摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
·家蚕细胞系的建立 | 第12-13页 |
·细胞周期调控的研究进展 | 第13-19页 |
·细胞周期 | 第13-14页 |
·细胞周期的分子调控机制 | 第14-19页 |
·家蚕丝腺细胞周期调控的研究 | 第19-23页 |
·丝腺组织内的细胞分裂研究 | 第19页 |
·丝腺细胞系的分裂周期基因的表达谱分析 | 第19-23页 |
·细胞周期周期蛋白CyclinB、CyclinB3的研究进展 | 第23-25页 |
·CyclinB和CyclinB3的结构 | 第23页 |
·CyclinB和CyclinB3的进化关系 | 第23-24页 |
·CyclinB和CyclinB3在家蚕中的研究情况 | 第24-25页 |
·细胞内的RNAi | 第25-28页 |
·RNAi的机制 | 第25页 |
·细胞培养中的RNAi技术 | 第25-28页 |
第二章 引言 | 第28-30页 |
·研究背景及意义 | 第28页 |
·技术路线 | 第28-30页 |
第三章 家蚕细胞周期蛋白CyclinB3基因的克隆及序列分析 | 第30-46页 |
·材料 | 第30-32页 |
·实验材料 | 第30页 |
·载体及宿主菌 | 第30页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-38页 |
·CyclinB3基因同源性搜索及EST拼接 | 第32页 |
·CyclinB3基因的克隆 | 第32-38页 |
·蛋白质理化性质及结构预测 | 第38页 |
·系统发生分析 | 第38页 |
·CyclinB3基因在各组织的表达谱分析 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-45页 |
·家蚕CyclinB3基因的cDNA克隆 | 第38页 |
·家蚕CyclinB3基因的cDNA序列分析 | 第38-43页 |
·系统发生分析 | 第43-44页 |
·CyclinB3基因组织芯片表达谱分析 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第四章 细胞周期蛋白CyclinB3和CyclinB基因的功能研究 | 第46-60页 |
·材料 | 第46-48页 |
·细胞系 | 第46页 |
·主要仪器设备 | 第46-47页 |
·主要实验试剂 | 第47页 |
·试剂配制 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·CyclinB3和CyclinB基因片段的克隆 | 第48-49页 |
·酶切鉴定 | 第49页 |
·dsRNA的制备 | 第49-51页 |
·dsRNA脂质体转染法 | 第51页 |
·流式细胞仪检测步骤 | 第51-52页 |
·NTT结果检测步骤 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-57页 |
·家蚕CyclinB3、CyclinB基因片段的扩增 | 第52-53页 |
·dsRNA的制备 | 第53-54页 |
·BmN-SWU1细胞系的形态 | 第54-55页 |
·流式细胞仪检测细胞周期分布的变化 | 第55-56页 |
·四氮唑盐法(MTT)检测转染前后细胞生长抑制率变化 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
第五章 小结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
附录 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |