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家蚕细胞周期蛋白Cyclin B3基因的克隆及其功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 文献综述第12-28页
   ·家蚕细胞系的建立第12-13页
   ·细胞周期调控的研究进展第13-19页
     ·细胞周期第13-14页
     ·细胞周期的分子调控机制第14-19页
   ·家蚕丝腺细胞周期调控的研究第19-23页
     ·丝腺组织内的细胞分裂研究第19页
     ·丝腺细胞系的分裂周期基因的表达谱分析第19-23页
   ·细胞周期周期蛋白CyclinB、CyclinB3的研究进展第23-25页
     ·CyclinB和CyclinB3的结构第23页
     ·CyclinB和CyclinB3的进化关系第23-24页
     ·CyclinB和CyclinB3在家蚕中的研究情况第24-25页
   ·细胞内的RNAi第25-28页
     ·RNAi的机制第25页
     ·细胞培养中的RNAi技术第25-28页
第二章 引言第28-30页
   ·研究背景及意义第28页
   ·技术路线第28-30页
第三章 家蚕细胞周期蛋白CyclinB3基因的克隆及序列分析第30-46页
   ·材料第30-32页
     ·实验材料第30页
     ·载体及宿主菌第30页
     ·试剂第30-31页
     ·主要仪器第31-32页
   ·方法第32-38页
     ·CyclinB3基因同源性搜索及EST拼接第32页
     ·CyclinB3基因的克隆第32-38页
     ·蛋白质理化性质及结构预测第38页
     ·系统发生分析第38页
     ·CyclinB3基因在各组织的表达谱分析第38页
   ·结果与分析第38-45页
     ·家蚕CyclinB3基因的cDNA克隆第38页
     ·家蚕CyclinB3基因的cDNA序列分析第38-43页
     ·系统发生分析第43-44页
     ·CyclinB3基因组织芯片表达谱分析第44-45页
   ·讨论第45-46页
第四章 细胞周期蛋白CyclinB3和CyclinB基因的功能研究第46-60页
   ·材料第46-48页
     ·细胞系第46页
     ·主要仪器设备第46-47页
     ·主要实验试剂第47页
     ·试剂配制第47-48页
   ·方法第48-52页
     ·CyclinB3和CyclinB基因片段的克隆第48-49页
     ·酶切鉴定第49页
     ·dsRNA的制备第49-51页
     ·dsRNA脂质体转染法第51页
     ·流式细胞仪检测步骤第51-52页
     ·NTT结果检测步骤第52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·家蚕CyclinB3、CyclinB基因片段的扩增第52-53页
     ·dsRNA的制备第53-54页
     ·BmN-SWU1细胞系的形态第54-55页
     ·流式细胞仪检测细胞周期分布的变化第55-56页
     ·四氮唑盐法(MTT)检测转染前后细胞生长抑制率变化第56-57页
   ·讨论第57-60页
第五章 小结第60-62页
参考文献第62-67页
附录第67-68页
致谢第68页

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