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茶叶抗坏血酸过氧化物酶(APX)的生理学与分子生物学研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一章 前言第15-36页
 1 植物APX的研究进展第15-22页
   ·APX的分布与定位第15-17页
     ·APX的分布第15页
     ·APX的定位及同工酶特点第15-17页
   ·APX的作用机制和生理功能第17-18页
   ·APX的分子生物学第18-20页
     ·APX的基因克隆第18-20页
     ·植物转APX基因及其表达第20页
   ·环境因子对APX的影响第20-22页
 2 茶叶中主要酶研究进展第22-34页
   ·茶叶加工中主要酶类变化研究第22-29页
     ·绿茶加工中主要酶的变化第22-26页
     ·红茶加工中主要酶的变化第26-28页
     ·乌龙茶加工中主要酶活性的变化第28-29页
     ·其他茶类加工中主要酶活性的变化第29页
   ·茶叶同工酶的研究第29-32页
   ·茶叶重要功能基因的克隆第32-34页
 3 本研究的目的意义和研究内容第34-36页
   ·研究的目的意义第34-35页
   ·主要研究内容第35-36页
第二章 茶树鲜叶APX活性测定方法的建立与变化规律探讨第36-44页
 1 材料与方法第36-38页
   ·材料和仪器第36页
   ·试验方法第36-37页
     ·APX酶液的制备第36-37页
     ·APX活性的测定第37页
     ·计算公式第37页
     ·数据统计与分析第37页
   ·试验处理第37-38页
     ·不同量的PVPP对鲜叶APX活性的影响第37页
     ·不同pH的提取液、反应液对鲜叶APX活性的影响第37页
     ·不同底物浓度对鲜叶APX活性的影响第37页
     ·鲜叶冷冻储藏天数对APX活性的影响第37页
     ·不同茶树品种APX活性的比较第37-38页
     ·茶树鲜叶不同叶位APX活性的比较第38页
 2 结果与分析第38-42页
   ·茶树鲜叶APX活性测定方法的建立第38-40页
     ·不同量的PVPP对鲜叶APX活性的影响第38页
     ·不同pH的提取液、反应液对鲜叶APX活性的影响第38-39页
     ·不同底物浓度对鲜叶APX活性的影响第39-40页
   ·茶树鲜叶APX活性的变化规律第40-42页
     ·鲜叶冷冻贮藏天数对茶叶APX活性的影响第40页
     ·不同茶树品种APX活性的变化规律第40-41页
     ·茶树鲜叶不同叶位APX活性的比较第41-42页
 3 讨论第42-44页
   ·茶树鲜叶APX活性的测定条件第42页
   ·不同茶树品种APX活性变化第42-43页
   ·茶树鲜叶不同叶位APX活性变化第43-44页
第三章 茶叶加工过程APX活性及维生素C的变化第44-53页
 1 材料与方法第45-46页
   ·材料第45页
   ·试验方法第45-46页
     ·萎凋工艺处理第45页
     ·做青工艺处理第45页
     ·茶叶APX活性的测定第45页
     ·茶叶中维生素C含量的测定第45-46页
     ·数据统计与分析第46页
 2 结果与分析第46-49页
   ·茶叶萎凋过程APX活性变化第46-47页
   ·乌龙茶加工过程中APX活性的变化第47-48页
   ·茶叶萎凋过程维生素C变化第48-49页
   ·乌龙茶加工过程中维生素C的变化第49页
 3 讨论第49-53页
   ·茶叶加工过程APX活性的变化第49-50页
   ·茶叶加工过程维生素C含量的变化第50-51页
   ·茶叶加工过程APX活性与维生素C含量的关系第51-53页
第四章 茶叶APX同工酶分析第53-62页
 1 材料与方法第53-55页
   ·试验材料第53页
   ·方法第53-55页
     ·茶叶APX同工酶的提取第53-54页
     ·APX同工酶垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳第54页
     ·APX同工酶的染色第54-55页
     ·同工酶迁移率的计算第55页
 2 结果与分析第55-59页
   ·不同茶树品种APX同工酶的差异分析第55-57页
   ·茶叶萎凋过程中APX同工酶的变化第57-59页
 3 讨论第59-62页
   ·AsA对茶叶APX同工酶电泳缓冲体系的作用第59-60页
   ·不同茶树品种APX同工酶差异第60页
   ·茶叶萎凋过程中APX同工酶的变化第60-62页
第五章 茶叶APX基因克隆与生物信息学分析第62-100页
 1 材料与方法第62-71页
   ·材料第62页
     ·供试茶叶第62页
     ·供试菌种第62页
   ·主要仪器设备第62页
   ·主要试剂第62-63页
   ·方法第63-71页
     ·茶叶总RNA的提取与分离第63-64页
     ·总RNA质量的检测第64页
     ·茶叶APX基因cDNA保守区的克隆第64-67页
     ·茶叶APX基因cDNA3’RACE第67-68页
     ·茶叶APX基因cDNA5’RACE扩增第68-71页
     ·全长序列拼接第71页
     ·全长序列生物信息学分析第71页
 2 结果与分析第71-98页
   ·茶树鲜叶总RNA提取纯度与浓度检测第71-73页
   ·cAPX cDNA保守区的克隆第73-75页
   ·茶叶cAPX cDNA的3’RACE克隆结果第75-76页
   ·茶叶cAPX cDNA的5’RACE克隆结果第76-77页
   ·茶叶cAPX基因全长序列拼接第77-80页
   ·茶叶cAPX基因序列分析第80-84页
     ·cAPX核苷酸序列同源性比较第80-81页
     ·cAPX氨基酸序列同源性比较第81-84页
   ·茶叶cAPX生物信息学分析第84-93页
     ·茶叶cAPX蛋白的基本理化特性第84-85页
     ·茶叶cAPX蛋白的疏水性预测与分析第85-86页
     ·茶叶cAPX蛋白的跨膜信号分析第86页
     ·茶叶cAPX蛋白卷曲螺旋结构的预测与分析第86-87页
     ·茶叶cAPX信号肽预测与分析第87-88页
     ·茶叶cAPX磷酸化位点预测与分析第88-89页
     ·茶叶cAPX蛋白二级结构预测第89-90页
     ·茶叶cAPX三维结构预测与分析第90-91页
     ·茶叶cAPX基因功能的分析第91-92页
     ·茶叶cAPX蛋白的功能预测第92-93页
   ·与印度APX cDNA的序列分析比较第93-98页
     ·与印度APXcDNA的全长差异比较第93-96页
     ·与印度APXcDNA的氨基酸差异比较第96-98页
 3 讨论第98-100页
   ·高纯度茶叶RNA提取第98页
   ·茶叶cAPX基因克隆及序列分析第98页
   ·茶叶cAPX基因生物信息学分析第98-99页
   ·茶叶胞质型APX基因cDNA全长获得的意义第99-100页
第六章 茶叶APX基因的定量表达第100-111页
 1 材料与方法第100-102页
   ·材料处理第100-101页
   ·试剂与仪器第101页
   ·总RNA提取以及纯度、完整性鉴定第101页
   ·cDNA合成第101页
   ·实时荧光定量PCR第101-102页
     ·实时荧光定量PCR引物设计第101页
     ·两步法荧光定量PCR第101-102页
     ·标准曲线的制定与结果计算第102页
 2 结果与分析第102-108页
   ·RNA纯度和完整性第102-103页
   ·标准曲线的建立第103页
   ·目的基因和参照基因的特异性扩增第103-106页
   ·不同茶树品种APX基因的表达量差异第106-107页
   ·不同萎凋时间对福鼎大白茶APX基因的表达量的影响第107-108页
 3 讨论第108-111页
   ·实时荧光定量PCR技术在APX基因定量表达上应用第108-110页
   ·不同茶树品种APX基因定量表达的差异第110页
   ·茶叶萎凋过程APX基因定量表达的差异第110-111页
第七章 结论第111-114页
 1 本研究的主要结论第111-113页
 2 本研究的主要创新点第113-114页
参考文献第114-127页
附录第127-148页
在学期间发表的主要论文第148-149页
致谢第149页

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