| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 目录 | 第12-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一部分 实验研究 | 第15-64页 |
| 第一章 不同激活方法对猪孤雌胚胎单倍体率的影响 | 第15-24页 |
| 1 材料 | 第15-16页 |
| 2 方法 | 第16-17页 |
| ·猪卵母细胞的采集与体外成熟培养 | 第16页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第16-17页 |
| ·卵子激活后的培养 | 第17页 |
| ·孤雌胚胎的染色体倍性分析 | 第17页 |
| ·数据分析 | 第17页 |
| 3 结果 | 第17-20页 |
| ·乙醇激活、电激活结合CB及电激活对猪体外成熟卵母细胞囊胚率的影响 | 第17-18页 |
| ·电激活结合MG-132或Thimerosal/DTT对猪体外成熟卵母细胞囊胚率的影响 | 第18-19页 |
| ·不同激活方法对猪孤雌囊胚单倍体率的影响 | 第19-20页 |
| 4 讨论 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-24页 |
| 第二章 猪孤雌胚胎类胚胎干细胞培养的研究 | 第24-37页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第25页 |
| ·化学小分子及细胞 | 第25页 |
| ·培养液 | 第25-26页 |
| 2. 方法 | 第26-28页 |
| ·猪卵母细胞的采集与体外成熟培养 | 第26页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第26页 |
| ·孤雌胚胎的体外发育培养 | 第26页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层的制备 | 第26-27页 |
| ·L-细胞饲养层的制备 | 第27-28页 |
| ·ES细胞的分离 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| ·培养液Ⅰ及不同胚龄对猪孤雌胚胎贴壁率的影响 | 第28页 |
| ·BRL细胞条件化的培养液对猪孤雌胚胎贴壁率及生长的影响 | 第28-29页 |
| ·小分子培养液及不同饲养层对猪孤雌胚胎贴壁率及生长的影响 | 第29-30页 |
| ·培养液Ⅳ对猪孤雌胚胎贴壁率及生长的影响 | 第30页 |
| ·培养液Ⅴ对猪孤雌胚胎贴壁率及生长的影响 | 第30页 |
| 4. 讨论 | 第30-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第三章 猪体外受精胚胎类胚胎干细胞培养的研究 | 第37-50页 |
| 1 材料 | 第37-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第37-38页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第38页 |
| ·化学小分子及细胞 | 第38页 |
| ·培养液 | 第38-39页 |
| 2. 方法 | 第39-41页 |
| ·猪卵母细胞的采集与体外成熟培养 | 第39页 |
| ·猪卵母细胞体外受精(IVF) | 第39-40页 |
| ·MEF细胞饲养层的制备 | 第40页 |
| ·L-细胞饲养层的制备 | 第40页 |
| ·STO细胞饲养层的制备 | 第40页 |
| ·ES细胞的分离 | 第40-41页 |
| ·ES细胞的鉴定 | 第41页 |
| 3. 结果 | 第41-43页 |
| ·培养液Ⅰ及不同胚龄对猪IVF胚胎贴壁率的影响 | 第41-42页 |
| ·BRL细胞条件化的培养液对猪IVF胚胎贴壁率及生长的影响 | 第42页 |
| ·小分子培养液对猪IVF胚胎贴壁率及生长的影响 | 第42页 |
| ·培养液Ⅳ及两种不同的饲养层对猪IVF胚胎贴壁率及生长的影响 | 第42-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 第四章 孤雌激活及体外受精胚胎的比较 | 第50-58页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第50-51页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第51页 |
| 2. 方法 | 第51-53页 |
| ·猪卵母细胞的采集与体外成熟培养 | 第51页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第51页 |
| ·猪卵母细胞体外受精 | 第51-52页 |
| ·卵母细胞体外发育培养 | 第52页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第52页 |
| ·囊胚Oct-4免疫荧光染色 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53页 |
| ·不同类型胚胎的体外发育以及囊胚质量比较 | 第53页 |
| ·比较猪孤雌胚胎和体外受精胚胎Oct-4免疫荧光染色效果 | 第53页 |
| 4. 讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 图版 | 第59-64页 |
| 第二部分 文献综述 | 第64-84页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间已发表学术论文 | 第85页 |
