摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
一 绪论 | 第11-25页 |
·前言 | 第11-12页 |
·文献综述 | 第12-23页 |
·提高水稻抗逆性的重要意义 | 第12页 |
·植物所遭受的逆境胁迫 | 第12-14页 |
·植物在逆境胁迫下的生理响应 | 第14-16页 |
·植物在逆境胁迫下的分子机制 | 第16-21页 |
·木葡聚糖转葡糖苷酶(XET) | 第21页 |
·谷氨酸脱羧酶(GAD) | 第21-22页 |
·基因芯片技术 | 第22-23页 |
·定量PCR技术 | 第23页 |
·转基因技术 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24-25页 |
二 材料与方法 | 第25-42页 |
·实验材料 | 第25-30页 |
·供试植物材料 | 第25页 |
·菌株和质粒 | 第25-27页 |
·常用试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·培养基 | 第28-29页 |
·主要溶液及试剂的配制 | 第29-30页 |
·芯片分析、定量PCR分析、基因克隆以及载体构建 | 第30-38页 |
·水稻RNA提取及cDNA第一链合成 | 第30页 |
·基因芯片分析 | 第30-31页 |
·实时定量PCR分析 | 第31-32页 |
·引物设计及序列分析 | 第32页 |
·目的基因的克隆、回收及连接 | 第32-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及检测 | 第33-34页 |
·大肠杆菌质粒的小量快速提取 | 第34-35页 |
·植物表达载体构建 | 第35-36页 |
·目的基因与表达载体的连接 | 第36-37页 |
·农杆菌感受态细胞的制备、转化及检测 | 第37-38页 |
·水稻93-11的遗传转化 | 第38-39页 |
·愈伤组织的诱导 | 第38页 |
·愈伤组织的继代 | 第38页 |
·农杆菌介导转化水稻愈伤组织 | 第38-39页 |
·愈伤组织的筛选培养 | 第39页 |
·愈伤组织的预分化培养 | 第39页 |
·愈伤组织的分化培养 | 第39页 |
·生根培养 | 第39页 |
·移栽 | 第39页 |
·再生植株的鉴定 | 第39-42页 |
·CTAB法提取水稻植株叶片DNA | 第39-40页 |
·T0代转基因植株鉴定 | 第40-41页 |
·转基因植株的表型观察 | 第41-42页 |
三 实验结果与分析——OsCSR基因的克隆与表达分析 | 第42-47页 |
·OsCSR基因在逆境条件下的表达分析 | 第42-43页 |
·OsCSR基因cDNA的克隆 | 第43页 |
·OsCSR基因序列分析 | 第43-47页 |
四 实验结果与分析——OsXET9基因的克隆与表达分析 | 第47-56页 |
·OsXET9基囚的芯片分析结果 | 第47页 |
·OsXET9基因实时定量PCR结果 | 第47-48页 |
·OsXET9基因cDNA的克隆 | 第48页 |
·OsXET9基因序列分析 | 第48-56页 |
五 结果与分析——OsGAD3基因的表达、克隆与功能分析 | 第56-68页 |
·OsGAD3基因在逆境条件下的表达分析 | 第56-57页 |
·OsGAD3基因cDNA的克隆 | 第57页 |
·OsGAD3基因序列分析 | 第57-63页 |
·OsGAD3转基因功能分析 | 第63-68页 |
·D-163+1300-OsGAD3表达载体构建 | 第63-64页 |
·将D-163+1300-OsGAD3载体转化农杆菌EHA105 | 第64-65页 |
·农杆菌转化水稻93-11及转基因植株鉴定分析 | 第65-68页 |
六 讨论 | 第68-71页 |
·OsCSR基因是一个新的水稻候选低温响应基因 | 第68页 |
·OsXET9基因是一个重要的水稻候选耐逆功能基因 | 第68-69页 |
·OsGAD3基因是一个重要的水稻耐逆功能基因 | 第69-70页 |
·转OsGAD3基因阳性植株的检测方法 | 第70-71页 |
七 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
在读期间发表论文情况 | 第81页 |