 第49-51页 |
| ·质粒 | 第49页 |
| ·抗体 | 第49-50页 |
| ·细胞 | 第50页 |
| ·酶类 | 第50页 |
| ·组蛋白多肽 | 第50页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-73页 |
| ·质粒构建一般过程 | 第51-54页 |
| ·GST融合蛋白的表达与纯化 | 第54-55页 |
| ·GST pull-down实验 | 第55页 |
| ·Histone peptide pull-down实验 | 第55-56页 |
| ·从293T细胞中纯化Flag标签的目的蛋白 | 第56页 |
| ·体外DNA甲基转移酶酶活检测 | 第56-58页 |
| ·体内DNA甲基转移酶酶活检测 | 第58-59页 |
| ·HPLC检测基因组DNA整体甲基化水平 | 第59-61页 |
| ·稳定细胞株的建立 | 第61-62页 |
| ·染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第62-63页 |
| ·免疫荧光(IF) | 第63-64页 |
| ·293T细胞中ABH2复合体的分离及鉴定 | 第64-65页 |
| ·MTS细胞存活力分析 | 第65页 |
| ·荧光素酶报告基因检测ABH2的转录活性 | 第65-66页 |
| ·BrUTP标记活细胞rRNA及免疫染色 | 第66-67页 |
| ·免疫共沉淀反应 | 第67页 |
| ·细胞总RNA的抽提 | 第67-68页 |
| ·RT-PCR | 第68页 |
| ·流式细胞周期分析 | 第68-69页 |
| ·体内泛素化分析 | 第69页 |
| ·从昆虫细胞中分离纯化目的蛋白 | 第69-73页 |
| 第三章 ABH2在rDNA转录中的调控研究 | 第73-101页 |
| ·引言 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-98页 |
| ·人源alkB蛋白的细胞定位 | 第74-75页 |
| ·ABH2的核仁定位以及其定位信号的确定 | 第75-76页 |
| ·ABH2核仁定位信号的鉴定 | 第76-77页 |
| ·ABH2核仁定位依赖rRNA的合成 | 第77-78页 |
| ·ABH2结合蛋白的分离纯化、鉴定和验证 | 第78-83页 |
| ·ABH2具有转录调控的功能 | 第83-85页 |
| ·ABH2激活细胞内rDNA转录 | 第85-87页 |
| ·下调ABH2表达影响细胞增殖 | 第87-88页 |
| ·ABH2结合rDNA启动子 | 第88-89页 |
| ·ABH2表达下调引起DNA损伤 | 第89-92页 |
| ·ABH2表达下调引起rDNA的DNA损伤 | 第92-94页 |
| ·ABH2特异相应DNA烷基化损伤 | 第94-98页 |
| ·讨论 | 第98-101页 |
| 第四章 UHRF1与UHRF2在DNA甲基化中的功能研究 | 第101-128页 |
| ·引言 | 第101-102页 |
| ·实验结果 | 第102-125页 |
| ·UHRF1与UHRF2识别和结合H3K9me和半甲基化DNA | 第102-104页 |
| ·UHRF2与UHRF1野生型及其缺失突变体在细胞中的定位 | 第104-105页 |
| ·UHRF2与UHRF1在DNA甲基化中的作用 | 第105-108页 |
| ·UHRF2影响DNMT3a/3b介导的起始性DNA甲基化 | 第108-109页 |
| ·UHRF2和UHRF1对DNMTs酶活的影响 | 第109-112页 |
| ·UHRF2和UHRF1与DNA甲基转移酶之间的相互作用 | 第112-114页 |
| ·UHRF2与DNMT3a相互作用区域的鉴定 | 第114-115页 |
| ·UHRF2介导DNMT3a的降解 | 第115-117页 |
| ·TD点突变体和SRA点突变体表观遗传修饰结合能力的鉴定 | 第117-120页 |
| ·UHRF1及突变体对Np95-/-整体DNA甲基化水平的影响 | 第120-121页 |
| ·SRA结构域介导的碱基“翻转”对DNA甲基化的影响 | 第121-125页 |
| ·实验结果讨论 | 第125-128页 |
| ·UHRF2与UHRF1具有相似的结合特性 | 第125-126页 |
| ·UHRF2与UHRF1在DNA甲基化中具有不一样的功能 | 第126-127页 |
| ·UHRF1结合H3K9me以及SRA在DNA甲基化维持中的作用 | 第127-128页 |
| 缩略语 | 第128-130页 |
| 附录：部分引物列表 | 第130-133页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
