家蚕肠道产淀粉酶细菌的分离鉴定及其酶基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-15页 |
| ·细菌α-淀粉酶研究进展 | 第8-15页 |
| ·细菌α-淀粉酶的结构与特性 | 第8-10页 |
| ·细菌α-淀粉酶的研究及应用 | 第10-11页 |
| ·家蚕肠道菌研究概况 | 第11页 |
| ·产酶益生菌在微生态制剂中的应用 | 第11-15页 |
| ·益生菌简介 | 第11-12页 |
| ·芽孢杆菌属细菌特点及作用机理 | 第12-13页 |
| ·芽孢杆菌属细菌研究进展及应用 | 第13-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| ·研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| ·主要研究内容 | 第16页 |
| ·家蚕肠道产淀粉酶菌筛选及菌种鉴定 | 第16页 |
| ·产酶菌α-淀粉酶基因的克隆及分析 | 第16页 |
| ·产酶菌α-淀粉酶基因原核表达的研究 | 第16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·仪器与试剂 | 第17-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第17页 |
| ·主要生化试剂 | 第17-18页 |
| ·常用溶液的配置 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·家蚕肠道产淀粉酶细菌的筛选 | 第20-21页 |
| ·家蚕肠道菌的富集培养 | 第20页 |
| ·家蚕肠道菌的分离纯化 | 第20-21页 |
| ·产淀粉酶菌株的筛选 | 第21页 |
| ·产淀粉酶菌株酶活测定 | 第21-22页 |
| ·标准曲线的制作 | 第21-22页 |
| ·酶活的测定 | 第22页 |
| ·分离菌的种属鉴定 | 第22-26页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提前 | 第22-24页 |
| ·16SrDNA 序列的 PCR 扩增及克隆测序 | 第24-26页 |
| ·16SrDNA 序列分析及数据处理 | 第26页 |
| ·产酶菌α-淀粉酶基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·引物设计及产酶基因克隆 | 第26-27页 |
| ·克隆测序结果分析及系统发育树绘制 | 第27页 |
| ·含淀粉酶基因原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第29-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-42页 |
| ·家蚕肠道菌产淀粉酶菌株的筛选及产酶活力检测 | 第31-32页 |
| ·分离菌菌种鉴定 | 第32-35页 |
| ·形态特征观察 | 第32-33页 |
| ·产淀粉酶细菌菌株基因组总 DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·细菌 16SrDNA 通用引物 PCR 扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR 扩增产物测序结果比对及进化树绘制 | 第35页 |
| ·产酶菌α-淀粉酶基因克隆 | 第35-39页 |
| ·产α-淀粉酶基因扩增结果及胶回收 | 第35-37页 |
| ·PCR 扩增产物克隆测序结果分析及进化树绘制 | 第37-39页 |
| ·产淀粉酶基因序列分析 | 第39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-45页 |
| ·产酶菌株的分离与筛选 | 第42页 |
| ·分离菌的种属鉴定 | 第42页 |
| ·产酶菌α-淀粉酶基因的克隆测序 | 第42-43页 |
| ·产酶基因原核表达结果分析 | 第43-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 个人简介 | 第54页 |
