| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-15页 |
| 1 研究背景 | 第11-14页 |
| 2 研究意义 | 第14-15页 |
| 第二章 内蒙古白绒山羊LEF1基因及小鼠UHS启动子的克隆 | 第15-26页 |
| 1 引言 | 第15页 |
| 2 实验材料 | 第15页 |
| ·相关试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| 3 实验方法 | 第15-22页 |
| ·内蒙古绒山羊LEF1基因的克隆 | 第15-20页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白的克隆 | 第20-22页 |
| 4 实验结果 | 第22-25页 |
| ·PCR扩增内蒙古绒山羊LEF1基因 | 第22-23页 |
| ·pMD-19TL重组质粒酶切鉴定 | 第23-24页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白启动子的克隆 | 第24-25页 |
| 5 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 LEF1基因皮肤特异表达载体构建并稳定转染胎儿成纤维细胞 | 第26-42页 |
| 1 引言 | 第26页 |
| 2 实验材料 | 第26-27页 |
| ·相关质粒、菌种和细胞 | 第26页 |
| ·相关试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-35页 |
| ·构建皮肤特异表达载体pCDsRed-KL并转染胎儿成纤维细胞 | 第27-31页 |
| ·构建皮肤特异表达载体pCDsRed-UL并转染胎儿成纤维细胞 | 第31-35页 |
| 4 实验结果 | 第35-41页 |
| ·皮肤特异表达载体pCDsRed-KL构建并转染胎儿成纤维细胞 | 第35-38页 |
| ·皮肤特异表达载体pCDsRed-UL构建并转染胎儿成纤维细胞 | 第38-41页 |
| 5.讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 LEF1皮肤特异性表达载体在内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞中的表达检测 | 第42-50页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 实验材料 | 第42页 |
| ·相关试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| 3 实验方法 | 第42-44页 |
| ·采取组织块 | 第42-43页 |
| ·原代培养 | 第43页 |
| ·表达载体pCDsRed-KL、pCDsRed-UL转染内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞 | 第43页 |
| ·转基因绒山羊皮肤维细胞克隆RT-PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 4 实验结果 | 第44-49页 |
| ·分离与纯化后的内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞 | 第44页 |
| ·稳定转染pCDsRed-KL、pCDsRed-UL绒山羊皮肤成纤维细胞克隆筛选 | 第44-45页 |
| ·转基因pCDsRed-KL绒山羊胎儿皮肤维细胞克隆RT-PCR鉴定 | 第45-47页 |
| ·转基因pCDsRed-UL绒山羊胎儿皮肤维细胞克隆RT-P-R鉴定 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 文献综述 | 第56-64页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文和参加的研究项目 | 第64页 |