| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要符号表 | 第7-11页 |
| 1.文献综述 | 第11-20页 |
| ·假基因的发现 | 第11-12页 |
| ·、假基因的命名方式与分类标准 | 第12-13页 |
| ·假基因的命名方法 | 第12页 |
| ·假基因的分类标准 | 第12-13页 |
| ·假基因的确定 | 第13-15页 |
| ·假基因的特性和分布特点 | 第14-15页 |
| ·假基因的特性 | 第14页 |
| ·假基因的分布特点 | 第14-15页 |
| ·假基因的生物功能与医学应用 | 第15-17页 |
| ·DNA 作用机理 | 第15页 |
| ·RNA 作用机理 | 第15-16页 |
| ·假基因调控在医学上的应用 | 第16-17页 |
| ·假基因与进化 | 第17-18页 |
| ·保持真核生物基因组的流动性 | 第17页 |
| ·物种之间亲缘关系的确定 | 第17-18页 |
| ·“沉默”基因在进化中的作用 | 第18页 |
| ·假基因的“复活” | 第18-19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| 2 引言 | 第20-23页 |
| 3 材料、试剂与仪器 | 第23-27页 |
| ·质粒和菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·工具酶 | 第23页 |
| ·DNA 和蛋白 Marker | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·主要溶液 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-27页 |
| 4 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·猪肝脏总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·实验准备 | 第27页 |
| ·猪肝脏组织 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR 法获得猪尿酸氧化酶基因 | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·RT-PCR 获得猪尿酸酶基因 | 第29-30页 |
| ·猪尿酸氧化酶表达载体的构建 | 第30-33页 |
| ·原核表达载体 pET-22b（+）的质粒提取 | 第30-31页 |
| ·猪尿酸酶重组质粒的构建 | 第31-33页 |
| ·pET-22b/pUOX 重组菌的诱导表达及酶活测定 | 第33-35页 |
| ·pET-22b/pUOX 的蛋白表达 | 第33-34页 |
| ·pET-22b/pUOX 酶活的测定 | 第34-35页 |
| ·人尿酸酶基因的获取 | 第35-36页 |
| ·人尿酸酶菌株的活化 | 第35页 |
| ·人尿酸酶工程菌质粒的提取 | 第35页 |
| ·人尿酸酶基因的扩增 | 第35-36页 |
| ·人猪尿酸酶重组基因的克隆及表达 | 第36-40页 |
| ·重叠延伸引物的设计 | 第36页 |
| ·人、猪尿酸酶基因外显子的克隆 | 第36-37页 |
| ·人猪尿酸酶重组基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·人猪尿酸酶重组质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·表达载体 pET-22b（+）的质粒提取 | 第38页 |
| ·重组基因及质粒的双酶切 | 第38-40页 |
| ·pEU-H1-2 的表达及优化 | 第40页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与菌密度的关系 | 第40页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与诱导时间的关系 | 第40页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与 IPTG 浓度关系的测定 | 第40页 |
| ·pEU-H1-2 酶活的测定 | 第40-41页 |
| 5. 结果与分析 | 第41-52页 |
| ·RT-PCR 法获得猪尿酸酶基因 | 第41-42页 |
| ·猪尿酸酶 pET-22b/pUOX 的表达及酶活测定 | 第42-43页 |
| ·猪尿酸酶 pET-22b/pUOX 的表达 | 第42-43页 |
| ·猪尿酸酶 pET-22b/pUOX 的酶活测定 | 第43页 |
| ·人尿酸酶基因的提取及扩增 | 第43-44页 |
| ·人猪重组基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·人、猪尿酸酶外显子的克隆 | 第44-45页 |
| ·人猪尿酸氧化酶重组基因的克隆 | 第45-46页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第46-48页 |
| ·重组质粒的表达及酶活测定 | 第48-51页 |
| ·宿主菌 BL21（DE3）生长曲线的测定 | 第48页 |
| ·重组质粒 pEU-H1-2 的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与发酵液浓度的关系 | 第49-50页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与时间的关系 | 第50-51页 |
| ·pEU-H1-2 表达量与 IPTG 浓度关系 | 第51页 |
| ·人猪尿酸酶重组蛋白酶活性 | 第51-52页 |
| 6 结论 | 第52-54页 |
| ·猪尿酸酶基因的提取、克隆及表达 | 第52页 |
| ·人尿酸酶的获取、克隆及表达 | 第52页 |
| ·人 1-2 号外显子的替换、克隆及表达 | 第52-54页 |
| 7 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简介 | 第62-63页 |
| 附件 | 第63-64页 |
