| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·核孤儿受体 Nur77 及其 NR4A 家族 | 第9-13页 |
| ·概况 | 第9-10页 |
| ·NR4A 家族的调控 | 第10-11页 |
| ·NR4A 家族参与脂类的合成与分解代谢 | 第11-13页 |
| ·甘油激酶 GK 及其功能介绍 | 第13-16页 |
| ·甘油激酶 GK | 第13-15页 |
| ·GK 参与人体脂类代谢的重要过程 | 第15-16页 |
| ·本课题研究进展 | 第16-19页 |
| 第二章 GK 抑制 Nur77 的转录活性 | 第19-43页 |
| ·材料与方法 | 第19-28页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·细胞 | 第19页 |
| ·动物 | 第19页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-21页 |
| ·一般细胞培养条件 | 第21页 |
| ·GK 激酶活性缺失体的构建 | 第21-22页 |
| ·ApoA5-pGL3 报告基因载体构建 | 第22页 |
| ·目的片段回收 | 第22页 |
| ·酶切 | 第22页 |
| ·连接 | 第22-23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·菌落 PCR | 第23页 |
| ·质粒提取 | 第23-24页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第24页 |
| ·Western Blot | 第24-25页 |
| ·Co-IP | 第25页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 | 第25-26页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·小鼠体内转染 | 第27页 |
| ·小鼠肝细胞总 RNA 提取 | 第27页 |
| ·RT-PCR | 第27页 |
| ·Real-time RCR | 第27-28页 |
| ·统计学分析 | 第28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-42页 |
| ·GK 与 Nur77 的相互作用 | 第28-29页 |
| ·GK 与 Nur77 相互作用的结构域 | 第29-30页 |
| ·Nur77-GK 相互作用不依赖于 GK 活性 | 第30-33页 |
| ·GK 及 GK 截短体、突变体对 Nur77 转录激活的影响 | 第33-39页 |
| ·GK 上调脂代谢相关基因的转录 | 第39-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 GK 慢病毒系统构建及其在细胞内的应用 | 第43-55页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·质粒 | 第43页 |
| ·细胞 | 第43页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第43-44页 |
| ·主要溶液配制 | 第44页 |
| ·GK 慢病毒过表达载体的构建 | 第44页 |
| ·GK 慢病毒干涉载体的构建 | 第44页 |
| ·慢病毒包装 | 第44-45页 |
| ·流式细胞术测病毒滴度 | 第45页 |
| ·慢病毒感染效果检测 | 第45页 |
| ·统计学分析 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-54页 |
| ·GK 慢病毒过表达载体的构建和包装 | 第46-49页 |
| ·GK 慢病毒干涉载体的构建和包装 | 第49-52页 |
| ·干涉 GK 对 Nur77 调控的脂代谢相关基因转录影响 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 总结和展望 | 第55-56页 |
| ·总结 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |