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水稻多逆境诱导基因OsCSR、OsXET9及OsGAD3的表达、克隆与OsGAD3的功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
一 绪论第11-25页
   ·前言第11-12页
   ·文献综述第12-23页
     ·提高水稻抗逆性的重要意义第12页
     ·植物所遭受的逆境胁迫第12-14页
     ·植物在逆境胁迫下的生理响应第14-16页
     ·植物在逆境胁迫下的分子机制第16-21页
     ·木葡聚糖转葡糖苷酶(XET)第21页
     ·谷氨酸脱羧酶(GAD)第21-22页
     ·基因芯片技术第22-23页
     ·定量PCR技术第23页
     ·转基因技术第23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
   ·技术路线第24-25页
二 材料与方法第25-42页
   ·实验材料第25-30页
     ·供试植物材料第25页
     ·菌株和质粒第25-27页
     ·常用试剂第27页
     ·主要仪器第27-28页
     ·培养基第28-29页
     ·主要溶液及试剂的配制第29-30页
   ·芯片分析、定量PCR分析、基因克隆以及载体构建第30-38页
     ·水稻RNA提取及cDNA第一链合成第30页
     ·基因芯片分析第30-31页
     ·实时定量PCR分析第31-32页
     ·引物设计及序列分析第32页
     ·目的基因的克隆、回收及连接第32-33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及检测第33-34页
     ·大肠杆菌质粒的小量快速提取第34-35页
     ·植物表达载体构建第35-36页
     ·目的基因与表达载体的连接第36-37页
     ·农杆菌感受态细胞的制备、转化及检测第37-38页
   ·水稻93-11的遗传转化第38-39页
     ·愈伤组织的诱导第38页
     ·愈伤组织的继代第38页
     ·农杆菌介导转化水稻愈伤组织第38-39页
     ·愈伤组织的筛选培养第39页
     ·愈伤组织的预分化培养第39页
     ·愈伤组织的分化培养第39页
     ·生根培养第39页
     ·移栽第39页
   ·再生植株的鉴定第39-42页
     ·CTAB法提取水稻植株叶片DNA第39-40页
     ·T0代转基因植株鉴定第40-41页
     ·转基因植株的表型观察第41-42页
三 实验结果与分析——OsCSR基因的克隆与表达分析第42-47页
   ·OsCSR基因在逆境条件下的表达分析第42-43页
   ·OsCSR基因cDNA的克隆第43页
   ·OsCSR基因序列分析第43-47页
四 实验结果与分析——OsXET9基因的克隆与表达分析第47-56页
   ·OsXET9基囚的芯片分析结果第47页
   ·OsXET9基因实时定量PCR结果第47-48页
   ·OsXET9基因cDNA的克隆第48页
   ·OsXET9基因序列分析第48-56页
五 结果与分析——OsGAD3基因的表达、克隆与功能分析第56-68页
   ·OsGAD3基因在逆境条件下的表达分析第56-57页
   ·OsGAD3基因cDNA的克隆第57页
   ·OsGAD3基因序列分析第57-63页
   ·OsGAD3转基因功能分析第63-68页
     ·D-163+1300-OsGAD3表达载体构建第63-64页
     ·将D-163+1300-OsGAD3载体转化农杆菌EHA105第64-65页
     ·农杆菌转化水稻93-11及转基因植株鉴定分析第65-68页
六 讨论第68-71页
   ·OsCSR基因是一个新的水稻候选低温响应基因第68页
   ·OsXET9基因是一个重要的水稻候选耐逆功能基因第68-69页
   ·OsGAD3基因是一个重要的水稻耐逆功能基因第69-70页
   ·转OsGAD3基因阳性植株的检测方法第70-71页
七 结论第71-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-81页
在读期间发表论文情况第81页

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