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纳米材料促进质粒介导的细菌耐药基因接合转移及机制研究

摘要第1-10页
Abstract第10-15页
绪论第15-32页
 1 纳米材料及其安全性问题第15-25页
   ·纳米材料的性能和分类第15-16页
     ·纳米材料性能第15-16页
     ·纳米材料的分类第16页
   ·纳米材料的应用第16-20页
     ·纳米材料在工业及日用品中的应用第17页
     ·纳米材料在生物医学方面的应用第17-18页
     ·纳米材料在环境领域的应用第18-20页
   ·纳米材料在水环境中的残留第20-22页
   ·纳米材料安全性问题第22-25页
     ·纳米材料的毒性第22-24页
     ·纳米材料安全性评价的进展第24-25页
 2 细菌耐药性第25-30页
   ·细菌耐药性的产生及危害第25-26页
   ·细菌获得耐药性的方式第26-27页
   ·接合转移过程第27页
   ·水环境中耐药菌与耐药基因的污染现状及来源第27-29页
   ·影响水中耐药基因水平转移的因素第29-30页
 3 课题的提出第30-31页
 4 课题的目的和意义第31-32页
   ·课题的目的第31页
   ·课题的意义第31-32页
第一章 :细菌耐药基因接合转移模型的建立第32-44页
 1 前言第32页
 2 材料与方法第32-39页
   ·质粒与菌株第32-36页
   ·主要试剂、培养基及溶液配制第36-37页
   ·细菌的培养和接合转移实验第37页
   ·接合子的筛选第37-38页
   ·接合子的确认第38页
   ·接合转移频率的计算第38-39页
 3 结果第39-41页
   ·接合对和抗生素的使用第39页
   ·接合子确证的结果第39-41页
   ·不同接合转移系统的接合转移频率第41页
 4 讨论第41-44页
第二章 :不同纳米材料对细菌耐药基因接合转移的影响第44-52页
 1 前言第44-45页
 2 材料与方法第45-46页
   ·纳米材料悬液的制备方法第45页
   ·菌株和接合对第45-46页
   ·纳米材料作用的接合实验第46页
   ·接合子的筛选第46页
   ·接合转移频率的计算第46页
 3 结果第46-50页
   ·不同纳米材料对RP4接合转移的影响第46-47页
   ·纳米Al_2O_3对RP4在不同接合体系中转移的影响第47-48页
   ·纳米Al_2O_3对RK2接合转移的影响第48页
   ·纳米Al_2O_3对pCF10接合转移的影响第48-50页
 4 讨论第50-52页
第三章 :纳米Al_2O_3影响多重耐药质粒RP4接合转移的规律第52-78页
 1 前言第52页
 2 材料与方法第52-59页
   ·菌株和试剂第52-53页
   ·供体菌和受体菌的培养和处理第53页
   ·单因素影响的接合实验第53-54页
     ·纳米Al_2O_3浓度对RP4接合转移的影响第53-54页
     ·纳米Al_2O_3作用下初始菌浓度对RP4接合转移的影响第54页
     ·纳米Al_2O_3作用下接合时间对RP4接合转移的影响第54页
     ·纳米Al_2O_3作用下接合温度对RP4接合转移的影响第54页
     ·纳米Al_2O_3作用下pH值对RP4接合转移的影响第54页
   ·正交实验设计第54-55页
   ·正交设计的接合实验第55-57页
   ·纳米Al_2O_3对细菌存活影响实验第57-58页
   ·纳米Al_2O_3影响RP4接合转移的数学模型及实验方法第58-59页
   ·接合子筛选第59页
   ·接合转移频率的计算第59页
   ·数据统计分析第59页
 3 结果第59-69页
   ·菌株自发突变的排除和质粒非接合转移过程的排除第59页
   ·纳米Al_2O_3浓度对RP4接合转移的影响第59-60页
   ·纳米Al_2O_3作用下接合菌初始密度对RP4接合转移的影响第60-61页
   ·纳米Al_2O_3作用下接合时间对RP4接合转移的影响第61-62页
   ·纳米Al_2O_3作用下温度对RP4接合转移的影响第62页
   ·纳米Al_2O_3作用下pH值对RP4接合转移的影响第62-64页
   ·纳米Al_2O_3对RP4接合转移频率常数的影响第64页
   ·纳米Al_2O_3促进RP4接合转移过程中主要因素的确定第64-67页
   ·纳米Al_2O_3对细菌存活的影响第67-69页
 4 讨论第69-70页
 5 附录第70-78页
   ·利用SPSS17.0统计分析RP4在PBS中从大肠杆菌到沙门菌转移的正交实验结果第70-74页
   ·利用SAS软件统计分析RP4在LB中在大肠杆菌间转移的正交实验结果第74-78页
第四章 :纳米Al_2O_3促进多重耐药质粒RP4接合转移的机制第78-96页
 1 引言第78-79页
 2 材料与方法第79-84页
   ·菌株与质粒第79页
   ·菌株的培养和处理第79页
   ·纳米与大颗粒Al_2O_3对接合实验的干预第79-80页
   ·透射电镜样品制备与观察第80页
   ·原子力显微镜样品制备与观察第80页
   ·细菌氧化抗氧化系统的测定第80-81页
     ·接合菌液的蛋白质提取及定量第80-81页
     ·细菌氧化抗氧化系统指标的测定第81页
   ·接合调控基因与整体调控基因mRNA表达水平测定第81-84页
     ·细菌总RNA的提取第81页
     ·RT-PCR第81页
     ·荧光定量PCR检测mRNA的表达第81-84页
   ·数据统计分析第84页
 3 结果第84-93页
   ·纳米Al_2O_3对细菌细胞膜的影响第84-87页
   ·纳米Al_2O_3对细菌氧化抗氧化系统的影响第87-88页
   ·纳米Al_2O_3对细菌接合的影响第88-90页
   ·纳米Al_2O_3对接合转移调控基因和整体调控基因的影响第90-93页
     ·内参基因的确定第90页
     ·RP4调控基因与整体调控基因的mRNA表达第90-93页
 4 讨论第93-96页
结论第96-97页
参考文献第97-119页
文献综述第119-131页
 参考文献第125-131页
代表性论文第131-152页
个人简介第152-154页
致谢第154页

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