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内蒙古白绒山羊LEF1基因皮肤特异性表达载体及其稳定转染细胞系的构建

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
英文缩略词表第10-11页
第一章 绪论第11-15页
 1 研究背景第11-14页
 2 研究意义第14-15页
第二章 内蒙古白绒山羊LEF1基因及小鼠UHS启动子的克隆第15-26页
 1 引言第15页
 2 实验材料第15页
   ·相关试剂第15页
   ·主要仪器设备第15页
 3 实验方法第15-22页
   ·内蒙古绒山羊LEF1基因的克隆第15-20页
   ·小鼠超高硫角蛋白的克隆第20-22页
 4 实验结果第22-25页
   ·PCR扩增内蒙古绒山羊LEF1基因第22-23页
   ·pMD-19TL重组质粒酶切鉴定第23-24页
   ·小鼠超高硫角蛋白启动子的克隆第24-25页
 5 讨论第25-26页
第三章 LEF1基因皮肤特异表达载体构建并稳定转染胎儿成纤维细胞第26-42页
 1 引言第26页
 2 实验材料第26-27页
   ·相关质粒、菌种和细胞第26页
   ·相关试剂第26-27页
   ·主要仪器设备第27页
 3 实验方法第27-35页
   ·构建皮肤特异表达载体pCDsRed-KL并转染胎儿成纤维细胞第27-31页
   ·构建皮肤特异表达载体pCDsRed-UL并转染胎儿成纤维细胞第31-35页
 4 实验结果第35-41页
   ·皮肤特异表达载体pCDsRed-KL构建并转染胎儿成纤维细胞第35-38页
   ·皮肤特异表达载体pCDsRed-UL构建并转染胎儿成纤维细胞第38-41页
 5.讨论第41-42页
第四章 LEF1皮肤特异性表达载体在内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞中的表达检测第42-50页
 1 引言第42页
 2 实验材料第42页
   ·相关试剂第42页
   ·主要仪器设备第42页
 3 实验方法第42-44页
   ·采取组织块第42-43页
   ·原代培养第43页
   ·表达载体pCDsRed-KL、pCDsRed-UL转染内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞第43页
   ·转基因绒山羊皮肤维细胞克隆RT-PCR鉴定第43-44页
 4 实验结果第44-49页
   ·分离与纯化后的内蒙古绒山羊皮肤成纤维细胞第44页
   ·稳定转染pCDsRed-KL、pCDsRed-UL绒山羊皮肤成纤维细胞克隆筛选第44-45页
   ·转基因pCDsRed-KL绒山羊胎儿皮肤维细胞克隆RT-PCR鉴定第45-47页
   ·转基因pCDsRed-UL绒山羊胎儿皮肤维细胞克隆RT-P-R鉴定第47-49页
 5 讨论第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55-56页
文献综述第56-64页
 参考文献第61-64页
攻读硕士学位期间发表的论文和参加的研究项目第64页

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