| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 一、NF-κB信号通路 | 第11-14页 |
| 二、TGFβ信号通路调控 | 第14-17页 |
| 第一部分 HPD正调控NF-κB通路促进肺癌细胞存活和迁移 | 第17-50页 |
| 一、材料与方法 | 第17-21页 |
| 1. 质粒、试剂、抗体、实验动物 | 第17页 |
| 2. RNA干涉实验 | 第17-18页 |
| 3. RNA提取、反转录和实时定量PCR | 第18页 |
| 4. 荧光素酶报告基因实验 | 第18-19页 |
| 5. 免疫共沉淀 | 第19页 |
| 6. 泛素化实验 | 第19页 |
| 7. 慢病毒干涉载体构建、包装、感染细胞 | 第19-20页 |
| 8. TNFα、VP16、PMA、HGA、HPP处理细胞 | 第20页 |
| 9. 免疫组化 | 第20页 |
| 10. 细胞周期实验 | 第20-21页 |
| 11. 细胞增殖实验 | 第21页 |
| 12. 细胞迁移和克隆形成实验 | 第21页 |
| 二、结果 | 第21-46页 |
| 1. HPD与NEMO体内相互作用实验 | 第21-23页 |
| 2. HPD,NEMO和IKKβ可形成复合体 | 第23-25页 |
| 3. HPD与NEMO的结合区域 | 第25-26页 |
| 4. 过表达HPD激活NF-κB报告基因活性 | 第26-28页 |
| 5. 过表达HPD促进NF-κB靶基因表达 | 第28-29页 |
| 6. 过表达HPD促进IκBα的降解 | 第29-30页 |
| 7. 敲低HPD抑制NF-κB报告基因活性 | 第30-32页 |
| 8. HPD激活NF-κB通路不依赖其代谢酶活性 | 第32-34页 |
| 9. HPD促进NEMO的泛素化 | 第34-36页 |
| 10. HPD在肺癌细胞株和肺癌组织中高表达 | 第36-38页 |
| 11. 肺癌中HPD表达与NF-κB通路活性正相关 | 第38-41页 |
| 12. 慢病毒干涉载体的构建与病毒包装 | 第41-43页 |
| 13. HPD提高肺癌细胞克隆形成和迁移能力 | 第43-46页 |
| 三、讨论 | 第46-50页 |
| 第二部分 NLK通过Smad4负调控TGFβ信号通路 | 第50-58页 |
| 一、材料与方法 | 第50-52页 |
| 1. 质粒,抗体,试剂 | 第50-51页 |
| 2. TGFβ,放线菌酮和MG132处理细胞 | 第51页 |
| 3. 免疫共沉淀 | 第51页 |
| 4. GST-pull down | 第51页 |
| 5. 荧光素酶报告基因实验 | 第51页 |
| 6. Smad4稳定性实验 | 第51-52页 |
| 7. 泛素化实验 | 第52页 |
| 二、结果 | 第52-57页 |
| 1. NLK与Smad4相互作用 | 第52-53页 |
| 2. NLK通过Smad4抑制TGFβ信号通路 | 第53-55页 |
| 3. NLK促进Smad4的降解和泛素化修饰 | 第55-57页 |
| 三、讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 附录 | 第70-90页 |
| 附录1.常用实验技术详细步骤 | 第70-74页 |
| 附录2.常用实验试剂的配制 | 第74-77页 |
| 附录3.主要仪器设备 | 第77-78页 |
| 附录4.实际所用PCR引物序列 | 第78-80页 |
| 附录5.综述 | 第80-90页 |
| 参考文献 | 第85-90页 |
| 个人简介 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
