摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
·新城疫病毒概述 | 第12-14页 |
·传染性支气管炎病毒概述 | 第14-16页 |
·检测方法研究进展 | 第16-23页 |
·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第16-17页 |
·反转录—聚合酶链式反应技术(RT—PCR) | 第17-18页 |
·核酸探针技术 | 第18页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第18-19页 |
·基因芯片技术 | 第19-20页 |
·胶体金免疫层析技术 | 第20-23页 |
2 研究目的与意义 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-37页 |
·材料 | 第24-25页 |
·抗原 | 第24页 |
·细胞、血清、鸡胚及实验动物 | 第24页 |
·主要试剂与材料 | 第24-25页 |
·主要试剂的配制 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-37页 |
·新城疫HN基因重组质粒鉴定及蛋白的表达纯化 | 第25-27页 |
·传染性支气管炎N基因重组质粒鉴定及蛋白的表达纯化 | 第27-28页 |
·单克隆抗体的制备及纯化 | 第28-30页 |
·鸡抗IBV多克隆抗体的制备及纯化 | 第30-31页 |
·试纸条检测方法的建立 | 第31-35页 |
·临床应用试验 | 第35-37页 |
4 结果与分析 | 第37-49页 |
·基因重组质粒鉴定及蛋白的表达纯化 | 第37-39页 |
·基因重组质粒鉴定 | 第37页 |
·蛋白诱导表达 | 第37-38页 |
·Western Blot检测蛋白的免疫学活性 | 第38-39页 |
·单克隆抗体的制备与纯化 | 第39-40页 |
·动物免疫 | 第39页 |
·单克隆抗体的获得 | 第39-40页 |
·单克隆抗体效价的测定 | 第40页 |
·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第40页 |
·单克隆抗体的冻存与复苏 | 第40页 |
·多克隆抗体的制备与纯化 | 第40-41页 |
·病毒的增殖与纯化 | 第40页 |
·鸡抗IBV多克隆抗体的制备 | 第40-41页 |
·多克隆抗体的特异性鉴定 | 第41页 |
·试纸条检测方法的建立 | 第41-47页 |
·胶体金的制备 | 第41页 |
·胶体金标记单克隆抗体蛋白最适pH值的确定 | 第41-43页 |
·胶体金标记单克隆抗体蛋白最适标记量的确定 | 第43页 |
·试纸条的构建 | 第43-44页 |
·试纸条包被条件的优化 | 第44页 |
·试纸条封闭条件的优化 | 第44-45页 |
·试纸条特异性的鉴定 | 第45页 |
·联检试纸条灵敏度的鉴定 | 第45-46页 |
·试纸条保存期的鉴定 | 第46-47页 |
·临床应用试验 | 第47-49页 |
5 讨论 | 第49-52页 |
·蛋白的纯化与表达 | 第49-50页 |
·单克隆抗体的制备 | 第50页 |
·胶体金的制备 | 第50页 |
·试纸条检测方法的建立 | 第50-51页 |
·临床应用试验 | 第51-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58页 |